江西咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

EdU法細胞增殖成像分析試劑盒的功能和實驗建議中文名稱細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光)貨號KTA2030規(guī)格￥500/50T背景資料：細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗藥物效果的基礎(chǔ)實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是Brdu方法的性突破。EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。實驗建議細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光)，是BrdU方法的**性突破試劑盒組分：EdU(10mM)、AbFluor488疊氮化物EdU細胞增殖檢測試劑盒的原理是什么？上海東寰告訴您。江西咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液；(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報廢或更換。(c)按照以下的表格進行染色反應(yīng)液的配制：該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測。湖北咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好使用EdU細胞增殖檢測試劑盒前的安全檢查。

EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內(nèi)更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調(diào)：“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同，EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成，且不需要進行嚴格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行?！奔毎鲋硻z測方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結(jié)合準確檢測新合成的DNA，簡單，快速，準確。這種檢測方法非常快速，且只需簡單的幾個步驟，因此也適用于高通量篩選試驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細胞的活力

    避免反復(fù)凍融。如短時間內(nèi)需多次重復(fù)使用，請于4℃避光保存，有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻片2、1×PBS（）（用DEPC水配置）3、含TritonX-100的PBS（用DEPC水配置）4、甘氨酸溶液(2mg/ml)（用DEPC水配置）5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應(yīng)液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板，HK2貼壁細胞為例)細胞培養(yǎng)取對數(shù)生長期細胞，以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中，培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標記1、將細胞完全培養(yǎng)基中按照500：1的比例加入EU溶液，制成2×EU標記培養(yǎng)基；2、提前將2×EU標記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中，獲得1×EU溶液，其中EU的終濃度為500μM；注：1）我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2）配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細胞為宜；3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細胞2小時，棄培養(yǎng)基。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家便宜？上海東寰告訴您。

細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式：真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式，有有絲分裂，無絲分裂，減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、等一切真核生物中的一種*為普遍的分裂方式，是真核細胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細胞形成時的一種特殊的有絲分裂。多細胞生物，以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的細胞，用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細胞~EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用？福建品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng)，新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針所標記，從而可以使用適當?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細胞DNA標記上生物素等探針。江西咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理