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  • 廣東固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    廣東固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    Genovis的SialEXO產(chǎn)品是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶。這些酶對天然糖蛋白或游離的聚糖結(jié)構(gòu)上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。SialEXO用于在用OpeRATOR或OglyZOR消化之前預處理O-糖基化蛋白。其他應(yīng)用包括降低樣品復雜性、電荷異構(gòu)體分析和外切糖苷酶陣列。N-連接、O-連接和游離聚糖的高效去唾液酸化快速去除唾液酸,增強對蛋白質(zhì)電荷變體的分析可固定在即用型離心柱中。然后可以用FabRICATOR消化所得的去糖基化蛋白,并通過中級質(zhì)譜分析。我們將該工作流程應(yīng)用于依那西普的分析,雖然未經(jīng)處理的TNFR結(jié)構(gòu)域過于復雜而無法分析,但O-聚糖組成可以在用PNGase F處...

  • 江蘇用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶
    江蘇用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

    Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物,用于有效水解天然 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上的 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接巖藻糖殘基。它是 N-和 O-糖蛋白的聚糖結(jié)構(gòu)分析以及寡糖的外切糖苷酶陣列的寶貴工具。1. 高效α-巖藻糖苷酶混合物 – 快速去除 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖;2. 可靠的酶解增加了對外切糖苷酶陣列的信心;3. 可固定在即用型離心柱中。用于糖蛋白去氟糖基化的凍干酶。Genovis的FucosEXO凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在2000單位的小瓶中,用于2mg糖蛋白的去碳基化。PNGase F Automation 含有以...

  • 黑龍江固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶
    黑龍江固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶

    用于水解離心柱中糖蛋白上的N-聚糖的固定化酶。 Genovis的PNGase F 固定化微離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的 PNGase F 酶,用于在樣品中酶峰減少的糖蛋白上水解 N-糖。 將糖蛋白樣品與PNGase F一起在離心柱中固定,然后通過離心步驟輕松收集去糖基化的蛋白質(zhì)。由于空間位阻,PNGase F對某些糖蛋白的活性可能緩慢或受到抑制 - 在這些情況下可能需要更長的孵育時間或糖蛋白變性。 Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.2 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3.z終樣品中的酶峰減少。融合蛋白和其他糖基化蛋白上的...

  • 河北用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    河北用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    Genovis的GlycOCATCH?是一種親和樹脂,可特異性結(jié)合O-糖基化(粘蛋白型)蛋白和肽,從而實現(xiàn)簡單的工作流程,以富集和純化攜帶O-聚糖的蛋白質(zhì)和肽。洗滌離心柱,并用8M尿素洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì)。對洗脫材料的分析表明,由于洗脫O-糖基化蛋白,并且樹脂與非糖基化蛋白和N-糖基化蛋白的結(jié)合可以忽略不計。選擇性結(jié)合 O-糖蛋白:為了測試選擇性,將一系列 O-糖基化、N-糖基化和非糖基化蛋白與Genovis的GlycOCATCH 一起孵育。為了在肽水平上研究Genvois的GlycOCATCH的O-糖特異性,將O-glcyosyled肽(糖蛋白)與一系列未修飾的肽混合。O-糖基化蛋白和肽的特異性...

  • 陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    Fc N-聚糖在抗體的效應(yīng)功能中起著至關(guān)重要的作用,但可能會增加蛋白質(zhì)表征測定的復雜性。在天然條件下用PNGase F去除Fc N-糖可以表征游離N-糖以及去糖基化抗體的功能和結(jié)構(gòu)。 為了證明PNGase F固定化和PNGase F凍干在天然反應(yīng)條件下有效去除Fc N-聚糖,對zhiliao性抗體曲妥珠單抗進行了處理。圖2中的質(zhì)量數(shù)偏移表明,在37°C下用Genovis的PNGase F凍干或PNGase F固定化孵育1小時后,曲妥珠單抗上的Fc N-聚糖成功去除,與在溶液中用PNGase F凍干處理的樣品相比,沒有酶干擾用PNGase F固定處理的樣品的分析。融合蛋白和其他糖基化蛋白上的 N...

  • 安徽高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究
    安徽高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究

    Genovis 是一家瑞典生物技術(shù)公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes?工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學術(shù)界。 我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應(yīng)用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。?GalNAcEXO 用于有效水解與糖蛋白(Tn 抗原)中的絲氨酸或蘇氨酸殘基相連的 α-N-乙酰半乳糖胺 (GalNA...

  • 甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究
    甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究

    G0F 抗體在 30 分鐘內(nèi):半乳糖的存在會影響zhiliao性抗體引發(fā)的效應(yīng)功能,為了研究抗體的作用方式,可能需要徹底去除半乳糖殘留物。Genovis的GalactEXO Immobilized 的 β1-4 半乳糖苷酶活性在曲妥珠單抗上使用 30 分鐘孵育證明。genovis的GalactEXO Immobilized 由強大的 GalactEXO 酶組成,該酶固定在瓊脂糖珠上,并以易于使用的微離心柱形式格式化。GalactEXO是β-半乳糖苷酶的混合物,可有效去除N-和O-糖基化蛋白上的半乳糖殘基。使用FabRICATOR?將抗體消化成亞基,并使用LC-MS進行分析。使用 GalactE...

  • 福建固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究
    福建固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究

    GlycOCATCH設(shè)計用于特異性結(jié)合粘蛋白型O-糖基化蛋白和肽。親和樹脂基于無活性的Genovis的OpeRATOR酶,該酶經(jīng)過工程設(shè)計,可以高親和力結(jié)合O-糖基化蛋白和肽。 結(jié)合在pH 5-8的生理緩沖液中進行。由于GlycOCATCH樹脂和O-糖蛋白/肽之間的強相互作用,可以用8M尿素進行洗脫。或者,可以使用活性O(shè)peRATOR酶進行洗脫,該酶消化O-聚糖位點的N末端結(jié)合的O-糖蛋白。在后一種情況下,肽在天然條件下回收。OpeRATOR 凍干酶包含在購買中。由于 O-糖蛋白上的旋亞氨酸化 O-聚糖與樹脂結(jié)合效率更高,因此唾液酸酶混合物 SialEXO 凍干也包含在購買中。OmniGLY...

  • 山西PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究
    山西PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究

    G0F 抗體在 30 分鐘內(nèi):半乳糖的存在會影響zhiliao性抗體引發(fā)的效應(yīng)功能,為了研究抗體的作用方式,可能需要徹底去除半乳糖殘留物。Genovis的GalactEXO Immobilized 的 β1-4 半乳糖苷酶活性在曲妥珠單抗上使用 30 分鐘孵育證明。genovis的GalactEXO Immobilized 由強大的 GalactEXO 酶組成,該酶固定在瓊脂糖珠上,并以易于使用的微離心柱形式格式化。GalactEXO是β-半乳糖苷酶的混合物,可有效去除N-和O-糖基化蛋白上的半乳糖殘基。使用FabRICATOR?將抗體消化成亞基,并使用LC-MS進行分析。使用 GalactE...

  • 河北高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
    河北高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

    生成攜帶 O-糖的糖肽,該酶可實現(xiàn) O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點占用測定,以及使用 MS 分析的中級方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點的 N 末端;2.穩(wěn)健的消化,增強復雜生物制藥的表征;3.高特異性 - 可靠的聚糖位點測定和定位。Genovis的OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶,可消化攜帶he心1 O-聚糖的蛋白質(zhì),糖基化(he心 1)Ser 和 Thr 殘基的 N 端。OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila,并以 E 表達。大腸桿菌。該酶含有 His 標簽,分子量為 42 kDa。SialEXO 來源于 ...

  • 吉林瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    吉林瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    對Genovis的ImpaRATOR處理的樣品的分析表明,ImpaRATOR很好地消化了所有三種底物并產(chǎn)生了相似的糖肽,但預期的聚糖種類不同。用ImpaRATOR處理的樣品比其他樣品含有更多的變異,因為每種肽都檢測到多種聚糖結(jié)構(gòu)。觀察到的聚糖種類主要是單唾液酸化和二唾液酸化he心1結(jié)構(gòu),這與依那西普的預期一致。用ImpaRATOR或OpeRATOR消化的SialEXO預處理樣品均產(chǎn)生具有裸核1結(jié)構(gòu)的肽,但攜帶在ImpaRATOR消化樣品中觀察到的Tn抗原的肽T205-P207除外。依那西普用 SialEXO 和 GalactEXO 預處理,然后用 ImpaRATOR 消化,得到含有 Tn 抗原...

  • 高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    C1抑制劑的去糖基化:在O-糖基化生物制藥的生產(chǎn)過程中,由于he心GalNAc殘基的加工不完全,可能會出現(xiàn)Tn抗原。這表現(xiàn)為具有 203 Da HexNAc 單位差異的重復質(zhì)量位移。為了確認 Tn 抗原的存在,可以應(yīng)用以下工作流程,此處在重度(26 個位點)O-糖基化 C1 抑制劑上演示。首先,使用PNGaseF修剪糖蛋白的N-糖,使用Genovis的OglyZOR和SialEXO修剪he心1 O-糖。依那西普的磷性能測試?:依那西普是另一種具有挑戰(zhàn)性的生物制藥模型分子,攜帶 13 個 O-聚糖位點,其中平均 9 至 10 個位點被占用。Genovis測試了 SialEXO 凍干和 SialE...

  • 吉林凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    吉林凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    在Genovis的PNGaseF去除N-聚糖并用SialEXO和GalactEXO截斷O-聚糖后,在質(zhì)譜圖中觀察到幾個與GalNAcs相關(guān)的峰。為了去除剩余的GalNAc殘基,應(yīng)用GalNAcEXO酶。用GalNAcEXO處理后觀察到的單個蛋白峰顯示完全去除剩余的GalNAcs。?GalNAcEXO在生理緩沖液和中性pH值中具有活性,使其與大多數(shù)樣品相容。此外,GalNAcEXO的活性不依賴于任何可能影響LC-MS分析的輔因子,如BSA。根據(jù)底物的性質(zhì),糖蛋白的GalNAcEXO反應(yīng)在2小時內(nèi)完成,而更復雜的樣品可能需要孵育過夜。Genovis的GalNAcEXO也可固定在離心柱中,以便快速方...

  • 海南用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
    海南用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

    genovis的FucosEXO在生理緩沖液和中性pH值中具有活性,使其與大多數(shù)樣品相容。此外,F(xiàn)ucosEXO活性不依賴于任何可能影響LC-MS分析的輔因子,如BSA。根據(jù)底物的性質(zhì),F(xiàn)ucosEXO 可在 1 至 2 小時內(nèi)水解糖蛋白上的末端 α1-2,3,4 連接的巖藻糖殘基,而對于非常復雜的樣品可能需要更長的孵育時間。FucoseEXO也可固定在離心柱中,可快速方便地處理高達0.5mg的糖蛋白。使用離心柱形式,將糖蛋白樣品與固定化的FucosEXO樹脂一起孵育,然后在離心步驟中輕松收集消化的糖蛋白。FucosEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的FucosEXO酶;海南用于自動化系...

  • 青海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶
    青海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶

    GalNAcEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的GalNAcEXO酶,用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基,而不會用酶污染制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 終樣品中不含酶。用于水解離心柱中糖蛋白上的Genovis的GalNAc殘基的固定化酶。GalNAcEXO 酶是一種n 外α-N-乙酰半乳糖氨酸酶,可快速有效地水解來自天然 O-糖蛋白的 z es GalNAc 殘基。 該酶來源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達,帶有His標簽,分子量為5...

  • 遼寧高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
    遼寧高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

    Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶(O-糖苷酶),可特異性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖。OglyZOR 用于去除 O-糖,用于糖分析、確認 O-糖的存在和降低樣品的異質(zhì)性。Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶(內(nèi)切-α-N-乙酰半乳糖氨酸酶),可催化來自天然糖蛋白的he心 1 和有限程度的he心 3 O-聚糖的水解。 OglyZOR酶活性需要去除唾液酸,因此,由唾液酸酶混合物組成的唾液酸凍干,用于去除α2-3,α2-6和α2-8連接的唾液酸,與OglyZOR一起提供。在pH 6.5至7.5和37°C下獲得良好活性。FucosEXO從一組dai表不同鍵的不同...

  • 湖南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    湖南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    生成攜帶 O-糖的糖肽,該酶可實現(xiàn) O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點占用測定,以及使用 MS 分析的中級方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點的 N 末端;2.穩(wěn)健的消化,增強復雜生物制藥的表征;3.高特異性 - 可靠的聚糖位點測定和定位。Genovis的OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶,可消化攜帶he心1 O-聚糖的蛋白質(zhì),糖基化(he心 1)Ser 和 Thr 殘基的 N 端。OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila,并以 E 表達。大腸桿菌。該酶含有 His 標簽,分子量為 42 kDa。SialEXO 來源于 ...

  • 湖北N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶
    湖北N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶

    為了證明Genovis的PNGase F凍干和PNGase F固定在各種底物上的去糖基化能力,用PNGase F凍干或PNGase F固定化處理了一系列糖蛋白。使用天然反應(yīng)條件在一小時內(nèi)有效去除曲妥珠單抗和依那西普上的所有N-糖,以及西妥昔單抗上的Fc-糖。當加入RapiGest?并在變性條件下進行反應(yīng)時,西妥昔單抗的所有N-聚糖(包括Fab-聚糖)在PNGase F固定化10分鐘內(nèi)完全去除,PNGase F固定化15分鐘內(nèi)完全去除。在變性反應(yīng)條件下,PNGase F 在 30 分鐘內(nèi)成功將更復雜的 F 融合蛋白阿巴西普和阿柏西普去糖基化。使用變性和還原反應(yīng)條件,將常用的糖蛋白標準品RNase...

  • 河南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
    河南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

    Genvis測試去除唾液酸以揭示電荷變體:唾液酸是帶負電荷的糖殘基,存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會使分析工作流程復雜化,從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 樣品中不含酶。因此,唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。該應(yīng)用展示了一種快速簡便的樣品制備方法,可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。瑞典生物技術(shù)公司Genovis率先次提供IdeS工具酶等,用于mAb、ADC藥物的開發(fā)、生產(chǎn)...

  • 安徽固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    安徽固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    genvois的OpeRATOR 是一種內(nèi)切蛋白酶,可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基化蛋白的肽鍵的水解。內(nèi)切蛋白酶具有高特異性,可消化絲氨酸或蘇氨酸殘基的O-聚糖N端的蛋白質(zhì)。 OpeRATOR 活性需要粘蛋白型的 O-聚糖,并且該酶不會用 N-連接聚糖消化糖蛋白。該酶對具有亞洲化he心1 O-聚糖的位點z活躍。它還消化唾液酸化的he心 1 和he心 3,但程度要低得多。為了獲得z佳性能,需要去除唾液酸,因此,SialEXO凍干(唾液酸酶混合物)包含在購買中。 PNGase F酶在大腸桿菌中表達,該重組基因來源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。安徽固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶...

  • 山東高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    山東高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    我們展示了使用兩種蛋白作為底物的OmniGLYZOR的性能。依那西普是一種 Fc 融合蛋白,含有 TNFα 受體的胞外結(jié)構(gòu)域。該結(jié)構(gòu)域用 2 個 N-糖和 8-11 個 1 個具有不同程度唾液酸化的 O-聚糖修飾。在 37°C 下將這種重糖基化蛋白在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時,可完全去除所有 N-和 O-糖,如中級 LC-MS 分析所示。促紅xibao生成素 (EPO) 是一種攜帶 3 個 N-聚糖和 1 個he心 1 個 O-聚糖的小蛋白質(zhì),其總質(zhì)量的近 40% 由聚糖組成。O-連接聚糖通常存在于蛋白質(zhì)的暴露位置,因為它們在蛋白質(zhì)折疊發(fā)生后附著。只有負責其...

  • 山東PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
    山東PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

    Genovis的PNGase F 是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復合物、雜交體或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。 在反應(yīng)過程中,從中去除聚糖的天冬酰胺殘基被脫酰胺為天冬氨酸。釋放的低聚糖完好無損,可用于進一步分析。N-糖的去除被用于MS分析的樣品制備,以降低蛋白質(zhì)的異質(zhì)性,使游離的糖分析成為可能,并研究N-糖的功能作用。 該酶在大腸桿菌中表達,該重組基因來源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。 評價抗體片段對完整蛋白聚集的影響。 IgG1 mAb1和mAb2在Biogen生產(chǎn)。 mAb1被糖基化,主要的糖型是具有0和1半乳糖的he心聚焦雙觸角聚糖(FA2和F...

  • PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究
    PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究

    當在完整狀態(tài)下進行分析時,EPO的聚糖異質(zhì)性導致了非常復雜的質(zhì)譜圖。通過在 37°C 下在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時,可以有效地去除 N 糖(含有PNGase F酶)和 O-糖,如對應(yīng)于未修飾蛋白質(zhì)的單個峰所示。EPO上殘留了少量用乙?;僖核嵝揎椀腛-聚糖,因為OmniGLYZOR對這種結(jié)構(gòu)的水解效率低下。根據(jù)制造商Genvois的建議(在37°C下進行O/N孵育),兩種底物蛋白也用另一種市售的去糖基化產(chǎn)物處理,并顯示數(shù)據(jù)以供比較。另一方面,N-聚糖在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中翻譯地連接到未折疊的蛋白質(zhì)上。這導致某些 N-糖基化位點難以被 Genovis的PNGase F ...

  • 江蘇高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
    江蘇高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

    用于離心柱中糖蛋白去膠基化的固定化酶。Genovis的FucosEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的FucosEXO酶,用于糖蛋白的去氟糖基化,而不會用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去膠基化。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. z終樣品中不含酶。有效去除α1-2,3,4連接巖藻糖:分析用復雜聚糖結(jié)構(gòu)修飾的糖蛋白可能具有挑戰(zhàn)性,需要高效和特異性的酶學工具。Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物,用于有效水解 N-和 O-糖蛋白或寡糖上的 α1-2、α1-3 和 α1-4 連接...

  • 海南凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶
    海南凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶

    糖蛋白性能測試:O-聚糖的巖藻糖基化參與功能上重要的聚糖表位的合成,例如血型抗原和劉易斯結(jié)構(gòu)。分析用這種復雜的聚糖結(jié)構(gòu)修飾的糖蛋白可能具有挑戰(zhàn)性,需要高效和特異性的酶工具。我們在許多糖基工程TNFR蛋白上測試了Genovis的FucosEXO,這些蛋白攜帶多達11個O-聚糖,這些O-聚糖以不同的鍵裝飾。我們將該活性與其他市售巖藻苷酶進行了比較。FucosEXO 能夠在 1 小時內(nèi)對所有三種 TNFR 蛋白進行去巖藻糖磺酸處理,而用其他巖藻糖酶處理導致部分去除巖藻糖或根本沒有去除。FucosEXO從一組dai表不同鍵的不同寡糖底物中釋放的巖藻糖。FucosEXO對α1-6連接的巖藻糖殘基沒有活性...

  • 廣東PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究
    廣東PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究

    對Genovis的ImpaRATOR處理的樣品的分析表明,ImpaRATOR很好地消化了所有三種底物并產(chǎn)生了相似的糖肽,但預期的聚糖種類不同。用ImpaRATOR處理的樣品比其他樣品含有更多的變異,因為每種肽都檢測到多種聚糖結(jié)構(gòu)。觀察到的聚糖種類主要是單唾液酸化和二唾液酸化he心1結(jié)構(gòu),這與依那西普的預期一致。用ImpaRATOR或OpeRATOR消化的SialEXO預處理樣品均產(chǎn)生具有裸核1結(jié)構(gòu)的肽,但攜帶在ImpaRATOR消化樣品中觀察到的Tn抗原的肽T205-P207除外。依那西普用 SialEXO 和 GalactEXO 預處理,然后用 ImpaRATOR 消化,得到含有 Tn 抗原...

  • 江蘇PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究
    江蘇PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

    Genvois的SialEXO產(chǎn)品是唾液酸酶,用于N-和O-糖基化蛋白的有效去唾液酸化。SialEXO凍干由兩種唾液酸酶組成,每種唾液酸酶都具有獨特的活性,并且它們同時起作用。一種酶對α2-3、α2-6和α2-8連接的唾液酸具有很好的活性,另一種酶(SialEXO 2-3)通過α2-3-鍵快速水解唾液酸。SialEXO凍干可在2小時內(nèi)去除天然蛋白質(zhì)上的所有唾液酸。SialEXO在天然條件下水解糖蛋白,在pH值范圍為6.5至9時顯示出活性。這些酶來源于Akkermansia muciniphila,并在大腸桿菌中表達。兩種酶都含有 His 標簽,酶的分子量為 43 kDa 和 66 kDa。 由...

  • 陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
    陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

    GalNAcEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的GalNAcEXO酶,用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基,而不會用酶污染制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 終樣品中不含酶。用于水解離心柱中糖蛋白上的Genovis的GalNAc殘基的固定化酶。GalNAcEXO 酶是一種n 外α-N-乙酰半乳糖氨酸酶,可快速有效地水解來自天然 O-糖蛋白的 z es GalNAc 殘基。 該酶來源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達,帶有His標簽,分子量為5...

  • 云南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究
    云南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究

    水解O-聚糖的酶不會從變性中獲益,這就是為什么OmniGLYZOR色譜柱只能在天然條件下使用的原因。 OmniGLYZOR 試劑盒 Microspin 以含有足夠材料的試劑盒形式提供,可使5 × 50-100 μg 或 10 × 50-100 μg 糖蛋白去糖酸化。N-和O-連接聚糖的快速高效;與LC-MS兼容;完全去除聚糖,改進基礎(chǔ)蛋白的分析;固定形式可提高酶與底物的比率,從而實現(xiàn)快速去糖基化。 IgdE酶(FabALACTICA?)和PNGaseF酶分別購自Genovis(馬薩諸塞州,美國)。用于水解糖蛋白上N-聚糖的凍干酶。Genovis的PNGase F 凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在...

  • 四川N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究
    四川N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究

    為了證明Genovis的PNGase F凍干和PNGase F固定在各種底物上的去糖基化能力,用PNGase F凍干或PNGase F固定化處理了一系列糖蛋白。使用天然反應(yīng)條件在一小時內(nèi)有效去除曲妥珠單抗和依那西普上的所有N-糖,以及西妥昔單抗上的Fc-糖。當加入RapiGest?并在變性條件下進行反應(yīng)時,西妥昔單抗的所有N-聚糖(包括Fab-聚糖)在PNGase F固定化10分鐘內(nèi)完全去除,PNGase F固定化15分鐘內(nèi)完全去除。在變性反應(yīng)條件下,PNGase F 在 30 分鐘內(nèi)成功將更復雜的 F 融合蛋白阿巴西普和阿柏西普去糖基化。使用變性和還原反應(yīng)條件,將常用的糖蛋白標準品RNase...

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