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  • 甘肅用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究
    甘肅用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

    Core 1型O-聚糖的水解:O-糖基化不僅難以研究,其自然異質(zhì)性也會導(dǎo)致其他分析出現(xiàn)問題。例如,由于樣品中存在許多不同的糖型,因此對完整或中等水平的重糖基化蛋白質(zhì)進行質(zhì)譜分析可能非常困難。酶法去除N-聚糖的解決方案已經(jīng)存在多年,Genvois的PNGase F是一種非常成熟的工具。O-糖的去除可能更具挑戰(zhàn)性,現(xiàn)有的O-糖釋放化學(xué)方法通常會導(dǎo)致蛋白質(zhì)發(fā)生重大修飾,因此不太適合下游分析。1. 用于方法開發(fā)的靈活產(chǎn)品形式;2. 可以結(jié)合酶以提高效率;3. 適用于自動化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可。人血清中 O-糖蛋白的富集:GlycOCATCH還可用于從復(fù)雜的樣品混合物(如人血清)中選...

  • 河南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究
    河南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

    與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括:OmniGlyZOR 微離心柱;PNGase F 凍干;RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性,否則某些 N-糖基化位點很難或無法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在變性條件下使用試劑盒中包含的PNGase F凍干和RapiGest? SF表面活性劑通過額外的去糖基化步驟去除。使用Genovis的OpeRAT對EPO進行O-糖位點特異性消化:對于jin攜帶一個或幾個 O-糖基化位...

  • 山西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    山西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    我們展示了使用兩種蛋白作為底物的OmniGLYZOR的性能。依那西普是一種 Fc 融合蛋白,含有 TNFα 受體的胞外結(jié)構(gòu)域。該結(jié)構(gòu)域用 2 個 N-糖和 8-11 個 1 個具有不同程度唾液酸化的 O-聚糖修飾。在 37°C 下將這種重糖基化蛋白在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時,可完全去除所有 N-和 O-糖,如中級 LC-MS 分析所示。促紅xibao生成素 (EPO) 是一種攜帶 3 個 N-聚糖和 1 個he心 1 個 O-聚糖的小蛋白質(zhì),其總質(zhì)量的近 40% 由聚糖組成。O-連接聚糖通常存在于蛋白質(zhì)的暴露位置,因為它們在蛋白質(zhì)折疊發(fā)生后附著。只有負(fù)責(zé)其...

  • 廣東N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    廣東N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    Genovis的PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復(fù)合物、雜交或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。該酶用于MS分析前的樣品制備,以降低蛋白質(zhì)異質(zhì)性并實現(xiàn)游離的聚糖分析,并研究N-聚糖的功能作用。1. 對所有哺乳動物N-聚糖的高效水解;2.對多種糖蛋白具有活性;3.可固定在即用型離心柱產(chǎn)品形式;4. 自動化友好型,96孔板,用于高通量 N-糖去除。Genovis的ImpaRATOR 是一種 O-糖依賴性蛋白酶,可消化攜帶粘蛋白型。O-聚糖的蛋白質(zhì),包括唾液酸化物質(zhì)、糖基化絲氨酸和 Thr 殘基的 N-末端。該酶產(chǎn)生攜帶...

  • 重慶PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    重慶PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    對Genovis的ImpaRATOR處理的樣品的分析表明,ImpaRATOR很好地消化了所有三種底物并產(chǎn)生了相似的糖肽,但預(yù)期的聚糖種類不同。用ImpaRATOR處理的樣品比其他樣品含有更多的變異,因為每種肽都檢測到多種聚糖結(jié)構(gòu)。觀察到的聚糖種類主要是單唾液酸化和二唾液酸化he心1結(jié)構(gòu),這與依那西普的預(yù)期一致。用ImpaRATOR或OpeRATOR消化的SialEXO預(yù)處理樣品均產(chǎn)生具有裸核1結(jié)構(gòu)的肽,但攜帶在ImpaRATOR消化樣品中觀察到的Tn抗原的肽T205-P207除外。依那西普用 SialEXO 和 GalactEXO 預(yù)處理,然后用 ImpaRATOR 消化,得到含有 Tn 抗原...

  • 青海凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    青海凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    當(dāng)在完整狀態(tài)下進行分析時,EPO的聚糖異質(zhì)性導(dǎo)致了非常復(fù)雜的質(zhì)譜圖。通過在 37°C 下在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時,可以有效地去除 N 糖(含有PNGase F酶)和 O-糖,如對應(yīng)于未修飾蛋白質(zhì)的單個峰所示。EPO上殘留了少量用乙?;僖核嵝揎椀腛-聚糖,因為OmniGLYZOR對這種結(jié)構(gòu)的水解效率低下。根據(jù)制造商Genvois的建議(在37°C下進行O/N孵育),兩種底物蛋白也用另一種市售的去糖基化產(chǎn)物處理,并顯示數(shù)據(jù)以供比較。另一方面,N-聚糖在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中翻譯地連接到未折疊的蛋白質(zhì)上。這導(dǎo)致某些 N-糖基化位點難以被 Genovis的PNGase F ...

  • 浙江N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    浙江N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    GlycOCATCH?親和純化:用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽親和純化的富集樹脂。GlycOCATCH親和純化以方便的離心柱形式提供。該產(chǎn)品包含:4 個 GlycOCATCH 親和純化微離心柱,每個柱能夠結(jié)合 50 μg 粘蛋白型 O-糖蛋白(總共 200 μg)。Genovis的SialEXO 凍干 200 單位,用于去除唾液酸;OpeRATOR 凍干 200 單位,用于結(jié)合的 O-糖蛋白的可選洗脫方法。1. 靶向 O-糖蛋白富集;2. 復(fù)雜樣品的特異性凈化;3. 用于改進 MS 分析的樣品制備。O-糖基化蛋白和肽的特異性富集:O-連接聚糖參與多種生物過程,包括抑制病原體引起的gan染、炎癥反應(yīng)...

  • 海南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶
    海南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶

    由于蛋白質(zhì)的O-糖模式的異質(zhì)性和O-糖結(jié)構(gòu)的OpeRATOR特異性,形成了重疊的肽,從而可以獲得O-糖位點的完整圖譜為了進行比較,相同材料的標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶消化物, 顯示難以分析的少量且非常大的糖肽。使用Genovis的OpeRATOR進行O-糖位點定位:OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶,可消化絲氨酸和蘇氨酸糖基化位點的粘蛋白型 O-糖蛋白 N 端。這會產(chǎn)生攜帶O-糖的糖肽,并能夠使用質(zhì)譜法進行O-糖分析、O-糖肽圖譜以及中級分析。下面是OpeRATOR消解位點的示意圖。為了測試選擇性,將一系列 O-糖基化、N-糖基化和非糖基化蛋白與 GlycOCATCH 一起孵育:洗脫O-糖基化...

  • 山西N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究
    山西N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

    使用Genovis的GalNAcEXO 對 O-糖基化生物制藥進行 Tn 抗原表征:未成熟的截短O-聚糖導(dǎo)致了復(fù)雜生物制藥的異質(zhì)性,使其分析更具挑戰(zhàn)性。 O-聚糖的he心由n-α-GalNAc殘基組成,通過糖苷鍵與絲氨酸或蘇氨酸連接,稱為Tn抗原。 現(xiàn)在,使用GalNAcEXO可以采用合適的酶策略來去除這些GalNAc并簡化生物制藥的表征。在質(zhì)譜圖中可以觀察到重復(fù)峰的模式。其次,在與GalNAcEXO酶孵育后,剩余的GalNAc殘基被完全去除,留下一個峰。因此,該工作流程確認(rèn)了 O-糖基化生物制藥上存在 Tn 抗原,并允許定量he心 GalNAc 水平。這種工作流程的另一個好處是減少了剩余的異...

  • 湖北PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    湖北PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    Core 1型O-聚糖的水解:O-糖基化不僅難以研究,其自然異質(zhì)性也會導(dǎo)致其他分析出現(xiàn)問題。例如,由于樣品中存在許多不同的糖型,因此對完整或中等水平的重糖基化蛋白質(zhì)進行質(zhì)譜分析可能非常困難。酶法去除N-聚糖的解決方案已經(jīng)存在多年,Genvois的PNGase F是一種非常成熟的工具。O-糖的去除可能更具挑戰(zhàn)性,現(xiàn)有的O-糖釋放化學(xué)方法通常會導(dǎo)致蛋白質(zhì)發(fā)生重大修飾,因此不太適合下游分析。1. 用于方法開發(fā)的靈活產(chǎn)品形式;2. 可以結(jié)合酶以提高效率;3. 適用于自動化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可。唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。SialEXO酶可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾...

  • 浙江用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    浙江用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    Genovis 是一家瑞典生物技術(shù)公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes?工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學(xué)工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界。 我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應(yīng)用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。?Genovis測試了 SialEXO 凍干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制劑上的性能。浙江用于自動化系統(tǒng)的9...

  • 遼寧用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶
    遼寧用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

    Genovis的PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復(fù)合物、雜交或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。該酶用于MS分析前的樣品制備,以降低蛋白質(zhì)異質(zhì)性并實現(xiàn)游離的聚糖分析,并研究N-聚糖的功能作用。1. 對所有哺乳動物N-聚糖的高效水解;2.對多種糖蛋白具有活性;3.可固定在即用型離心柱產(chǎn)品形式;4. 自動化友好型,96孔板,用于高通量 N-糖去除。Genovis的ImpaRATOR 是一種 O-糖依賴性蛋白酶,可消化攜帶粘蛋白型。O-聚糖的蛋白質(zhì),包括唾液酸化物質(zhì)、糖基化絲氨酸和 Thr 殘基的 N-末端。該酶產(chǎn)生攜帶...

  • 山西PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究
    山西PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

    SialEXO 2-3 在天然條件下水解糖蛋白,在 pH 值范圍為 7.0 至 9.0 時顯示出活性。該酶來源于Akkermansia muciniphila,并在大腸桿菌中表達。該酶具有 His 標(biāo)簽,分子量為 66 kDa。1. 用于方法開發(fā)的靈活格式;2. 可以結(jié)合酶以提高用于離心柱中糖蛋白去唾液酸化的固定化酶。Genovis的SialEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的SialEXO酶,用于糖蛋白的去唾液酸化,而不會被酶污染z終制劑。它水解天然糖蛋白上的唾液酸(α2-3、α2-6 和 α2-8)并釋放出聚糖。效率;3. 適用于自動化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可。使用F...

  • 河南PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    河南PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

    Genovis 是一家瑞典生物技術(shù)公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes?工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學(xué)工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界。 我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應(yīng)用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。?ImpaRATOR 來源于銅綠假單胞菌,在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標(biāo)簽,分子量為 97 kDa。河南PNGa...

  • 固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

    Genovis的SialEXO Immobilized是一種微離心柱,用于在室溫下孵育30分鐘后完全去除0.5mg天然糖蛋白上的唾液酸。為了研究依那西普的潛在電荷變體,開發(fā)了一種使用SialEXO固定化柱對糖蛋白進行去唾液酸化的一般工作流程。毛細管電泳通常用于在生物制劑的表征和質(zhì)量控制過程中確定電荷變體。使用SialEXO Imfixedized對糖蛋白進行去唾液酸化,并使用ProteinSimple的Maurice在成像等電聚焦中進行分析。綜合起來,該分析工作流程改進了糖蛋白的分離并實現(xiàn)了電荷異構(gòu)體分析。依那西普,如果不首先去除唾液酸,將很難分析,但使用SialEXO固定化分離峰可以獲得。I...

  • 江蘇PNGaseF去糖基化酶
    江蘇PNGaseF去糖基化酶

    用于水解β1-3,4-連接半乳糖的固定化酶在離心柱中的糖蛋白上。Genovis的GalactEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的GalactEXO酶,用于糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的水解,而不會用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. z終樣品中不含酶。GalactEXO 酶來源于 Akkermansia muciniphila 并重組表達,可有效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖。GalactEXO微離心柱經(jīng)過格式化,可在30-60分鐘內(nèi)水解0.5m...

  • 廣東用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶
    廣東用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

    與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括:OmniGlyZOR 微離心柱;PNGase F 凍干;RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性,否則某些 N-糖基化位點很難或無法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在變性條件下使用試劑盒中包含的PNGase F凍干和RapiGest? SF表面活性劑通過額外的去糖基化步驟去除。使用Genovis的OpeRAT對EPO進行O-糖位點特異性消化:對于jin攜帶一個或幾個 O-糖基化位...

  • 江蘇固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    江蘇固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    GlycOCATCH?親和純化:用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽親和純化的富集樹脂。GlycOCATCH親和純化以方便的離心柱形式提供。該產(chǎn)品包含:4 個 GlycOCATCH 親和純化微離心柱,每個柱能夠結(jié)合 50 μg 粘蛋白型 O-糖蛋白(總共 200 μg)。Genovis的SialEXO 凍干 200 單位,用于去除唾液酸;OpeRATOR 凍干 200 單位,用于結(jié)合的 O-糖蛋白的可選洗脫方法。1. 靶向 O-糖蛋白富集;2. 復(fù)雜樣品的特異性凈化;3. 用于改進 MS 分析的樣品制備。O-糖基化蛋白和肽的特異性富集:O-連接聚糖參與多種生物過程,包括抑制病原體引起的gan染、炎癥反應(yīng)...

  • 江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究
    江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

    Genvis測試去除唾液酸以揭示電荷變體:唾液酸是帶負(fù)電荷的糖殘基,存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會使分析工作流程復(fù)雜化,從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 樣品中不含酶。因此,唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。該應(yīng)用展示了一種快速簡便的樣品制備方法,可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。GalNAcEXO酶是可降低樣品異質(zhì)性,用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截...

  • 黑龍江固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究
    黑龍江固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

    Genovis 集團由瑞典 Genovis AB 和美國全資子公司 Genovis Inc. 組成。該公司的在納斯達克北方增長市場上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關(guān)系。 Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis 酶產(chǎn)品,稱為 SmartEnzymes,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。 通過在2020年收購QED Bioscience,產(chǎn)品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在 網(wǎng)站 上閱讀有關(guān)QED的更多信息 Genovis 研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系,...

  • 上海瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    上海瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括:OmniGlyZOR 微離心柱;PNGase F 凍干;RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性,否則某些 N-糖基化位點很難或無法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在變性條件下使用試劑盒中包含的PNGase F凍干和RapiGest? SF表面活性劑通過額外的去糖基化步驟去除。使用Genovis的OpeRAT對EPO進行O-糖位點特異性消化:對于jin攜帶一個或幾個 O-糖基化位...

  • 北京PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    北京PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士,于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相關(guān)法規(guī)要求,如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等,致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測研發(fā)等,藥物研發(fā)領(lǐng)域如細胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務(wù),以期與客戶共同協(xié)作,加快研發(fā)及生產(chǎn)進度,為客戶提供更多價值。并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。北京PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)Genvois的SialEXO產(chǎn)品是...

  • 江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    Genovis 是一家瑞典生物技術(shù)公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes?工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學(xué)工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界。 我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應(yīng)用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。?C1抑制劑的去糖基化:使用PNGaseF、OglyZOR和SialEXO、GalNAcEXO1。江西瑞典Genovis...

  • 湖北凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    湖北凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    Genovis的PNGase F 是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復(fù)合物、雜交體或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。 在反應(yīng)過程中,從中去除聚糖的天冬酰胺殘基被脫酰胺為天冬氨酸。釋放的低聚糖完好無損,可用于進一步分析。N-糖的去除被用于MS分析的樣品制備,以降低蛋白質(zhì)的異質(zhì)性,使游離的糖分析成為可能,并研究N-糖的功能作用。 該酶在大腸桿菌中表達,該重組基因來源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。 評價抗體片段對完整蛋白聚集的影響。 IgG1 mAb1和mAb2在Biogen生產(chǎn)。 mAb1被糖基化,主要的糖型是具有0和1半乳糖的he心聚焦雙觸角聚糖(FA2和F...

  • 天津N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    天津N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    糖蛋白性能測試:O-聚糖的巖藻糖基化參與功能上重要的聚糖表位的合成,例如血型抗原和劉易斯結(jié)構(gòu)。分析用這種復(fù)雜的聚糖結(jié)構(gòu)修飾的糖蛋白可能具有挑戰(zhàn)性,需要高效和特異性的酶工具。我們在許多糖基工程TNFR蛋白上測試了Genovis的FucosEXO,這些蛋白攜帶多達11個O-聚糖,這些O-聚糖以不同的鍵裝飾。我們將該活性與其他市售巖藻苷酶進行了比較。FucosEXO 能夠在 1 小時內(nèi)對所有三種 TNFR 蛋白進行去巖藻糖磺酸處理,而用其他巖藻糖酶處理導(dǎo)致部分去除巖藻糖或根本沒有去除。GlycOCATCH?用于結(jié)合的 O-糖蛋白的可選洗脫方法:靶向 O-糖蛋白富集;天津N-聚糖水解酶PNGaseF去...

  • 山東瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    山東瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

    與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR 水解 N-和粘蛋白型 O-聚糖:糖基化往往是異質(zhì)的,這使得對高度糖基化的生物zhiliao藥物的分析具有挑戰(zhàn)性。完整質(zhì)量數(shù)的確認(rèn)以及其他產(chǎn)品質(zhì)量屬性的表征受到不同糖型復(fù)雜性的阻礙,這就是為什么有效的聚糖去除工具簡化了此類分析的原因。 雖然 N-聚糖包含一個共同的結(jié)構(gòu),并且可以通過 PNGase F 整體去除,但粘蛋白型 O-聚糖在結(jié)構(gòu)上更加多樣化,具有多個不同的he心。OmniGLYZOR含有固定化酶的混合物,能夠依次分解O-聚糖,以完全去除最常見的O-聚糖結(jié)構(gòu)(二唾液酸和單唾液酸基he心1和Tn抗原)。FucosEXO酶在大腸桿菌...

  • 天津凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    天津凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    genovis分析依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖:為了確認(rèn)依那西普和曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數(shù)據(jù),進行了釋放的N-聚糖分析。標(biāo)記的N-聚糖的分離清楚地表明了依那西普和曲妥珠單抗上半乳糖的丟失,如半乳糖基化聚糖物種的信號丟失所示。該酶是一種有價值的工具,可降低樣品異質(zhì)性,用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復(fù)雜 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-連接的 GalNAc;2. 實現(xiàn)完全糖基去除,以改善蛋白質(zhì)表征;3. 可固定在即用型離心柱中。SialEXO在天然條件下水解糖蛋白,在pH值范圍為6.5至9...

  • 云南凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    云南凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

    Genovis的SialEXO固定化用于復(fù)雜糖蛋白的去唾液酸化:在設(shè)置反應(yīng)條件時,需要在所需的反應(yīng)時間和完成反應(yīng)所需的酶量之間進行權(quán)衡。較高的酶量可保證在更短的時間內(nèi)完成周轉(zhuǎn),但會使下游分析復(fù)雜化。為了避免此類問題,我們以離心柱形式固定了活性SialEXO。這允許以更短的孵育時間孵育具有明顯更高量的唾液酸酶的糖蛋白底物。Genovis測試了 SialEXO 凍干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制劑上的性能。這種糖蛋白是一種具有挑戰(zhàn)性的底物,具有 6 個 N- 和多達 26 個 O-聚糖,由 α2,3 和 α2,6 連接的唾液酸修飾。對游離的N-聚糖的分析表明,SialEXO在溶液中完全...

  • 四川用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    四川用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    Genvis測試去除唾液酸以揭示電荷變體:唾液酸是帶負(fù)電荷的糖殘基,存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會使分析工作流程復(fù)雜化,從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 樣品中不含酶。因此,唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。該應(yīng)用展示了一種快速簡便的樣品制備方法,可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。對游離的N-聚糖的分析表明,SialEXO在溶液中完全脫唾液酸化。四川用于自動化系統(tǒng)的96孔...

  • 用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶
    用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

    為了研究 OglyZOR 對天然糖蛋白的活性,將該酶與依那西普、TNFR 和阿巴西普在 37°C 下有或沒有 SialEXO 孵育 1 小時。當(dāng)唾液酸被去除時,OglyZOR酶有效地水解了所有三種底物中的O-聚糖。Genovis的OglyZOR 酶可有效水解天然糖蛋白中的he心 1 二糖 (Gal-β1,3-GalNAc)。這使得這些酶適合在LC-MS分析之前制備樣品,以鑒定其他PTM或確認(rèn)氨基酸序列O-糖基化生物制藥的全去糖基化:O-糖基化生物制藥(如依那西普)很難表征。為了能夠通過質(zhì)譜法測定完整質(zhì)量數(shù),我們進行了酶促總?cè)ヌ腔?。N-聚糖被Genovis的PNGase F裂解,而O-聚糖可以...

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