松江區(qū)泌尿疾病動物模型建模

球囊拉傷致高脂血癥動脈硬化兔模型，實驗動物種屬：新西蘭兔，實驗動物環(huán)境：SPF級 1、實驗方法：用球囊拉傷誘導法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉，經(jīng)右股淺動脈，將3.5F球囊擴張導管插至腹主動脈20cm，球囊充液膨脹至2個大氣壓緩慢拉出，反復3次。球囊拉傷手術后，動物喂以高脂飼料，連續(xù)9周，每天給料兩次，自由飲水。實驗結束后取腹主動脈斑塊進行組織病理學檢查。2、檢測標準：腹主動脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。松江區(qū)泌尿疾病動物模型建模

    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡，平均體重20g)，46h后注射hcg，與雄性小鼠合籠交配，次日取受精卵進行顯微注射，將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi)，產(chǎn)出小鼠，即f0代小鼠。上述步驟中grna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl，cas9蛋白購自newenglandbiolabs，貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna，pcr擴增產(chǎn)物測序，鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下：pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應的擴增產(chǎn)物大小為，primers2對應的擴增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測序的引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。普陀區(qū)提供疾病動物模型建模動物模型的意義和優(yōu)越性！

    本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地，該模型用于與磁性相關的***和/或檢測方面的研究，比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔，模擬腰椎間盤突出后突出物對神經(jīng)根的持續(xù)慢性的機械壓迫癥狀，有益效果有：1.應用機械壓迫神經(jīng)根模擬腰椎間盤突出病理，癥狀的病因學與臨床情況接近；2.相關的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀，且易于客觀測量；3.制備方法簡單，對動物損傷小，穩(wěn)定性好，成功率高；4.造模關鍵材料壓迫元件不受磁場干擾，無在磁場作用下移位風險，有利于后續(xù)對動物進行磁療，經(jīng)顱磁刺激等***及核磁共振等檢查；5.造模關鍵材料壓迫元件不影響磁場，不會對***儀器和核磁共振等儀器產(chǎn)生不良影響；6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件，使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制，豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學檢測，為臨床研究提供理論依據(jù)。以下將結合附圖對本發(fā)明作進一步說明，以充分說明本發(fā)明的目的、技術特征和技術效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。

    建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義?，F(xiàn)有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足，或與臨床實際病變部位有一定差距，如慢性坐骨神經(jīng)結扎模型；或操作難度大，對動物損傷重，如自體髓核移植模型，選擇性神經(jīng)根結扎模型。因此，急需一種新的操作簡單，重復率高，穩(wěn)定且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型。技術實現(xiàn)要素：為了建立一種操作簡單，穩(wěn)定好且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型，本發(fā)明提供了一種大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟：步驟一、麻醉大鼠；步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側或右側作縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌，暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔；步驟三、將壓迫元件插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中，得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。其中，步驟一具體為：腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后，將大鼠背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動物手術臺上，鋪無菌巾。在一個具體實施方式中，壓迫元件為l型棒；步驟三具體為：將2根l型棒的***端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中，l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。能夠準確模擬人相關特定功能與疾病特征。

    f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下：primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標片段大小如下：5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步驟c、采用限制性內(nèi)切酶bamhi和avrii對dna進行切割；瓊脂糖凝膠電泳分離dna；步驟d、將dna轉到尼龍膜上；步驟e、探針變性后，與dna分子進行雜交，nbt/bcip化學顯色法顯色，拍照觀察。southern雜交結果如圖6所示，可以看到：6、8、9號pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割，在，wt小鼠只在，如果被avrii切割，pirb基因敲除小鼠在，wt小鼠只在。步驟6、將f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子pirb基因敲入小鼠，即為本發(fā)明所述小鼠pirb基因敲入的動物模型。將本發(fā)明獲得的動物模型f2代純合子小鼠與同品系小鼠組織/細胞特異性cre表達的小鼠雜交，獲得f3代小鼠，可以實現(xiàn)在不同組織或者細胞類型中敲入pirb基因。對f3代小鼠進行基因型的鑒定：含有無(pirb-cwt)、一個(pirb-chet)或者兩個。利用動物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時一些不易見到不便于在病人身上進行實驗的人類疾病的研究。靜安區(qū)哪一家疾病動物模型建模

動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面！松江區(qū)泌尿疾病動物模型建模

葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結腸炎小鼠模型：1、動物模型名稱：葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結腸炎小鼠模型2、實驗動物種屬：BALB/c小鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：成年鼠5、實驗動物體重：18g-22g6、實驗動物環(huán)境：SPF級 1、實驗方法：實驗前小鼠禁食不禁水24h，24小時后提起鼠尾將其懸空，使掙扎以排出大腸遠端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉（DSS）溶液，連續(xù)14天。進行疾病活動指數(shù)(DAI)的評估、取結腸進行組織病理學檢查。2、檢測標準：DAI評分明顯升高，與對照組比較具統(tǒng)計學意義。結腸病理鏡檢可見結腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變松江區(qū)泌尿疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司位于上海市嘉定區(qū)興賢路1180號5幢2樓206室，交通便利，環(huán)境優(yōu)美，是一家服務型企業(yè)。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務，是一家有限責任公司企業(yè)。公司擁有專業(yè)的技術團隊，具有原代細胞，細胞增殖與凋亡，細胞檢測試劑盒，動物疾病模型等多項業(yè)務。上海東寰生物以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務的理念，打造高指標的服務，引導行業(yè)的發(fā)展。