河北高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

生成攜帶 O-糖的糖肽，該酶可實(shí)現(xiàn) O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點(diǎn)占用測定，以及使用 MS 分析的中級方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的 N 末端；2.穩(wěn)健的消化，增強(qiáng)復(fù)雜生物制藥的表征；3.高特異性 - 可靠的聚糖位點(diǎn)測定和定位。Genovis的OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶，可消化攜帶he心1 O-聚糖的蛋白質(zhì)，糖基化（he心 1）Ser 和 Thr 殘基的 N 端。OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila，并以 E 表達(dá)。大腸桿菌。該酶含有 His 標(biāo)簽，分子量為 42 kDa。SialEXO 來源于 Akkermansia muciniphila，并以 E 表達(dá)。大腸桿菌。SialEXO Lyophilized 中的酶也含有 His 標(biāo)簽，這些組分的分子量分別為 43 kDa 和 66 kDa。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽的凍干酶。Genovis的OpeRATOR 凍干劑以凍干粉末的形式提供，裝在 2000 個單位的小瓶中，用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。PNGase F是一種非常成熟的工具。O-糖的去除可能更具挑戰(zhàn)性，現(xiàn)有的O-糖釋放化學(xué)方法不太適合下游分析。河北高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

Genovis的SialEXO固定化用于復(fù)雜糖蛋白的去唾液酸化：在設(shè)置反應(yīng)條件時，需要在所需的反應(yīng)時間和完成反應(yīng)所需的酶量之間進(jìn)行權(quán)衡。較高的酶量可保證在更短的時間內(nèi)完成周轉(zhuǎn)，但會使下游分析復(fù)雜化。為了避免此類問題，我們以離心柱形式固定了活性SialEXO。這允許以更短的孵育時間孵育具有明顯更高量的唾液酸酶的糖蛋白底物。Genovis測試了 SialEXO 凍干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制劑上的性能。這種糖蛋白是一種具有挑戰(zhàn)性的底物，具有 6 個 N- 和多達(dá) 26 個 O-聚糖，由 α2,3 和 α2,6 連接的唾液酸修飾。對游離的N-聚糖的分析表明，SialEXO在溶液中完全脫唾液酸化，SialEXO固定化。江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究IgA 特異性O(shè)-糖肽富集：胰蛋白酶消化IgA。

Genovis的SialEXO Immobilized是一種微離心柱，用于在室溫下孵育30分鐘后完全去除0.5mg天然糖蛋白上的唾液酸。為了研究依那西普的潛在電荷變體，開發(fā)了一種使用SialEXO固定化柱對糖蛋白進(jìn)行去唾液酸化的一般工作流程。毛細(xì)管電泳通常用于在生物制劑的表征和質(zhì)量控制過程中確定電荷變體。使用SialEXO Imfixedized對糖蛋白進(jìn)行去唾液酸化，并使用ProteinSimple的Maurice在成像等電聚焦中進(jìn)行分析。綜合起來，該分析工作流程改進(jìn)了糖蛋白的分離并實(shí)現(xiàn)了電荷異構(gòu)體分析。依那西普，如果不首先去除唾液酸，將很難分析，但使用SialEXO固定化分離峰可以獲得。

Genovis 集團(tuán)由瑞典 Genovis AB 和美國全資子公司 Genovis Inc. 組成。該公司的在納斯達(dá)克北方增長市場上市。如需了解更多信息，請訪問投資者關(guān)系。 Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具，以促進(jìn)和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis 酶產(chǎn)品，稱為 SmartEnzymes，被世界各地的科學(xué)家使用，創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。 通過在2020年收購QED Bioscience，產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在 網(wǎng)站 上閱讀有關(guān)QED的更多信息 Genovis 研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系，使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點(diǎn)抗體的學(xué)術(shù)團(tuán)體的合作同樣有價值。瑞典生物技術(shù)公司Genovis率先次提供IdeS工具酶等，用于mAb、ADC藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。

對Genovis的ImpaRATOR處理的樣品的分析表明，ImpaRATOR很好地消化了所有三種底物并產(chǎn)生了相似的糖肽，但預(yù)期的聚糖種類不同。用ImpaRATOR處理的樣品比其他樣品含有更多的變異，因?yàn)槊糠N肽都檢測到多種聚糖結(jié)構(gòu)。觀察到的聚糖種類主要是單唾液酸化和二唾液酸化he心1結(jié)構(gòu)，這與依那西普的預(yù)期一致。用ImpaRATOR或OpeRATOR消化的SialEXO預(yù)處理樣品均產(chǎn)生具有裸核1結(jié)構(gòu)的肽，但攜帶在ImpaRATOR消化樣品中觀察到的Tn抗原的肽T205-P207除外。依那西普用 SialEXO 和 GalactEXO 預(yù)處理，然后用 ImpaRATOR 消化，得到含有 Tn 抗原的肽?？傊?，這些數(shù)據(jù)證明了ImpaRATOR的高聚糖底物接受度。ImpaRATOR處理的依那西普顯示出與相應(yīng)的去唾液酸化OpeRATOR處理樣品略有不同的消化模式。例如，OpeRATOR在兩個O-糖基化氨基酸之間消化的效率比ImpaRATOR更有效。具有完整唾液酸或Tn抗原的依那西普被OpeRATOR消化得非常弱（數(shù)據(jù)未顯示）。使用OpeRATOR對胞生成素（EPO）進(jìn)行O-糖位點(diǎn)特異性消化：確定中級水平的 O-糖基化位點(diǎn)。北京固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila，并以 E 表達(dá)。大腸桿菌。該酶含有 His 標(biāo)簽，分子量為 42 kDa。河北高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

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