山東口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-23

本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細(xì)胞(6孔板)的檢測(cè),可以檢測(cè)50個(gè)樣品,每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為500μl的Click反應(yīng)液;如果用于96孔板檢測(cè),可以檢測(cè)500個(gè)樣品,每個(gè)樣品的檢測(cè)體系為50μl的Click反應(yīng)液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測(cè),分別可以檢測(cè)125、250、350和1250個(gè)樣品,每個(gè)樣品推薦的Click反應(yīng)液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測(cè),可以檢測(cè)125-250個(gè)樣品,每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為100-200μl的Click反應(yīng)液。大包裝C0085L可檢測(cè)樣品的數(shù)量為小包裝C0085S的4倍。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒發(fā)揮的重要作用。山東口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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    EdU細(xì)胞増殖檢測(cè)試劑盒(紅色熒光)使用說(shuō)明產(chǎn)品簡(jiǎn)介細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。試劑盒組分產(chǎn)品編號(hào)試劑濃度試劑量保存條件EdU溶液1000X40ul室溫運(yùn)輸,4℃長(zhǎng)期儲(chǔ)存,勿凍存。江蘇EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么?上海東寰告訴您。

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本試劑盒可以檢測(cè)到細(xì)胞或組織樣品中單個(gè)的增殖細(xì)胞,同時(shí)也可以對(duì)細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測(cè)。本試劑盒可以檢測(cè)培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測(cè)組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過(guò)檢測(cè)DNA合成來(lái)檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法

    按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制:染色反應(yīng)液組分500μl1ml2ml5ml1×反應(yīng)緩沖液430μl860μlmlml催化劑溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA紅色熒光溶液μlμl5μlμl緩沖添加劑50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的檢測(cè)混合液,以覆蓋細(xì)胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘;4、棄染色反應(yīng)液,加入100μlTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;5、棄細(xì)胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色1、將Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5μg/ml的1×Hoechst染色液;2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;3、每孔加入100μlPBS洗細(xì)胞兩次,去掉洗液。圖像獲取及分析建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用時(shí)的注意事項(xiàng)。

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細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法通過(guò)檢測(cè)滲入DNA復(fù)制期間的EdU,借助熒光檢測(cè)工具即可準(zhǔn)確地檢測(cè)出新增殖的細(xì)胞,快速統(tǒng)計(jì)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù),分析細(xì)胞增殖情況。該方法簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè),尤其適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)如今市場(chǎng)的影響。哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒,有哪些好處值得選擇?山東口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性,就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響,因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí),然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織,制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。山東口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒