湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

    MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一種非常經(jīng)典的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測試劑盒，被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下，可以被完全溶解(圖1B)。然后通過酶標(biāo)儀可以測定570nm波長附近的吸光度(圖2)。細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒實(shí)測效果圖。，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4小時(shí)，顯微鏡下可見大量結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan生成。B.不同數(shù)量HeLa細(xì)胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小時(shí)的效果圖(上圖)及深紫色產(chǎn)物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent)，充分溶解后的效果圖(下圖)。 上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用方式。湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA，所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細(xì)胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時(shí)組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時(shí)后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價(jià)格EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的結(jié)構(gòu)如何組成？

EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等）即可有效檢測，可有效避免樣品損傷，在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液；(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準(zhǔn)確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報(bào)廢或更換

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒？

    Jurkat細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列)，或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時(shí)后染色，然后通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。從流式結(jié)果圖中可以看出，EdU標(biāo)記的細(xì)胞有較高比例的綠色熒光陽性細(xì)胞，呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽性(強(qiáng)染色)的兩個(gè)峰，分別對應(yīng)于未增殖細(xì)胞和增殖細(xì)胞。經(jīng)過Hydroxyurea處理的細(xì)胞，綠色熒光陽性的細(xì)胞幾乎完全消失，剩下一個(gè)綠色熒光陰性的峰。Hela細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列)，或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時(shí)后染色（步驟染Hoechst，方便觀察增殖細(xì)胞比例），然后通過熒光顯微鏡進(jìn)行檢測。鏡下可見，*EdU標(biāo)記的細(xì)胞有一部分染上綠色熒光的增殖細(xì)胞，未增殖細(xì)胞的細(xì)胞核呈藍(lán)色單染。 EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時(shí)要考慮什么問題？北京哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

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EdU法中的點(diǎn)擊反應(yīng)原理圖。摻入到細(xì)胞DNA中的EdU與熒光探針或生物素等標(biāo)記的疊氮化物，在銅離子的催化下發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，使細(xì)胞DNA標(biāo)記上熒光探針或生物素。細(xì)胞增殖檢測是評估細(xì)胞活性、遺傳毒性及抗藥物效果等的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。細(xì)胞增殖檢測的方法按照原理通?？梢苑譃槲孱悾耗p傷檢測、代謝活性檢測、ATP水平測定、DNA合成檢測和細(xì)胞熒光標(biāo)記檢測法。目前公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書