金華細胞生物學實用膜片鉗原理

膜片鉗芯片技術是繼細胞芯片之后的又一種嶄新的分析細胞電生理參數(shù)的芯片技術.由于該芯片除了具有傳統(tǒng)膜片鉗的高分辨和高準確性特點外,還具有高通量、自動化以及細胞多通道參數(shù)和細胞網(wǎng)絡參數(shù)在線和實時檢測等優(yōu)點.因此,該芯片技術將很大促進細胞離子通道、細胞網(wǎng)絡傳導以及藥物篩選的研究和應用.文中具體介紹了膜片鉗芯片技術的發(fā)展及其應用,結合作者的研究工作,著重介紹了膜片鉗芯片技術在味覺細胞研究的比較新進展,并結合神經芯片研究細胞網(wǎng)絡的方法,對采用膜片鉗芯片技術在細胞和分子水平上研究味覺的敏感機理和傳導機制的應用前景進行了展望。全自動膜片鉗系統(tǒng)技術指標：藥物消耗極低。每次更換的外液只需十幾微升。金華細胞生物學實用膜片鉗原理

膜片鉗的數(shù)據(jù)如何處理：1）細胞吸附式膜片(cell attached patch)是膜片鉗的基本方式,其它方式由此衍生。這種膜片形式比較穩(wěn)定因細胞骨架及有關代謝過程是完整的,故對細胞結構和環(huán)境干擾比較小。但這種膜片形式易在電極形成囊泡,從而細胞骨架可能有所變化。另外這種膜片不能控制細胞內成分。且任何影響膜電位的處理均可影響其電位水平。2）內面向外式膜片( inside outpatch)細胞內外和電極內的溶液均可調控,既能較容易地改變細胞內的離子或物質濃度,又能把酶等直接加于膜的內側面,適宜研究胞內物質對通道活動的影響。嘉興醫(yī)學膜片鉗電生理技術方案全自動膜片鉗系統(tǒng)技術指標：軟件的功能全部，可按照操作者設定的參數(shù)方案自動執(zhí)行實驗。

膜片鉗電生理技術服務只適用于藥物的初篩和二次篩選，且對樣本有很高的選擇性，而傳統(tǒng)的膜片鉗技術可適用于各種樣本，應用范圍廣，能夠分析檢測所有的離子通道類型，同時能夠分析離子通道的動力學特征。因此目前，傳統(tǒng)膜片鉗技術仍然是不可替代的。在進行膜片鉗實驗時，玻璃電極給負壓并吸住細胞，形成高阻封接，破膜，給藥，記錄數(shù)據(jù)的過程，都需要細胞保持比較好的活性狀態(tài)，才能更加高效的獲得有效數(shù)據(jù)。因此細胞的穩(wěn)定性就成了評估樣品好壞的關鍵。膜片鉗芯片技術是繼細胞芯片之后的又一種嶄新的分析細胞電生理參數(shù)的芯片技術.由于該芯片除了具有傳統(tǒng)膜片鉗的高分辨和高準確性特點外,還具有高通量、自動化以及細胞多通道參數(shù)和細胞網(wǎng)絡參數(shù)在線和實時檢測等優(yōu)點.因此,該芯片技術將很大促進細胞離子通道、細胞網(wǎng)絡傳導以及藥物篩選的研究和應用。

膜片鉗實驗系統(tǒng)：根據(jù)不同的電生理實驗要求，可以組建不同的實驗系統(tǒng)，但有若干共同的基本部件，包括機械部分（防震工作臺、屏蔽罩、儀器設備架）、光學部分（顯微鏡、視頻監(jiān)視器、單色光系統(tǒng)）、電子部件（膜片鉗放大器、刺激器、數(shù)據(jù)采集的設備、計算機系統(tǒng)）和微操縱器在大多數(shù)膜片鉗實驗，要求所有實驗儀器及設備均具有良好的機械穩(wěn)定性，以使微電極與細胞膜之間的相對運動盡可能小。防震工作臺放置倒置顯微鏡和與之固定連接的微操縱器，其他設備置于臺外。屏蔽罩由銅絲網(wǎng)制成，接地以防止周圍環(huán)境的雜散電場對膜片鉗放大器的探頭電路的干擾。儀器設備架要靠近工作臺，便于測量儀器與光學儀器配接。膜片鉗使用的注意事項：玻璃微電極需先用甲醇浸泡，再用酒精燈微燒兩端，使其平滑。

膜片鉗技術被稱為研究離子通道的“金標準”。是研究離子通道的較重要的技術。目前膜片鉗技術已從常規(guī)膜片鉗技術（Conventionalpatchclamptechnique）發(fā)展到全自動膜片鉗技術（Automatedpatchclamptechnique）。傳統(tǒng)膜片鉗技術每次只能記錄一個細胞（或一對細胞），對實驗人員來說是一項耗時耗力的工作，它不適合在藥物開發(fā)初期和中期進行大量化合物的篩選，也不適合需要記錄大量細胞的基礎實驗研究。全自動膜片鉗技術的出現(xiàn)在很大程度上解決了這些問題，它不只通量高，一次能記錄幾個甚至幾十個細胞，而且從找細胞、形成封接、破膜等整個實驗操作實現(xiàn)了自動化，免除了這些操作的復雜與困難。這兩個優(yōu)點使得膜片鉗技術的工作效率很大程度提高了！簽于全自動膜片鉗技術的這些優(yōu)點，目前已經普遍的用于藥物篩選。膜片鉗使用的注意事項：干燥季節(jié)請先用手觸摸金屬框架釋放身體的靜電。嘉興醫(yī)學膜片鉗電生理技術方案

膜片鉗使用的注意事項：換液時應時刻觀察浴槽，防止液面過低或液體溢出污染鏡頭。金華細胞生物學實用膜片鉗原理

膜片鉗只適用于藥物的初篩和二次篩選，且對樣本有很高的選擇性，而傳統(tǒng)的膜片鉗技術可適用于各種樣本，應用范圍廣，能夠分析檢測所有的離子通道類型，同時能夠分析離子通道的動力學特征。因此目前，傳統(tǒng)膜片鉗技術仍然是不可替代的。在進行膜片鉗實驗時，玻璃電極給負壓并吸住細胞，形成高阻封接，破膜，給藥，記錄數(shù)據(jù)的過程，都需要細胞保持比較好的活性狀態(tài)，才能更加高效的獲得有效數(shù)據(jù)。因此細胞的穩(wěn)定性就成了評估樣品好壞的關鍵。膜片鉗技術是一種記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜上離子通道分子活動的技術。金華細胞生物學實用膜片鉗原理

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