江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

Genovis 是一家瑞典生物技術(shù)公司，自2010年起，為生物制藥公司提供SmartEnzymes?工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學(xué)工具，主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界。 我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?，用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應(yīng)用信息，如果您有興趣，可以和我們一起做一個“SmartStories”，也可以聯(lián)系我們。?C1抑制劑的去糖基化：使用PNGaseF、OglyZOR和SialEXO、GalNAcEXO1。江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

使用Genovis的GalNAcEXO 對 O-糖基化生物制藥進行 Tn 抗原表征：未成熟的截短O-聚糖導(dǎo)致了復(fù)雜生物制藥的異質(zhì)性，使其分析更具挑戰(zhàn)性。 O-聚糖的he心由n-α-GalNAc殘基組成，通過糖苷鍵與絲氨酸或蘇氨酸連接，稱為Tn抗原。 現(xiàn)在，使用GalNAcEXO可以采用合適的酶策略來去除這些GalNAc并簡化生物制藥的表征。在質(zhì)譜圖中可以觀察到重復(fù)峰的模式。其次，在與GalNAcEXO酶孵育后，剩余的GalNAc殘基被完全去除，留下一個峰。因此，該工作流程確認了 O-糖基化生物制藥上存在 Tn 抗原，并允許定量he心 GalNAc 水平。這種工作流程的另一個好處是減少了剩余的異質(zhì)性，這有助于確認蛋白質(zhì)的完整質(zhì)量，并揭示截短的片段。江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究FucoseEXO固定在離心柱中，可快速方便地處理高達0.5mg的糖蛋白，然后在離心步驟中輕松收集消化的糖蛋白。

用于離心柱中糖蛋白去膠基化的固定化酶。Genovis的FucosEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的FucosEXO酶，用于糖蛋白的去氟糖基化，而不會用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去膠基化。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. z終樣品中不含酶。有效去除α1-2,3,4連接巖藻糖：分析用復(fù)雜聚糖結(jié)構(gòu)修飾的糖蛋白可能具有挑戰(zhàn)性，需要高效和特異性的酶學(xué)工具。Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物，用于有效水解 N-和 O-糖蛋白或寡糖上的 α1-2、α1-3 和 α1-4 連接的巖藻糖殘基，無需輔助因子或添加

genovis分析依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖：為了確認依那西普和曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數(shù)據(jù)，進行了釋放的N-聚糖分析。標記的N-聚糖的分離清楚地表明了依那西普和曲妥珠單抗上半乳糖的丟失，如半乳糖基化聚糖物種的信號丟失所示。該酶是一種有價值的工具，可降低樣品異質(zhì)性，用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復(fù)雜 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-連接的 GalNAc；2. 實現(xiàn)完全糖基去除，以改善蛋白質(zhì)表征；3. 可固定在即用型離心柱中。GalactEXO微離心柱經(jīng)過格式化，可在30-60分鐘內(nèi)水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。

Genovis的SialEXO Immobilized是一種微離心柱，用于在室溫下孵育30分鐘后完全去除0.5mg天然糖蛋白上的唾液酸。為了研究依那西普的潛在電荷變體，開發(fā)了一種使用SialEXO固定化柱對糖蛋白進行去唾液酸化的一般工作流程。毛細管電泳通常用于在生物制劑的表征和質(zhì)量控制過程中確定電荷變體。使用SialEXO Imfixedized對糖蛋白進行去唾液酸化，并使用ProteinSimple的Maurice在成像等電聚焦中進行分析。綜合起來，該分析工作流程改進了糖蛋白的分離并實現(xiàn)了電荷異構(gòu)體分析。依那西普，如果不首先去除唾液酸，將很難分析，但使用SialEXO固定化分離峰可以獲得。生物制劑的表征和質(zhì)量控制過程中確定電荷變體；福建高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

使用OpeRATOR圖譜O-聚糖位點對依那西普進行LC-MS分析。江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

GlycOCATCH設(shè)計用于特異性結(jié)合粘蛋白型O-糖基化蛋白和肽。親和樹脂基于無活性的Genovis的OpeRATOR酶，該酶經(jīng)過工程設(shè)計，可以高親和力結(jié)合O-糖基化蛋白和肽。 結(jié)合在pH 5-8的生理緩沖液中進行。由于GlycOCATCH樹脂和O-糖蛋白/肽之間的強相互作用，可以用8M尿素進行洗脫?；蛘?，可以使用活性O(shè)peRATOR酶進行洗脫，該酶消化O-聚糖位點的N末端結(jié)合的O-糖蛋白。在后一種情況下，肽在天然條件下回收。OpeRATOR 凍干酶包含在購買中。由于 O-糖蛋白上的旋亞氨酸化 O-聚糖與樹脂結(jié)合效率更高，因此唾液酸酶混合物 SialEXO 凍干也包含在購買中。江西瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病機理研究