蘇州標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-02-07

胎牛血清的生產(chǎn)工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)(同位素標(biāo)記研究細(xì)胞代謝)適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選,避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進(jìn)行加工的。胎牛血清在無(wú)菌條件下要經(jīng)過(guò)0.1微米膜三重過(guò)濾,要進(jìn)行一系列的檢測(cè),包括理化性質(zhì)檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內(nèi)的毒性和血紅蛋白)、外源因子檢查(如細(xì)菌、病毒和支原體)以及促進(jìn)細(xì)胞增殖的檢查等。透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查。胎牛血清有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。蘇州標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清

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胎牛血清要求:1、性狀、外觀:淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量:≤0.02%(w/v)。4、無(wú)菌檢驗(yàn):陰性。5、支原體檢驗(yàn):陰性。6、細(xì)菌內(nèi)的毒性:≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒:陰性。8、大腸桿菌噬菌體:陰性。9、支持細(xì)胞增殖:(Sp2/0-Ag14)生長(zhǎng)曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml,細(xì)胞倍增時(shí)間:≤15h,克隆率:≥85%。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等。莆田細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清報(bào)價(jià)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁。

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胎牛血清的生產(chǎn)工藝:透析胎牛血清,顧名思義,需經(jīng)過(guò)透析。它是在4°C下用特定的透析膜對(duì)血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過(guò),在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化學(xué)小分子、核苷酸、某些鹽、低分子量蛋白質(zhì)、氨基酸、細(xì)胞因子、葡萄糖、殘留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何時(shí)呢?由于不可能監(jiān)測(cè)全部小分子,因此常選用葡萄糖為體現(xiàn)。血清中葡萄糖<5mg/dL,即可以停止透析了。透析過(guò)程中,除監(jiān)測(cè)葡萄糖濃度外(可采用葡萄糖氧化酶方法測(cè)定),還需仔細(xì)監(jiān)測(cè)pH值和滲透壓。

選購(gòu)胎牛血清:為了保證胎牛血清產(chǎn)品的均一性和穩(wěn)定性,胎牛血清生產(chǎn)需遵循相關(guān)規(guī)定進(jìn)行操作。一般來(lái)說(shuō),胎牛血清制備需經(jīng)過(guò)以下幾個(gè)步驟:采集,離心,分離,無(wú)菌過(guò)濾,用來(lái)制作血清的牛血,是通過(guò)采集多頭牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品質(zhì)穩(wěn)定的血清,獲得大量健康、符合當(dāng)?shù)胤煞ㄒ?guī)的供體動(dòng)物,是先決條件。采集(5-8月齡牛胚胎)、離心以及粗血清分離的過(guò)程,不能保證完全的無(wú)菌,因此,整個(gè)過(guò)程中,無(wú)菌過(guò)濾就成為重中之重。嚴(yán)格的無(wú)菌過(guò)濾,能夠盡可能祛除細(xì)菌、支原體等微生物的污染,保證胎牛血清品質(zhì)。經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯增多。

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用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:將已存放血漿的試管置入-20~0℃環(huán)境下保存?zhèn)溆?;將血漿分離提取胎牛血清,具體步驟如下:取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫鉀放入容器中,向其中加入300-700mL去離子水,攪拌均勻,使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-20%的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH為7.0-7.3,將上述所收集的血漿倒入容器中,攪拌均勻,溫度設(shè)定為25-38℃,靜置8-20min,得混合液C;22)將上述的混合液C放入離心機(jī)中離心分離8-20min,轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000-10000r/min,取上清液。胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。徐州優(yōu)等胎牛血清

胎牛血清保存條件是在-20°C凍存。蘇州標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清

胎牛血清-血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清在存儲(chǔ)的時(shí)候要在零下濕度的溫度下進(jìn)行保存,并且需要避免陽(yáng)光的照射,需要用恒溫冰箱來(lái)進(jìn)行保存。蘇州標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清

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