IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動(dòng)物造模用陽(yáng)性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等，品牌有瑞典Genovis、德國(guó)BASF、美國(guó)QED、中國(guó)君研生物、中國(guó)金傳生物、中國(guó)毫厘科技、中國(guó)再帆生物等。這些國(guó)產(chǎn)品牌都具有國(guó)內(nèi)自研、自產(chǎn)能力，批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質(zhì)可控，為行業(yè)發(fā)展提供更多國(guó)產(chǎn)選擇。鉸鏈上方的單個(gè)暴露賴氨酸殘基,生成的片段可用于結(jié)晶和高階（HOS）NMR研究、結(jié)合研究等。IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

大多數(shù)zhiliao抗體攜帶人 IgG1 骨架，雙特異性或多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來(lái)表征特性，例如單價(jià)結(jié)合、二硫鍵擾亂和配對(duì) Fc 糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和 Lys-C 的酶消化，這需要優(yōu)化以大限度地減少過(guò)度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA （IgdE） 在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人 IgG1，以產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段。該酶在大多數(shù)人IgG1 上也具有活性，其中鉸鏈區(qū)域以下的突變已被引入。為了證明FabALACTICA的性能，我們消化了不同的人IgG1抗體，并使用RP-HPLC分析了所得片段。用FabALACTICA消化后觀察到的定義峰顯示了不同人IgG1抗體的均質(zhì)片段生成和強(qiáng)大的酶性能。FabALACTICA 酶也可用于生成完整的 Fc 片段。青海FabULOUSIdeS蛋白酶通過(guò)高分辨率質(zhì)譜進(jìn)行分離和鑒定：酶解曲線和更高的序列覆蓋率。

Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人IgG1，并在兩小時(shí)內(nèi)生成均質(zhì)的Fab和Fc片段（Genovis的IdeS在鉸鏈區(qū)下方的單個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行消化）。生成的片段可用于結(jié)晶和高階結(jié)構(gòu)（HOS）的NMR研究、結(jié)合研究等。突變的鉸鏈區(qū)域是zhiliao性候選抗體的常見修飾，以降低效應(yīng)器功能。這些突變可能會(huì)影響具有高底物特異性的酶的抗體消化效率。例如，高度特異性的FabRICATOR（IdeS）消化效率對(duì)含有常見LALA突變的抗體產(chǎn)生負(fù)面影響。FabDELLO作用于人IgG1鉸鏈上方的單個(gè)暴露賴氨酸殘基，能夠?qū)哂型蛔冦q鏈區(qū)域的抗體進(jìn)行流行的中級(jí)LC-MS分析。例如，用FabDELLO消化市售的IgG1risankizumab，在下鉸鏈區(qū)域具有LALA突變，并通過(guò)反相LC-MS進(jìn)行分析。消化產(chǎn)生均勻的Fab和Fc片段。用20mMDTT還原片段，用于中級(jí)LC-MS分析，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了均相的Fc/2、輕鏈（LC）和Fd片段。用FabDELLO消化后觀察到的定義峰顯示出均勻的片段生成和酶的穩(wěn)健性能。

與IdeS不同，Genovis的GingisREX（RgpB）是一種精氨酸特異性蛋白酶，可消化精氨酸殘基的C末端蛋白質(zhì)，包括難以與其他酶消化的Arg-Pro鍵。該酶可用于肽圖分析、從頭肽測(cè)序和翻譯后修飾分析。精氨酸殘基的特異性C-末端消化；在其他困難的精氨酸-脯氨酸序列中可靠消化；產(chǎn)生更長(zhǎng)的肽-提高序列覆蓋率。GingisREX是一種半胱氨酸蛋白酶，可特異性地消化肽鍵C末端到精氨酸殘基，包括與脯氨酸相連的精氨酸。半胱氨酸是酶活性所必需的。與胰蛋白酶消化相比，可生成更長(zhǎng)的肽，胰蛋白酶消化可以通過(guò)高分辨率質(zhì)譜進(jìn)行分離和鑒定。這為自下而上方法的樣品制備提供了更多選擇，以實(shí)現(xiàn)替代的酶解曲線和更高的序列覆蓋率。GingisREX在賴氨酸上沒(méi)有活性，通常使用Arg-C觀察到。該酶在5.0-9.0的寬pH值范圍內(nèi)具有活性，它需要半胱氨酸并被鹽酸胍抑制。該酶是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。Genovis提供的IgASAP Sub1+2 在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人 IgA1 和 IgA2m1，產(chǎn)生完整且均勻的 Fab 和 Fc 片段。

與IdeS不同，Genovis的FabULOUS（SpeB）是一種半胱氨酸蛋白酶，可在來(lái)自多個(gè)不同物種和亞類的IgG的鉸鏈區(qū)域消化，產(chǎn)生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化，產(chǎn)生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點(diǎn)是......KTHT...例如，制備的Fab片段可用于親和力研究、Fab糖基化研究和結(jié)構(gòu)研究。對(duì)來(lái)自多個(gè)物種和亞類的IgG有活性–上鉸鏈區(qū)域的消化物；快速-在一小時(shí)內(nèi)生成Fab和Fc片段；有效消化小鼠IgG1。FabULOUS來(lái)源于化膿性鏈球菌，在大腸桿菌中表達(dá)。FabULOUS的分子量為29kDa，該酶含有His標(biāo)簽。有一種檢測(cè)FabRICATOR（IdeS蛋白酶）酶的方法。了解有關(guān)山羊多克隆抗體 Anti-FabRICATOR 的更多信息。云南FabRICATOR ZIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

Genovis的FabULOUS來(lái)源于化膿性鏈球菌，在大腸桿菌中表達(dá)，分子量為 29 kDa，該酶含有 His 標(biāo)簽。IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

在Genovis，我們的策略是幫助客戶進(jìn)行中級(jí)（或亞基）分析，這是我們的工作，特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法，我們發(fā)現(xiàn)，與簡(jiǎn)單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復(fù)雜但信息豐富的肽圖譜相比，中級(jí)方法具有優(yōu)勢(shì)。通過(guò)執(zhí)行中級(jí)描述，您可以生成從完整的質(zhì)量實(shí)驗(yàn)中獲得的所有信息，具有額外的優(yōu)勢(shì)。在對(duì)抗體進(jìn)行完整質(zhì)量分析時(shí)，很難明確地識(shí)別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進(jìn)，可以更有效地分析更大的分子，但通過(guò)使用我們的SmartEnzymes，如IdeS，可以將抗體分解成更小的片段，這提高了這些實(shí)驗(yàn)可以執(zhí)行的分辨率，因此，增加了鑒定修飾的信心。此外，你不僅能夠更好地識(shí)別修改，而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個(gè)結(jié)構(gòu)域，這是你在完整水平上無(wú)法做到的。IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶