浙江正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

來源: 發(fā)布時間:2023-11-27

    EU新生RNA檢測試劑產(chǎn)品簡介細胞內(nèi)新生RNA的變化是評價細胞活性的重要指標。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一種尿嘧啶核苷類似物,能夠在細胞RNA轉(zhuǎn)錄時期代替尿嘧啶(U)摻入新合成的RNA分子中,然后通過基于EU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標記到新合成的含有EU的RNA分子中,這樣就可以進行較快的的熒光檢測RNA的轉(zhuǎn)錄活性。本試劑盒將直接測定細胞內(nèi)新生RNA的變化。傳統(tǒng)的檢測新生RNA的方法為以放射性同位素標記RNA等方法然后進行Southernblot進行檢測。但是這種方法需要放射性同位素標記及后續(xù)的復(fù)雜操作步驟。利用EU標記新生RNA的檢測方法不需要劇烈的RNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、RNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加便捷、靈敏和準確,能在細胞水**映新生RNA轉(zhuǎn)錄活性的狀況。該試劑只需要簡單的操作步驟,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡以及高內(nèi)涵篩選儀進行新生RNA的轉(zhuǎn)錄活性。試劑組分產(chǎn)品編號試劑濃度試劑量C01901EU溶液1000×40μl細胞固定液1×15ml反應(yīng)緩沖液10×1ml催化劑溶液25×400μlTAMRA紅色熒光溶液400×25μl緩沖添加劑粉末200mgHoechst×20μl運輸及保存方式藍冰運輸。-20℃避光長期保存。上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。浙江正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。浙江EdU細胞增殖檢測試劑盒購買EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?上海東寰告訴您。

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細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。

EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換。(c)按照以下的表格進行染色反應(yīng)液的配制:該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測。EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。

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使用本試劑盒所做結(jié)果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測,也可以用于高內(nèi)涵篩選(High-Content Screening, HCS)。對6孔板培養(yǎng)的細胞(每孔500μl的Click反應(yīng)液)、96孔板培養(yǎng)的細胞(每孔50μl的Click反應(yīng)液)、每管細胞數(shù)量為10-100萬的流式細胞儀檢測(每管500μl的Click反應(yīng)液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(每個樣品100-200μl的Click反應(yīng)液),不同規(guī)格的本產(chǎn)品可以提供的反應(yīng)的量詳見說明書中的表。光譜特性:488-Azide:綠色熒光,Ex/Em=491/518nm;Hoechst 33342:藍色熒光,Ex/Em=346/460nm, bound to DNA。EdU細胞增殖檢測試劑盒應(yīng)用再哪些地方?浙江EdU細胞增殖檢測試劑盒購買

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