湖南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

來源: 發(fā)布時間:2023-12-01

    搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應(yīng)液組分500ul1ml2ml5mlIX反應(yīng)緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測混合液,以覆蓋細(xì)胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應(yīng)液,加入300ulTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;(f)棄細(xì)胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗細(xì)胞兩次,去掉洗液。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒應(yīng)用再哪些地方?湖南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

湖南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好,EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換。湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。

湖南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好,EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性~

    4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃預(yù)冷20min)。d,封閉液。e,/LPBS緩沖液。2、染色方法a,取出培養(yǎng)有細(xì)胞的蓋玻片,用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛試問固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min,PBS洗兩次,5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室溫封閉30min-1h。e.去封閉液,直接加入一抗,37℃孵育1h或4℃過夜??贵w以mo/LPBS稀釋(理想的抗體濃度需經(jīng)試驗而定)。,10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗,37℃,孵育1h。,10min/次,用濾紙吸干。(PBS配制)封片。j.免疫熒光顯微鏡下觀察,或于4℃避光保存。免疫熒光雙標(biāo)記方法免疫熒光的雙標(biāo)記是指同時標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)兩種蛋白質(zhì)分子,當(dāng)懷疑某種配體與已知受體結(jié)合后可用此方法加以證明。此方法稍微復(fù)雜一些,應(yīng)注意所用的一抗是來自不同種屬動物的兩種特異性抗體(例如:A抗體為多克隆抗體,來自家兔;B抗體為單克隆抗體,來自小鼠)。其次,兩種二抗所帶熒光素的發(fā)射光不應(yīng)重疊,且盡量遠(yuǎn)離,通常可以選擇FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5,或Cy3和Cy5等來組合。通常情況下,染色時兩種一抗可以同時孵育,然后可以同時孵育兩種二抗。但當(dāng)染色結(jié)果一種顏色非常弱,而另一種顏色比較強(qiáng)時,應(yīng)考慮先孵育顏色較弱的二抗。上海EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的價格是多少?

湖南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好,EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。浙江口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?湖南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實驗難題。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。湖南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好