山東瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究

來源: 發(fā)布時間:2024-07-17

與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR 水解 N-和粘蛋白型 O-聚糖:糖基化往往是異質(zhì)的,這使得對高度糖基化的生物zhiliao藥物的分析具有挑戰(zhàn)性。完整質(zhì)量數(shù)的確認以及其他產(chǎn)品質(zhì)量屬性的表征受到不同糖型復雜性的阻礙,這就是為什么有效的聚糖去除工具簡化了此類分析的原因。 雖然 N-聚糖包含一個共同的結(jié)構(gòu),并且可以通過 PNGase F 整體去除,但粘蛋白型 O-聚糖在結(jié)構(gòu)上更加多樣化,具有多個不同的he心。OmniGLYZOR含有固定化酶的混合物,能夠依次分解O-聚糖,以完全去除最常見的O-聚糖結(jié)構(gòu)(二唾液酸和單唾液酸基he心1和Tn抗原)。FucosEXO酶在大腸桿菌中表達,帶有His標簽,分子量為87 kDa和64 kDa,在6至8的pH值范圍內(nèi)顯示出高活性。山東瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究

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FucosEXO中的酶在大腸桿菌中表達,帶有His標簽,分子量為87 kDa和64 kDa。FucosEXO在天然條件下水解糖蛋白上的巖藻糖,在6至8的pH值范圍內(nèi)顯示出高活性,無需輔助因子或添加劑。1. 用于方法開發(fā)的靈活格式;2. 可以結(jié)合酶以提高效率;3. 適用于自動化工作流程;4.即用型 - 只需加水即可。Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物,用于在 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上有效水解 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖。人血清中 O-糖蛋白的富集:GlycOCATCH還可用于從復雜的樣品混合物(如人血清)中選擇性富集O-糖基化蛋白。簡而言之,用Genovis的SialEXO處理血清并應用于GlycOCATCH樹脂。洗滌樹脂,用8M尿素洗脫O-糖基化蛋白。用胰蛋白酶消化樣品并使用 RP-LC-MS/MS 進行分析,并使用 Swiss Prot 數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質(zhì)列表。O-糖基化蛋白以黃色表示。陜西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究GalNAcEXO 用于有效水解與糖蛋白(Tn 抗原)中的絲氨酸或蘇氨酸殘基相連的 α-N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc)。

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為了證明Genovis的PNGase F凍干和PNGase F固定在各種底物上的去糖基化能力,用PNGase F凍干或PNGase F固定化處理了一系列糖蛋白。使用天然反應條件在一小時內(nèi)有效去除曲妥珠單抗和依那西普上的所有N-糖,以及西妥昔單抗上的Fc-糖。當加入RapiGest?并在變性條件下進行反應時,西妥昔單抗的所有N-聚糖(包括Fab-聚糖)在PNGase F固定化10分鐘內(nèi)完全去除,PNGase F固定化15分鐘內(nèi)完全去除。在變性反應條件下,PNGase F 在 30 分鐘內(nèi)成功將更復雜的 F 融合蛋白阿巴西普和阿柏西普去糖基化。使用變性和還原反應條件,將常用的糖蛋白標準品RNase B在10或15分鐘內(nèi)完全去糖基化,分別使用PNGase F凍干或PNGase F固定化。在天然和變性條件下生成的去糖基化樣品與LC-MS分析兼容。

GalNAcEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的GalNAcEXO酶,用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基,而不會用酶污染制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 終樣品中不含酶。用于水解離心柱中糖蛋白上的Genovis的GalNAc殘基的固定化酶。GalNAcEXO 酶是一種n 外α-N-乙酰半乳糖氨酸酶,可快速有效地水解來自天然 O-糖蛋白的 z es GalNAc 殘基。 該酶來源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達,帶有His標簽,分子量為52 kDa。 該酶在 Tn 抗原和 α1-3 連接末端 GalNAcs 上均顯示活性。在這里,我們展示了如何使用GalNAcEXO來表征復雜的生物制藥。FucosEXO凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在2000單位的小瓶中,用于2mg糖蛋白的去碳基化。

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上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士,于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相關(guān)法規(guī)要求,如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認證等,致力于為診斷領域如分子診斷及病原微生物檢測研發(fā)等,藥物研發(fā)領域如細胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務,以期與客戶共同協(xié)作,加快研發(fā)及生產(chǎn)進度,為客戶提供更多價值。使用OpeRATOR進行O-糖位點定位:OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶。黑龍江PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究

使用OpeRATOR對胞生成素(EPO)進行O-糖位點特異性消化:確定中級水平的 O-糖基化位點。山東瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究

Genovis 集團由瑞典 Genovis AB 和美國全資子公司 Genovis Inc. 組成。該公司的在納斯達克北方增長市場上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關(guān)系。 Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis 酶產(chǎn)品,稱為 SmartEnzymes,被世界各地的科學家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。 通過在2020年收購QED Bioscience,產(chǎn)品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在 網(wǎng)站 上閱讀有關(guān)QED的更多信息 Genovis 研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系,使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學術(shù)團體的合作同樣有價值。山東瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學研究