江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-09

抗體由于其大小和復(fù)雜性,是一種難以表征的分子。偶聯(lián)藥物有效載荷是對(duì)抗Ai癥等疾病的一種有吸引力的方法,但進(jìn)一步增加了異質(zhì)性的復(fù)雜性和風(fēng)險(xiǎn)。抗體藥物偶聯(lián)物 (ADC) 需要像任何其他基于 IgG 的生物制藥一樣進(jìn)行仔細(xì)和詳細(xì)的表征,并且需要適當(dāng)?shù)姆治龉ぷ髁鞒獭enovis的FabRICATOR(IdeS)酶將ADC消化成其亞基,可以詳細(xì)表征這類復(fù)雜的藥物。Genovis的內(nèi)切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 還可以研究完整的 ADC,但降低復(fù)雜性并提高分辨率。Genovis的IgASAP 是 IgA 消化酶家族。IgASAP Sub1 是一種 IgA1 特異性酶。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶,IdeS蛋白酶

用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1和IgA2m1,產(chǎn)生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長,因此IgA1和IgA2m1之間來自消化位點(diǎn)的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時(shí)間為過夜(16-18小時(shí)),并且由于酶的特異性,沒有過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為6.0至8.0時(shí)具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可產(chǎn)生活性?;钚詾?7°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個(gè)單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。江蘇FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)FabRICATOR Magic自動(dòng)平行抗體酶切和亞基生成,用于處理與克隆選擇。

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Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對(duì)IgG進(jìn)行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、質(zhì)譜或其他分析方法分析片段。抗體消化和亞基生成的自動(dòng)化使生物反應(yīng)器的在線監(jiān)測(cè)應(yīng)用成為可能,例如,作為2D-LC-MS設(shè)置的一部分,將反應(yīng)器直接耦合到MS。這種自動(dòng)化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時(shí)間、樣品處理時(shí)間并提高了通量。

Genovis除了提供IdeS酶以外,還提供很多種特異性蛋白酶,如半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)。IgdE 在鉸鏈正上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人 IgG1,產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段的均質(zhì)池。它在pH值和鹽濃度范圍內(nèi)具有活性,不需要任何還原劑或輔助因子。因此,與許多其他常用的蛋白酶相比,F(xiàn)abALACTICA不需要任何優(yōu)化來避免過度消化。這使得FabALACTICA成為一種有吸引力的酶,例如在還原和非還原條件下的LC-MS分析、抗體高階結(jié)構(gòu)(HOS)的結(jié)晶和NMR研究、雙特異性或多特異性抗體的表征、單價(jià)結(jié)合研究和完整的Fc聚糖分析。三個(gè)柔性 GS 連接子均被切開,這有助于識(shí)別Fc區(qū)域的修飾。

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與IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在來自多個(gè)不同物種和亞類的IgG的鉸鏈區(qū)域消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點(diǎn)是......KTHT...例如,制備的Fab片段可用于親和力研究、Fab糖基化研究和結(jié)構(gòu)研究。對(duì)來自多個(gè)物種和亞類的IgG有活性–上鉸鏈區(qū)域的消化物;快速-在一小時(shí)內(nèi)生成Fab和Fc片段;有效消化小鼠IgG1。FabULOUS來源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達(dá)。FabULOUS的分子量為29kDa,該酶含有His標(biāo)簽。Genovis的FabDELLO酶在底物(包括LALA和LFLE突變的IgG1)上的有效性。重慶IdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

Genovis的FabRICATOR(IdeS) MagIC 以較少的用戶交互減少實(shí)驗(yàn)和操作時(shí)間。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

與IdeS不同,Genovis的IgASAP是IgA消化酶家族。IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1,而IgASAPSub1+2特異性消化鉸鏈上方的IgA1和IgA2m1。兩種酶都產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAP酶能夠生成完整的單價(jià)Fab片段以及IgA的中級(jí)分析,從而促進(jìn)IgA的表征,例如,在疫苗、zhiliao和診斷的開發(fā)過程中。獨(dú)特的酶促工具,可實(shí)現(xiàn)IgA的中級(jí)表征和質(zhì)量控制;生成均相的Fab和Fc片段,并保留免疫反應(yīng)性;高度特異性–人IgA鉸鏈上方的一個(gè)消化位點(diǎn)。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶