黑龍江FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-16

Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動(dòng)消化IgG。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級(jí)表征工作流程中并行快速自動(dòng)酶解多種抗體。它們專為自動(dòng)化平臺(tái)而設(shè)計(jì),但在無(wú)法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化的情況下,在振動(dòng)臺(tái)上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后,樣品可直接轉(zhuǎn)移到LC-MS的自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)行快速色譜分析,或轉(zhuǎn)移到其他分析方法進(jìn)行分析。自動(dòng)平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開(kāi)發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關(guān)的大量樣品。自動(dòng)抗體亞基分析可減少操作人員的時(shí)間和樣品處理錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn),并提高通量。孵育時(shí)間為過(guò)夜(16-18小時(shí)),并且由于酶的特異性,沒(méi)有過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。黑龍江FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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與IdeS不同,為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產(chǎn)物,用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白質(zhì)消化該蛋白質(zhì),該蛋白由與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GlySERIAS酶組成。通過(guò)將酶偶聯(lián)到樹(shù)脂上,可以增加酶與蛋白質(zhì)的比率,從而可以進(jìn)一步加速反應(yīng),以獲得更完整的連接子消化。此外,該酶不會(huì)存在于樣品制備中,可能會(huì)干擾樣品分析。為了進(jìn)行比較,度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化過(guò)夜,或用GlySERIAS凍干1小時(shí)并在37°C下過(guò)夜消化。 為了降低樣品復(fù)雜性,使用內(nèi)切糖苷酶GlycINATOR凍干去除Fc聚糖,并減少鏈間二硫鍵。通過(guò)反相LC-MS對(duì)樣品的分析表明,GlySERIAS Immobilized幾乎完全消化了Fc結(jié)構(gòu)域中的連接子,留下了接近均質(zhì)的Fc/2產(chǎn)物,其中含有來(lái)自連接子的一個(gè)絲氨酸殘基。用 GlySERIAS 凍干 1 小時(shí)或過(guò)夜消化,兩者都會(huì)產(chǎn)生幾種 Fc 產(chǎn)物,并附著不同數(shù)量的絲氨酸和甘氨酸殘基。GLP-1肽在所有三個(gè)樣品中以兩種變體存在。使用GlySERIAS固定化消化的均質(zhì)Fc/2能夠詳細(xì)研究特定于Fc區(qū)域的質(zhì)量屬性。此外,在樣品中未觀察到干擾分析的酶峰。作為補(bǔ)充,F(xiàn)c/2 產(chǎn)物在用 GlySERIAS 凍干消化后殘留部分連接子,有助于研究位于 GS 連接子的修飾。安徽GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)并通過(guò)反相LC-MS進(jìn)行分析,消化產(chǎn)生均勻的Fab和Fc片段。

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Genovis提供凍干和固定化的FabRICATOR(IdeS),為客戶提供了許多選擇,以滿足他們的需求。 凍干形式用于高度靈活的方法開(kāi)發(fā)的目的,并隨時(shí)準(zhǔn)備使用,只需重組和添加到IgG樣本。 凍干酶的靈活性也意味著它可以應(yīng)用于更高的通量和自動(dòng)化的工作流程。 Genovis還提供了在瓊脂糖樹(shù)脂上固定化的酶,在隨時(shí)可用的旋轉(zhuǎn)柱中,這可以極大限度地減少在樣品中殘留的酶,這可能是有利的。 對(duì)于更多的制備應(yīng)用,我們提供FabRICATOR Fab2試劑盒,這是IgG片段生成和純化的強(qiáng)大工具。 這包括FabRICATOR固定化柱和CaptureSelect Fc純化柱,用于亞基的親和純化。 由于FabRICATOR在非還原條件下是活性的,F(xiàn)(ab’)2片段保留其鏈間和鏈內(nèi)二硫鍵,如果片段想用于結(jié)合研究,這一點(diǎn)尤為重要,因?yàn)榻Y(jié)合效率和免疫反應(yīng)性將被保留。

Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對(duì)其他物種的 IgG 也有活性,包括來(lái)自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此,F(xiàn)abRICATOR的高特異性在某些情況下會(huì)使其對(duì)鉸鏈區(qū)域的突變敏感,并損害酶活性。來(lái)自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,與 FabRICATOR 相比,F(xiàn)abRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而,小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,并且不被 FabRICATOR Z 消化。對(duì)于這種抗體種類,F(xiàn)abULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。FabRICATOR(IdeS蛋白酶)的一大優(yōu)勢(shì)是速度!

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與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時(shí)內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時(shí)間延長(zhǎng),則不存在過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性?;钚允窃?7°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來(lái)的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個(gè)單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。Genovis的GingisKHAN 可以消化單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白。黑龍江FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

Genovis的FabRICATOR (IdeS) 酶已成為一種接受的快速表征單克隆抗體 (mAb) 的分析工具。黑龍江FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

Genovis集團(tuán)由瑞典GenovisAB和美國(guó)全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達(dá)克上市。如需了解更多信息,請(qǐng)?jiān)L問(wèn)投資者關(guān)系。Genovis的經(jīng)營(yíng)理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進(jìn)和節(jié)省開(kāi)發(fā)新治療方法和診斷的時(shí)間。Genovis酶產(chǎn)品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制。通過(guò)在2020年收購(gòu)QEDBioscience,產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究、生物藥物開(kāi)發(fā)和診斷檢測(cè)的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關(guān)QED的更多信息Genovis研發(fā)活動(dòng)的基石是客戶關(guān)系,使產(chǎn)品開(kāi)發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開(kāi)發(fā)新工作流程和新靶點(diǎn)抗體的學(xué)術(shù)團(tuán)體的合作同樣有價(jià)值。黑龍江FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶