江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-21

更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測(cè)更靈敏、更準(zhǔn)確EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的重要組成部分。江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書

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    免疫熒光技術(shù)服務(wù)免疫熒光技術(shù)服務(wù)(DH0014)一、服務(wù)介紹免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記,標(biāo)記的抗原或標(biāo)記的抗體與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后,測(cè)定復(fù)合物中的熒光素,這種免疫技術(shù)稱為免疫熒光素技術(shù)。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)分直接法、夾心法、間接法和補(bǔ)體法。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0014-01免疫熒光單標(biāo)記檢測(cè)咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標(biāo)記檢測(cè)咨詢咨詢?nèi)⒖蛻籼峁?、細(xì)胞株或細(xì)胞爬片。注:細(xì)胞爬片不宜太密;2、熒光檢測(cè)所用的抗體3、實(shí)驗(yàn)前,客戶需告知具體的細(xì)胞處理方式及詳細(xì)要求。注:若有特殊處理的樣品,請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。四、服務(wù)流程免疫熒光單標(biāo)記方法免疫熒光單標(biāo)記是指只標(biāo)記一種蛋白質(zhì)分子,方法比較簡(jiǎn)單,只要按照染色步驟去做,通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇,固定液選擇的合適與否,可能會(huì)直接影響染色結(jié)果。具體染色方法如下。1、所需材料與試劑a,培養(yǎng)在蓋玻片或玻璃培養(yǎng)皿中融合程度達(dá)到60%-70%的細(xì)胞。b,一抗、FITC或TRITC標(biāo)記的二抗。c。湖南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?

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為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。

EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些?

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與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)胞增殖情況。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒應(yīng)用再哪些地方?口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商

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    注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)孵育時(shí)間至少2小時(shí),可延長(zhǎng)至24小時(shí)后再檢測(cè)也可以。4、以1×PBS清洗細(xì)胞兩次,每次5分鐘,以除去未摻入RNA的EU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透1、每孔加入150μl細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;注:1)該試劑盒配備了細(xì)胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進(jìn)行細(xì)胞固定;2)如果使用其他的細(xì)胞固定劑建議用DEPC水來配置,避免RNA酶降解細(xì)胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘;3、棄甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;4、每孔加入300μlTritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;EU染色1、通過用10:1去離子水稀釋10×反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1×EU反應(yīng)緩沖液;2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請(qǐng)旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換。江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書