鎮(zhèn)江去外泌體胎牛血清

胎牛血清制備：用止血鉗夾住血管，切開1厘米左右的切口進(jìn)行插管，插好管后打開血管的止血鉗，讓牛血順采的血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌（180℃2小時(shí)）后，按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口，于采的血前半小時(shí)放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動(dòng)瓶?jī)?nèi)生理鹽水，使其充分濕潤(rùn)瓶壁后倒出，再進(jìn)行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時(shí)，再放入4℃冷庫(kù)4小時(shí)以備離心。熱滅活：一般是以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化。鎮(zhèn)江去外泌體胎牛血清

胎牛血清要求：1、性狀、外觀：淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量：3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量：≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗(yàn)：陰性。5、支原體檢驗(yàn)：陰性。6、細(xì)菌內(nèi)的毒性：≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒：陰性。8、大腸桿菌噬菌體：陰性。9、支持細(xì)胞增殖：(Sp2/0-Ag14)生長(zhǎng)曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml，細(xì)胞倍增時(shí)間：≤15h，克隆率：≥85%。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無機(jī)物等。合肥進(jìn)口血清血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。

胎牛血清應(yīng)該如何保存，可以存放多久？胎牛血清可長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱，請(qǐng)不要超過一個(gè)月。如果一次性無法用完一瓶血清，建議將胎牛血清無菌條件下分裝并儲(chǔ)存于-20℃，避免反復(fù)凍融。如何正確地解凍胎牛血清？采用逐步解凍法，將胎牛血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)入4℃冰箱融解，隨后分裝。切忌直接將胎牛血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)移至室溫解凍，這樣很容易因?yàn)闇囟茸兓髮?dǎo)致胎牛血清中的蛋白質(zhì)凝集從而出現(xiàn)沉淀。

胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)證明，經(jīng)過正確處理的熱滅活胎牛血清，對(duì)于大多數(shù)的細(xì)胞而言都是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至可能因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，從而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)明顯的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此類沉淀物增加得更多，這常常會(huì)使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議客戶，若非必須，可以不需要做熱處理這一步。如此一來，不但節(jié)省客戶寶貴的時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量。胎牛血清FBS一般需要冷凍保存。

胎牛血清：胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng)，是細(xì)胞生長(zhǎng)天然的培養(yǎng)基，它為細(xì)胞提供生長(zhǎng)因子、結(jié)合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來促進(jìn)體外細(xì)胞培養(yǎng)。透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個(gè)領(lǐng)域：蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細(xì)胞通訊以及報(bào)告基因細(xì)胞系的篩選，其中有些領(lǐng)域是相互交叉的。以下稍作舉例。將13C或15N標(biāo)記的氨基酸摻入到培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞，來標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)新合成的蛋白質(zhì)，一般培養(yǎng)5-6代，細(xì)胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標(biāo)記。然后質(zhì)譜分析，即可比較經(jīng)過不同處理的細(xì)胞，其內(nèi)部蛋白質(zhì)豐度的變化。胎牛血清的蛋白質(zhì)含量：3.5%～5.0%（ w/v）；血紅蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）。上海標(biāo)準(zhǔn)級(jí)血清

胎牛血清的細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5（EU/ml）；牛腹瀉病毒：陰性；大腸桿菌噬菌體：陰性。鎮(zhèn)江去外泌體胎牛血清

如何區(qū)別真假胎牛血清：外觀，拿到血清，較先接觸的是血清外觀，對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說，外觀的判斷尤為重要，顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。國(guó)產(chǎn)血清的點(diǎn)很分散，大多是由屠戶采的血后馬上離心收集，所以很少會(huì)有溶血，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色，當(dāng)然，國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)檎嬲奶ヅＱ迥δ懿?，紅細(xì)胞容易破裂?？偟膩碚f，國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清，質(zhì)量較好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色，差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然，熱滅活胎牛血清或保存不當(dāng)?shù)难?，由于血紅蛋白的破壞氧化，會(huì)呈現(xiàn)出暗紅，甚至咖啡色。鎮(zhèn)江去外泌體胎牛血清

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