湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學

來源: 發(fā)布時間:2024-06-10

Genovis集團由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達克上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關系。Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產(chǎn)品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質量控制。通過在2020年收購QEDBioscience,產(chǎn)品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關QED的更多信息Genovis研發(fā)活動的基石是客戶關系,使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學術團體的合作同樣有價值。Genovis提供FabRICATOR (IdeS)驗證包。三種不同批次的凍干酶,用于驗證基于FabRICATOR的分析方法。湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學

湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學,IdeS蛋白酶

LC-MS中級分析是一種被大眾接受的分析方法,用于快速表征mAb和其他基于IgG的生物制藥。它有助于理解多種關鍵質量屬性 (CQA),例如糖基化、氧化和 C 端賴氨酸剪切。這種關于翻譯后修飾(PTM)的詳細知識是生物制藥開發(fā)和制造所必需的。Genovis的FabRICATOR HPLC酶色譜柱,可快速進行單克隆抗體的柱上酶切,并產(chǎn)生一致的亞基。該色譜柱含有固定化的FabRICATOR(IdeS)酶,可在鉸鏈下方快速且特異性地消化IgG,產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段,而不會出現(xiàn)任何過度消化的風險。為了減少樣品處理并為樣品制備提供自動化解決方案,F(xiàn)abRICATOR被共價固定在樹脂上,并裝在適用于HPLC的PEEK色譜柱硬件中。使用FabRICATOR HPLC色譜柱,只需稍作修改,即可使用標準HPLC-MS裝置自動生成抗體亞基。然后,F(xiàn)abRICATOR HPLC色譜柱上消解產(chǎn)生的亞基被捕獲在在線連接的反相(RP)色譜柱的柱頭上。湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學使用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 對包含多個柔性連接子蛋白進行質量控制的中級分析方法具有強大的功能。

湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學,IdeS蛋白酶

用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1和IgA2m1,產(chǎn)生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長,因此IgA1和IgA2m1之間來自消化位點的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時間為過夜(16-18小時),并且由于酶的特異性,沒有過度消化的風險。該酶在pH值為6.0至8.0時具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可產(chǎn)生活性。活性為37°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。

作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,IgA在自身免疫性疾病、過敏反應、胃腸道疾病等許多不同的健康狀況中發(fā)揮作用。在天然條件和復雜生物樣品中選擇性和特異性消化IgA的能力在臨床醫(yī)學和研究中具有重要價值。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復雜性并簡化IgA分析表征的寶貴工具。人IgA1和IgA2之間的一個顯著結構差異是鉸鏈區(qū)域。與IgA2相比,IgA1具有更長的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區(qū)域。IgASAPSub1的消化位點位于該擴展區(qū)域,使酶具有IgA1特異性。IgA2亞類以三種等位基因形式存在,A2m1、A2m2和A2m3。IgASAPSub1+2在脯氨酸(P)和纈氨酸(V)之間消化IgA1和IgA2m1只有N端到鉸鏈區(qū)域,但由于A2m2和A2m3中的脯氨酸殘基被精氨酸(R)殘基取代,因此這兩種同種異體型的IgA2對消化具有抗性。度拉糖肽的連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點。

湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學,IdeS蛋白酶

抗體 Fc 糖基化譜是一種重要的 CQA,因為它會影響療效、和免疫原性。因此,需要從早期開發(fā)、工藝開發(fā)到質量控制和批量放行的整個過程對Fc聚糖譜進行監(jiān)測。傳統(tǒng)的分析方法基于對游離的聚糖進行熒光標記,然后通過HILIC-HPLC或CE進行分析,這需要多步驟的樣品制備方案,這需要大量的時間和資源。使用Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,然后使用LC-MS進行中級分析,為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的替代方法。如上所示,它很容易實現(xiàn)自動化,以提高通量并降低處理錯誤的風險??上彼釟埢?C 末端蛋白質,包括難以與其他酶消化的 Arg-Pro 鍵。遼寧FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

QC方法需要執(zhí)行簡單,易于訓練,高度可重復,數(shù)據(jù)易于分析。湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學

與IdeS不同,Genovis的GlySERIAS是一種獨特的酶,可消化柔性富含甘氨酸的融合蛋白連接子,例如Gly4Ser和GlyxSery(GS)以及聚甘氨酸(G)接頭。該酶能夠分離多功能融合蛋白的各個結構域,以促進表征并增加對這些分子的理解。融合蛋白的中級分析既可以降低整體樣品的復雜性,又可以對翻譯后修飾進行結構域特異性鑒定和監(jiān)測。為了改善連接子的去除,Genovis建議使用GlySERIASImmobilized。對于連接子表征,我們推薦GlySERIAS凍干。具有柔性接頭的獨特酶消化融合蛋白;中級方法可降低融合蛋白表征的復雜性;復雜融合蛋白的可靠且可重復的消化。Genovis的GlySERIAS酶切由甘氨酸或甘氨酸和絲氨酸殘基的重復序列組成的柔性連接子。該酶在天然反應條件下具有活性,能夠對復雜的融合蛋白進行中級表征。連接子區(qū)域同時在多個位點被消化,導致先前連接的組分分離?;钚园l(fā)生在pH7.6下,孵育時間可以根據(jù)所需的產(chǎn)物而變化。GlySERIAS是從噬菌體K克隆而來的,在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為18kDa。湖南GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學