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外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾管內管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換，溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *一個好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點您知道嗎？徐匯區(qū)默克超濾濃縮管代理商

Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮（3kDa 細胞色素 C， 10kDa 細胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG）， 測定在離心一定時間后的回收率。數(shù)據(jù)顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產品，默克密理博生命科學部網 站上提供選擇指引，您需要按照提 示進行選擇，**終會選出一款產品。 為每次實驗選擇**合適的， 您也能快速成為超濾高手！青浦區(qū)默克15ml超濾濃縮管訂購你知道上海超濾濃縮管代理銷售哪家比較好嗎？

蛋白復性，溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理，采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發(fā)生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管，**提高了樣品透析表面積，在2-5小時內即可完成透析，是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優(yōu)點： 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質，增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染，安全可靠 旋蓋式設計，易于打開和關緊 硬管設計，易于更充分地吸取、移走樣品，即使是μL級樣品加樣方便，功能多樣 ? 采用標準***頭加樣，而非注射器和針頭加樣，減少膜破損的風險提供的浮漂適合在常見的廣口燒杯中使用，方便在透析過程中換液D-Tube? 透析管還可以用于從瓊脂糖或丙烯酰凝膠電洗脫樣品

蛋白親和純化（無需換液和濃縮） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心，總耗時~75分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂（沉降的柱床體積）和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。（柱床）樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*，其間可溫和攪動促進結合。超濾濃縮管的各種系列應用領域還是不一樣的。

7次低速離心，總耗時~100分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。超濾濃縮管的優(yōu)勢您了解多少呢？閔行區(qū)默克超濾濃縮管

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外泌小體（Exosome）是一種囊泡結構，直徑通常在30-150nm，常見于正常體液和病理樣本，培養(yǎng)細胞也可分泌。研究人員已經在血液、唾液、尿液、母乳等中發(fā)現(xiàn)外泌小體，其運載的蛋白和核酸涉及其細胞間物資、信息交流，影響和調控著多方面的生理功能，包括**的發(fā)生、免疫促進、凋亡調控、血管的生成、炎癥的反應及發(fā)育和分化等。由于在體液中出現(xiàn)，外泌小體對于臨床生物標志物檢測來說特別有利，成為體外診斷、biomarker研究的新熱點。徐匯區(qū)默克超濾濃縮管代理商