江蘇肺病疾病動物模型建模

1、動物模型名稱：固定制動致制動應(yīng)激大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動物體重：180~220g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級。1、實(shí)驗(yàn)方法：采用固定制動方法。大鼠每天固定5~6小時(shí)進(jìn)行制動應(yīng)激，連續(xù)制動40天。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢；曠場試驗(yàn)的結(jié)果顯示，造模結(jié)束時(shí)與正常對照組比較，模型組大鼠的水平穿越格數(shù)、垂直運(yùn)動次數(shù)、理毛時(shí)間均減少，**格停留時(shí)間、糞便粒數(shù)均增加；ELISA的結(jié)果顯示，造模結(jié)束時(shí)與正常對照組比較，模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。江蘇肺病疾病動物模型建模

具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型，將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說，構(gòu)建一個(gè)cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒，將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法，具體按照以下步驟具體實(shí)施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank：))序列，利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計(jì)grna靶序列，并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因，采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點(diǎn)：**終選取兩個(gè)grna，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如：seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)；步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆，通過pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂，采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體，通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗(yàn)證，圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。南京阿爾茲海默癥疾病動物模型建模收集研究疾病的生物學(xué)信息資料。

2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升，同樣，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖3所示。表3表4②體重變化：(mean±sd)，如圖4所示：2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第4天開始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比，大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量：如表5、圖5所示，2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組，都有不同程度縮減，其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p＜)，4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片)：3mg組動物死亡時(shí)間早，無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個(gè)階段，動情前期：撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù)，白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動情期：角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù)，由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動情后期：片狀角化上皮細(xì)胞，有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有，無太大差異(圖c)。動情間期：白細(xì)胞占絕大多數(shù)，有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。表6⑤病理結(jié)果：如圖7所示

葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型：1、動物模型名稱：葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：BALB/c小鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：成年鼠5、實(shí)驗(yàn)動物體重：18g-22g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水24h，24小時(shí)后提起鼠尾將其懸空，使掙扎以排出大腸遠(yuǎn)端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉（DSS）溶液，連續(xù)14天。進(jìn)行疾病活動指數(shù)(DAI)的評估、取結(jié)腸進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：DAI評分明顯升高，與對照組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)腸病理鏡檢可見結(jié)腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變.上海東寰為您提供完善的大鼠動物疾病模型。

疾病動物模型和人類的關(guān)系科學(xué)研究是探索未知，實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果往往會出乎意外，不受人為的控制，所以關(guān)乎人類本身的研究，在人體上進(jìn)行試驗(yàn)，風(fēng)險(xiǎn)很大；對一些數(shù)量很少的珍稀動物，或一些因體型龐大，不易實(shí)施操作的種類，往往用取材容易，操作簡便的另一種動物來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，代替人類或原來的目標(biāo)動物，這就是動物實(shí)驗(yàn)。為了保證這些動物實(shí)驗(yàn)更科學(xué)、準(zhǔn)確和重復(fù)性好，用各種方法把一些需要研究的生理或病理活動相對穩(wěn)定地顯現(xiàn)在標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動物身上，供實(shí)驗(yàn)研究之用。這就稱之為動物實(shí)驗(yàn)中的動物模型。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證。上海疾病動物模型建模廠家

可以簡化實(shí)驗(yàn)操作和樣品收集。江蘇肺病疾病動物模型建模

通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交，可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點(diǎn)的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖；圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖；圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖；圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗(yàn)證pirb基因敲入效果的測序峰圖；圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的方法示意圖；圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的結(jié)果圖。江蘇肺病疾病動物模型建模