廣東FabALACTICAIdeS蛋白酶

與IdeS不同，Genovis的GlySERIAS是一種獨(dú)特的酶，可消化柔性富含甘氨酸的融合蛋白連接子，例如Gly4Ser和GlyxSery（GS）以及聚甘氨酸（G）接頭。該酶能夠分離多功能融合蛋白的各個(gè)結(jié)構(gòu)域，以促進(jìn)表征并增加對(duì)這些分子的理解。融合蛋白的中級(jí)分析既可以降低整體樣品的復(fù)雜性，又可以對(duì)翻譯后修飾進(jìn)行結(jié)構(gòu)域特異性鑒定和監(jiān)測(cè)。為了改善連接子的去除，Genovis建議使用GlySERIASImmobilized。對(duì)于連接子表征，我們推薦GlySERIAS凍干。具有柔性接頭的獨(dú)特酶消化融合蛋白；中級(jí)方法可降低融合蛋白表征的復(fù)雜性；復(fù)雜融合蛋白的可靠且可重復(fù)的消化。Genovis的GlySERIAS酶切由甘氨酸或甘氨酸和絲氨酸殘基的重復(fù)序列組成的柔性連接子。該酶在天然反應(yīng)條件下具有活性，能夠?qū)?fù)雜的融合蛋白進(jìn)行中級(jí)表征。連接子區(qū)域同時(shí)在多個(gè)位點(diǎn)被消化，導(dǎo)致先前連接的組分分離?；钚园l(fā)生在pH7.6下，孵育時(shí)間可以根據(jù)所需的產(chǎn)物而變化。GlySERIAS是從噬菌體K克隆而來(lái)的，在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽，分子量為18kDa。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復(fù)雜性并明顯簡(jiǎn)化IgA分析表征的寶貴工具。廣東FabALACTICAIdeS蛋白酶

抗體 Fc 糖基化譜是一種重要的 CQA，因?yàn)樗鼤?huì)影響療效、和免疫原性。因此，需要從早期開(kāi)發(fā)、工藝開(kāi)發(fā)到質(zhì)量控制和批量放行的整個(gè)過(guò)程對(duì)Fc聚糖譜進(jìn)行監(jiān)測(cè)。傳統(tǒng)的分析方法基于對(duì)游離的聚糖進(jìn)行熒光標(biāo)記，然后通過(guò)HILIC-HPLC或CE進(jìn)行分析，這需要多步驟的樣品制備方案，這需要大量的時(shí)間和資源。使用Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb，然后使用LC-MS進(jìn)行中級(jí)分析，為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的替代方法。如上所示，它很容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，以提高通量并降低處理錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)。吉林GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)Genovis 酶產(chǎn)品，被世界各地的科學(xué)家使用，創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制。

蛋白酶用于生成肽，用于質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)。這些應(yīng)用包括蛋白質(zhì)組學(xué)和生物制藥的深度表征。由于遺漏了切割和樣品制備誘導(dǎo)的偽影，傳統(tǒng)的蛋白酶并不總是理想的，因此需要具有不同特異性的蛋白酶工具箱。Genovis的GingisREX 是一種精氨酸特異性蛋白酶，可將蛋白質(zhì) C 末端消化為精氨酸殘基。與胰蛋白酶肽相比，所得肽更長(zhǎng)，并可能導(dǎo)致序列覆蓋率增加。質(zhì)譜分析中蛋白酶的特異性對(duì)于獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)集和避免復(fù)雜的數(shù)據(jù)解釋至關(guān)重要。作為模型底物，使用胰島素氧化β鏈來(lái)比較 GingisREX 和 ArgC 的酶特異性。胰島素氧化β鏈含有一個(gè)精氨酸和一個(gè)賴(lài)氨酸殘基。在RP-HPLC和質(zhì)譜法上分析GingisREX和ArgC的酶切肽。GingisREX在賴(lài)氨酸殘基上沒(méi)有酶活性或其他額外活性，即使在長(zhǎng)時(shí)間孵育過(guò)夜后，酶與底物的比例也很高（1：5）。然而，ArgC在精氨酸殘基上顯示出主要活性，但在賴(lài)氨酸殘基上也可以看到酶消化。在酶與底物的比例為 1：20 和過(guò)夜孵育下，證明了 ArgC 的額外非特異性活性。在相同條件下，GingisREX未檢測(cè)到這種情況。數(shù)據(jù)證實(shí)了GingisREX精氨酸殘基的特異性活性，并顯示使用Arg-C在賴(lài)氨酸和其他殘基處的非特異性消化。

Genovis除了提供IdeS酶以外，還提供很多種特異性蛋白酶，如半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA （IgdE）。IgdE 在鉸鏈正上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人 IgG1，產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段的均質(zhì)池。它在pH值和鹽濃度范圍內(nèi)具有活性，不需要任何還原劑或輔助因子。因此，與許多其他常用的蛋白酶相比，F(xiàn)abALACTICA不需要任何優(yōu)化來(lái)避免過(guò)度消化。這使得FabALACTICA成為一種有吸引力的酶，例如在還原和非還原條件下的LC-MS分析、抗體高階結(jié)構(gòu)（HOS）的結(jié)晶和NMR研究、雙特異性或多特異性抗體的表征、單價(jià)結(jié)合研究和完整的Fc聚糖分析。消化在1小時(shí)內(nèi)完成，且具有特異性。即使孵育時(shí)間延長(zhǎng)，也沒(méi)有過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。

作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分，IgA在自身免疫性疾病、過(guò)敏反應(yīng)、胃腸道疾病等許多不同的健康狀況中發(fā)揮作用。在天然條件和復(fù)雜生物樣品中選擇性和特異性消化IgA的能力在臨床醫(yī)學(xué)和研究中具有重要價(jià)值。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復(fù)雜性并簡(jiǎn)化IgA分析表征的寶貴工具。人IgA1和IgA2之間的一個(gè)顯著結(jié)構(gòu)差異是鉸鏈區(qū)域。與IgA2相比，IgA1具有更長(zhǎng)的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區(qū)域。IgASAPSub1的消化位點(diǎn)位于該擴(kuò)展區(qū)域，使酶具有IgA1特異性。IgA2亞類(lèi)以三種等位基因形式存在，A2m1、A2m2和A2m3。IgASAPSub1+2在脯氨酸（P）和纈氨酸（V）之間消化IgA1和IgA2m1只有N端到鉸鏈區(qū)域，但由于A2m2和A2m3中的脯氨酸殘基被精氨酸（R）殘基取代，因此這兩種同種異體型的IgA2對(duì)消化具有抗性。Genovis的策略是幫助客戶(hù)進(jìn)行亞基分析，特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品，如IdeS蛋白酶。河南FabRICATOR ZIdeS蛋白酶抗體酶切

IgASAP Sub1 可水解分泌物和血清 IgA1。廣東FabALACTICAIdeS蛋白酶

與IdeS不同，融合蛋白是通過(guò)將兩種或多種蛋白質(zhì)或肽的功能組合成一個(gè)量身定制的分子來(lái)創(chuàng)造的，以專(zhuān)門(mén)應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn)。連接此類(lèi)蛋白質(zhì)或肽結(jié)構(gòu)域的常見(jiàn)方法是包含柔性連接子。這些連接子通常富含甘氨酸，例如甘氨酸殘基（G），或甘氨酸殘基散布絲氨酸殘基（GS）以形成重復(fù)序列。這為連接子提供了足夠的靈活性，不會(huì)干擾連接蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域的功能。然而，這些新模式帶來(lái)了新的分析挑戰(zhàn)，需要新的工具來(lái)促進(jìn)表征和產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)。中級(jí)分析已成為分析單克隆抗體療法的標(biāo)準(zhǔn)方法，涉及將分子消化成幾個(gè)定義的亞基。它們足夠小，可以獲得高質(zhì)量的質(zhì)譜圖，并為產(chǎn)品質(zhì)量屬性提供特定領(lǐng)域的信息。由于G和GS連接子對(duì)常見(jiàn)蛋白酶的降解具有抗性，因此很難分離結(jié)構(gòu)域以進(jìn)行深入分析。因此，Genovis開(kāi)發(fā)了GlySERIAS，不同于IdeS酶，一種消化柔性富含甘氨酸的連接子的酶。GlySERIAS可以分離不同的功能域，并實(shí)現(xiàn)對(duì)融合蛋白、多特異性抗體和含有富含甘氨酸的連接子的各種mAb片段進(jìn)行詳細(xì)表征的中級(jí)方法。廣東FabALACTICAIdeS蛋白酶