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來源: 發(fā)布時間:2024-02-23

羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑,經(jīng)過10mM羥基脲提0min處理的細胞,綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失,因此常被用作EdU實驗的陰性對照。配制好的Click-iTAdditiveSolution請根據(jù)每次用量適當分裝后-20℃保存,避免反復凍融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物質(zhì)析出為正?,F(xiàn)象,請上下顛倒幾次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色,則說明有效成分降解,不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細胞的細胞懸液,以及其他含多種細胞類型的混合細胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細胞的同時,維持白細胞的光散射特性。本試劑盒做動物實驗時可能需要更多的EdU,請根據(jù)實驗需求用合適稀釋液稀釋后使用。EdU細胞增殖檢測試劑盒的基本結構級應用。天津如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買

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細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU細胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復制期間的EdU,借助熒光檢測工具即可準確地檢測出新增殖的細胞,快速統(tǒng)計處于S期的細胞百分數(shù),分析細胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。天津哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商有哪些領域需要使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?

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EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction),其反應原理參見圖1。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細胞DNA標記上生物素等探針。

細胞增殖&細胞計數(shù)檢測細胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎,是生物體的重要生命特征。檢測細胞在培養(yǎng)基或組織中的生長速率,對于細胞生長和分化研究至關重要。在藥物開發(fā)過程中也常被用于評估藥物的毒性和對細胞生長的抑制情況。細胞增殖檢測通常是基于DNA含量或細胞代謝實現(xiàn)的,主要的研究方向為對活細胞的代謝活性的檢測(基于WST、XTT、MTT等)及對DNA合成的檢測(基于BrdU的免疫法或EdU的點擊化學法),可通過體內(nèi)成像、微孔板或流式細胞術檢測等多種技術進行細胞示蹤。使用四唑鹽進行代謝活性檢測通過添加四咪唑鹽到細胞中可進行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測定。EdU細胞增殖檢測試劑盒的價格。

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更準確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,反應單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細胞也能準確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結合,導致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測更靈敏、更準確上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的價格是多少?河北品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

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這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常*適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。天津如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買