河南EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)

以及酶或熒光偶聯(lián)二抗，檢測(cè)單細(xì)胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通過(guò)免疫熒光檢測(cè)，后者通過(guò)熒光顯微鏡檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)是：使用核酸酶變性DNA，在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記，且可同時(shí)使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)，操作安全簡(jiǎn)便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞，冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測(cè)法不同，EdU-Click檢測(cè)，如EdU-Click594（BCK-EDU594）無(wú)需進(jìn)行DNA變性來(lái)檢測(cè)摻入的EdU，而是通過(guò)一次快速、高度特異性的點(diǎn)擊反應(yīng)，將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過(guò)EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測(cè)DNA復(fù)制活性，從而確地反映細(xì)胞的增殖情況。這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)方案，準(zhǔn)確且兼容各種抗體實(shí)驗(yàn)方案，整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在30分鐘內(nèi)完成，在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面，堪比多重分析方法。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好？上海東寰告訴您！河南EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide)，無(wú)需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測(cè)快速。相對(duì)于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測(cè)新合成的DNA，所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細(xì)胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果參見(jiàn)圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果圖。無(wú)EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時(shí)組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時(shí)后，棕色染色減弱，說(shuō)明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。浙江品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用時(shí)要考慮什么問(wèn)題？

EdU與T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。

    MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一種非常經(jīng)典的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒，被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下，可以被完全溶解(圖1B)。然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度(圖2)。細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒實(shí)測(cè)效果圖。，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4小時(shí)，顯微鏡下可見(jiàn)大量結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan生成。B.不同數(shù)量HeLa細(xì)胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小時(shí)的效果圖(上圖)及深紫色產(chǎn)物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent)，充分溶解后的效果圖(下圖)。 EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用時(shí)的注意事項(xiàng)。

通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家便宜？上海東寰告訴您。福建咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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