溫州全自動膜片鉗技術研究方案

膜片鉗技術本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇，兩者的區(qū)別關鍵在于：①膜電位固定的方法不同；②電位固定的細胞膜面積不同，進而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術主要是通過保持細胞跨膜電位不變，并迅速控制其數(shù)值，以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細胞膜或一大塊細胞膜上所有離子通道活動。目前電壓鉗主要用于巨大細胞的全性能電流的研究，特別在分子克隆的卵母細胞表達電流的鑒定中發(fā)揮著其他技術不能替代的作用。膜片鉗使用的注意事項：玻璃微電極需先用甲醇浸泡，再用酒精燈微燒兩端，使其平滑。溫州全自動膜片鉗技術研究方案

膜片鉗系統(tǒng)有如下應用局限性(1)光能應用于懸浮細胞的紀錄，因此大部分的紀錄對象為化細胞，而對于需要貼壁生長的大多數(shù)正常細胞，現(xiàn)有的自動膜片鉗系統(tǒng)就無法紀錄；(2)在紀錄對象上，目前的膜片鉗系統(tǒng)只能紀錄胞膜形狀平整飽滿的細胞，大部分是工具細胞如化細胞，此類細胞有比較強的細胞膜可以禁得起各種人為操作，而許多具有研究價值的細胞(例如元代培養(yǎng)的神經(jīng)元)胞膜較弱容易破裂，且胞體表面不規(guī)整，現(xiàn)有的自動膜片鉗系統(tǒng)難以派上用場。溫州藥理學離子通道方案膜片鉗技術可用于研究特殊制備的巨型球狀體中的細菌離子通道。

膜片鉗技術的應用范圍：①膜片鉗技術在通道中的研究；②與藥物作用有關的心肌離子通道研究；③對離子通道生理與病理作用機制的研究；④對單細胞形態(tài)與功能關系的研究；⑤對藥物作用機制的研究；⑥在心血管藥理方面的研究；⑦創(chuàng)新藥物研究與高通量篩選的研究；⑧在神經(jīng)科學中的研究?，F(xiàn)如今，膜片鉗技術已經(jīng)大為普及，并普遍活躍在離子通道相關的研究當中。也許未來有1天，膜片鉗技術會過時，但兩百年來的探索歷程，數(shù)代學者們的心血，以及它在科學研究中的功績會一直被銘記。

膜片鉗操作實驗：膜片鉗放大器是整個實驗系統(tǒng)中的中心，它可用來作單通道或全細胞記錄，其工作模式可以是電壓鉗，也可以是電流鉗。從原理來說，膜片鉗放大器的探頭電路即I-V變換器有兩種基本結(jié)構形式，即電阻反饋式和電容反饋式，前者是一種典型的結(jié)構，后者因用反饋電容取代了反饋電阻，降低了噪聲，所以特別適合很低噪聲的單通道記錄。由于供膜片鉗實驗的專門計算機硬件及相應的軟件程序的相繼出現(xiàn)，使得膜片鉗實驗操作簡便、效率提高。如與EPC-9型膜片鉗放大器（內(nèi)含ITC-16數(shù)據(jù)采集/接口卡）配套使用的軟件PULSE/PULSEFIT，它既可產(chǎn)生刺激波形，控制數(shù)據(jù)采集，又可分析數(shù)據(jù)，同時具有用于膜電容監(jiān)測的鎖相放大器，多種軟件功能集成于一體。膜片鉗使用操作注意：在儀器使用以前及使用之后按按照使用時長做好登記工作。

膜片鉗實驗系統(tǒng)：根據(jù)不同的電生理實驗要求，可以組建不同的實驗系統(tǒng)，但有若干共同的基本部件，包括機械部分（防震工作臺、屏蔽罩、儀器設備架）、光學部分（顯微鏡、視頻監(jiān)視器、單色光系統(tǒng)）、電子部件（膜片鉗放大器、刺激器、數(shù)據(jù)采集的設備、計算機系統(tǒng)）和微操縱器在大多數(shù)膜片鉗實驗，要求所有實驗儀器及設備均具有良好的機械穩(wěn)定性，以使微電極與細胞膜之間的相對運動盡可能小。防震工作臺放置倒置顯微鏡和與之固定連接的微操縱器，其他設備置于臺外。屏蔽罩由銅絲網(wǎng)制成，接地以防止周圍環(huán)境的雜散電場對膜片鉗放大器的探頭電路的干擾。儀器設備架要靠近工作臺，便于測量儀器與光學儀器配接。膜片鉗的應用：在心血管藥理研究中的應用。東莞細胞生物學膜片鉗電生理技術原理

膜片鉗使用操作注意：實驗結(jié)束后必須關閉實驗室的水電，檢查實驗室門窗。溫州全自動膜片鉗技術研究方案

膜片鉗技術及其應用：它是作者在\"膜片鉗技術及其應用\"領域所進行的研究工作的總結(jié)，同時也吸取了國際上的先進技術和新近的研究成果。內(nèi)容包括:細胞電生理與膜片鉗技術，膜片鉗系統(tǒng)的組建及實驗技術概要，膜片鉗放大器原理與低噪聲設計，單通道和全細胞電流記錄技術，數(shù)據(jù)采集和分析，細胞分泌活動的膜電容監(jiān)測技術和安培測量技術，細胞內(nèi)鈣離子濃度的測量及鈣庫特性，腦切片膜片鉗技術，心肌細胞的藥理特性和植物細胞的離子通道特性。溫州全自動膜片鉗技術研究方案

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