山東PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

Genovis 是一家瑞典生物技術公司，自2010年起，為生物制藥公司提供SmartEnzymes?工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具，主要用于生物制藥行業(yè)和學術界。 我們在全球范圍內提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?，用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產和質量控制。您可以在我們的網站上“Application頁面”獲得更多應用信息，如果您有興趣，可以和我們一起做一個“SmartStories”，也可以聯系我們。?PNGase F（肽 N-糖苷酶 F）是一種糖酰胺酶，可水解內層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。山東PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

genvois的OpeRATOR 是一種內切蛋白酶，可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基化蛋白的肽鍵的水解。內切蛋白酶具有高特異性，可消化絲氨酸或蘇氨酸殘基的O-聚糖N端的蛋白質。 OpeRATOR 活性需要粘蛋白型的 O-聚糖，并且該酶不會用 N-連接聚糖消化糖蛋白。該酶對具有亞洲化he心1 O-聚糖的位點z活躍。它還消化唾液酸化的he心 1 和he心 3，但程度要低得多。為了獲得z佳性能，需要去除唾液酸，因此，SialEXO凍干（唾液酸酶混合物）包含在購買中。 安徽高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶用SialEXO處理血清，上樣于GlycOCATCH，洗滌，洗脫O-糖基化蛋白。Swiss Prot 數據庫鑒定蛋白質列表。

genovis分析依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖：為了確認依那西普和曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數據，進行了釋放的N-聚糖分析。標記的N-聚糖的分離清楚地表明了依那西普和曲妥珠單抗上半乳糖的丟失，如半乳糖基化聚糖物種的信號丟失所示。該酶是一種有價值的工具，可降低樣品異質性，用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復雜 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-連接的 GalNAc；2. 實現完全糖基去除，以改善蛋白質表征；3. 可固定在即用型離心柱中。

OglyZOR 來源于口腔鏈球菌，在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽，分子量為 227 kDa。SialEXO來源于Akkermansia muciniphila，在大腸桿菌中表達。SialEXO酶含有His標簽，組分的分子量分別為42 kDa和66 kDa。1.高效O-糖苷酶；2. 降低樣品異質性，揭示潛在的關鍵蛋白質修飾；3. 完全、穩(wěn)健地去除 O-糖he心 1 二糖。Genovis的凍干酶，用于水解糖蛋白上的he心1 O-聚糖。OglyZOR 凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在 2000 個單位的小瓶中，用于在 2 mg 糖蛋白上水解he心 1 O-聚糖。它需要去除唾液酸助劑才能發(fā)揮作用，因此與2000單位的SialEXO凍干一起提供。上海倍篤生物科技有限公司（簡稱“倍篤生物”）代理Genovis的IdeS酶等。

GalactEXO中的酶來源于Akkermansia muciniphila，并在大腸桿菌中表達。GalactEXO由兩種半乳糖苷酶組成，均帶有His標簽，組分的分子量為87 kDa和109 kDa。用于水解糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的凍干酶。Genovis的GalactEXO 凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在 2000 單位小瓶中，用于在 2 mg 糖蛋白上水解 β1-3,4-連接的半乳糖。1. 用于方法開發(fā)的靈活格式；2. 可以結合酶以提高效率； 3. 適用于自動化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可！將混合物加載到GlycOCATCH上，洗滌樹脂，并用8M尿素洗脫結合的肽。純化后，在RP-LC-MS上分離樣品。數據顯示，糖苷酸肽的選擇性純化，攜帶he心1-O-聚糖。IgA 特異性 O-糖肽富集：IgA 抗體包含 N-連接的糖基化和重度 O-糖基化的鉸鏈區(qū)域。胰蛋白酶消化IgA后，將肽和genovis 的SialEXO的混合物加載到GlycOCATCH樹脂上，并用PBS和離心洗滌。用 8 M 尿素洗脫顯示預期的 O-糖基化鉸鏈肽富集，具有不同程度的糖基化。從而實現 O-糖譜分析、位點占用測定和 O-糖肽圖譜以及使用 LC-MS 分析的中級方法。山東PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

O-和N-糖基化蛋白的高效α2-3去唾液酸化可以在1小時內實現。山東PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

使用Genovis的OpeRATOR圖譜O-聚糖位點對依那西普進行LC-MS分析：依那西普是一種 Fc 融合蛋白，具有高度 O-糖基化的鉸鏈區(qū)域。將依那西普與OpeRAT一起孵育，并使用LC-MS/MS分析所得糖肽。促紅xibao生成素 （EPO） 是一種具有單個 O-糖基化位點的 ~30 kDa 糖蛋白。在PNGase F去除N-糖并使用SialEXO進行去唾液酸化后，用OpeRAT消化天然蛋白，并通過反相LC-MS分析所得蛋白質片段。O-糖基化的位點可以通過識別OeRATOR消化位點直接推斷出來。為了獲得良好性能，需要去除唾液酸助劑，因此購買中包括2000個單位（如果SialEXO凍干）。1. 用于方法開發(fā)的靈活產品形式；2. 可以結合酶以提高效率；3. 適用于自動化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。O-聚糖是OpeRATOR活性所必需的，而該酶在N-聚糖上沒有活性。OpeRATOR和SialEXO處理后，O-糖基化蛋白被消化成攜帶O-聚糖的肽。消化發(fā)生在O-糖基化位點的N端。山東PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)