陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

GalNAcEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GalNAcEXO酶，用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基，而不會(huì)用酶污染制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. 終樣品中不含酶。用于水解離心柱中糖蛋白上的Genovis的GalNAc殘基的固定化酶。GalNAcEXO 酶是一種n 外α-N-乙酰半乳糖氨酸酶，可快速有效地水解來(lái)自天然 O-糖蛋白的 z es GalNAc 殘基。 該酶來(lái)源于Akkermansia muciniphila，在大腸桿菌中表達(dá)，帶有His標(biāo)簽，分子量為52 kDa。 該酶在 Tn 抗原和 α1-3 連接末端 GalNAcs 上均顯示活性。在這里，我們展示了如何使用GalNAcEXO來(lái)表征復(fù)雜的生物制藥。復(fù)雜樣品的特異性凈化；改進(jìn) MS 分析的樣品制備。陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

上海倍篤生物科技有限公司（簡(jiǎn)稱(chēng)“倍篤生物”），由中國(guó)科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士，于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個(gè)品牌的儀器、試劑及耗材（如Genovis的IdeS酶），遵守相關(guān)法規(guī)要求，如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等，致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測(cè)研發(fā)等，藥物研發(fā)領(lǐng)域如細(xì)胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細(xì)胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專(zhuān)業(yè)服務(wù)，以期與客戶共同協(xié)作，加快研發(fā)及生產(chǎn)進(jìn)度，為客戶提供更多價(jià)值。云南凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究O-連接聚糖通常存在于蛋白質(zhì)的暴露位置，因?yàn)樗鼈冊(cè)诘鞍踪|(zhì)折疊發(fā)生后附著。

由于蛋白質(zhì)的O-糖模式的異質(zhì)性和O-糖結(jié)構(gòu)的OpeRATOR特異性，形成了重疊的肽，從而可以獲得O-糖位點(diǎn)的完整圖譜為了進(jìn)行比較，相同材料的標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶消化物， 顯示難以分析的少量且非常大的糖肽。使用Genovis的OpeRATOR進(jìn)行O-糖位點(diǎn)定位：OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶，可消化絲氨酸和蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的粘蛋白型 O-糖蛋白 N 端。這會(huì)產(chǎn)生攜帶O-糖的糖肽，并能夠使用質(zhì)譜法進(jìn)行O-糖分析、O-糖肽圖譜以及中級(jí)分析。下面是OpeRATOR消解位點(diǎn)的示意圖。

與PNGase F類(lèi)似，Genvois的OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物，可快速有效地去除抗體、融合蛋白和其他糖基化蛋白上的 N 和簡(jiǎn)單的粘蛋白型 O-聚糖。聚糖的去除被用于減少異質(zhì)性，以促進(jìn)蛋白質(zhì)的分析，例如質(zhì)譜法。去糖基化也可用于研究聚糖的功能作用。N-和粘蛋白型O-連接聚糖的快速高效去糖基化；即用型離心柱形式 - 無(wú)酶干擾分析；與LC-MS兼容。與PNGase F類(lèi)似，Genvois的與PNGase F類(lèi)似，Genvois的OmniGLYZOR 含有去除 N-糖和最常見(jiàn)的粘蛋白型 O-糖所需的酶，即單唾液酸和二唾液酸he心 1 和 Tn 抗原 （α-GalNAc）。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下組分：PNGase?F；O-糖苷酶。O-糖基化生物制藥（如依那西普）表征：PNGase F、OglyZOR。

SialEXO 2-3 在天然條件下水解糖蛋白，在 pH 值范圍為 7.0 至 9.0 時(shí)顯示出活性。該酶來(lái)源于Akkermansia muciniphila，并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶具有 His 標(biāo)簽，分子量為 66 kDa。1. 用于方法開(kāi)發(fā)的靈活格式；2. 可以結(jié)合酶以提高用于離心柱中糖蛋白去唾液酸化的固定化酶。Genovis的SialEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的SialEXO酶，用于糖蛋白的去唾液酸化，而不會(huì)被酶污染z終制劑。它水解天然糖蛋白上的唾液酸（α2-3、α2-6 和 α2-8）并釋放出聚糖。效率；3. 適用于自動(dòng)化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶，可特異性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖；云南凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

GlycOCATCH的應(yīng)用包括O糖蛋白和肽的特異性富集或去除、糖組學(xué)、復(fù)雜樣品的研究和生物制藥的表征。陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

當(dāng)在完整狀態(tài)下進(jìn)行分析時(shí)，EPO的聚糖異質(zhì)性導(dǎo)致了非常復(fù)雜的質(zhì)譜圖。通過(guò)在 37°C 下在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時(shí)，可以有效地去除 N 糖（含有PNGase F酶）和 O-糖，如對(duì)應(yīng)于未修飾蛋白質(zhì)的單個(gè)峰所示。EPO上殘留了少量用乙酰化唾液酸修飾的O-聚糖，因?yàn)镺mniGLYZOR對(duì)這種結(jié)構(gòu)的水解效率低下。根據(jù)制造商Genvois的建議（在37°C下進(jìn)行O/N孵育），兩種底物蛋白也用另一種市售的去糖基化產(chǎn)物處理，并顯示數(shù)據(jù)以供比較。另一方面，N-聚糖在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中翻譯地連接到未折疊的蛋白質(zhì)上。這導(dǎo)致某些 N-糖基化位點(diǎn)難以被 Genovis的PNGase F 接近，或者一旦底物蛋白折疊成其天然狀態(tài)，就根本無(wú)法接近。因此，這種N-聚糖的水解需要底物蛋白以與酶活性相容的方式變性。陜西固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis