浦東新區(qū)疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2023-09-06

動物模型編輯添加義項名B添加義項?所屬類別:經(jīng)濟理論動物疾病模型主要用于實驗生理學、實驗病理學和實驗學(包括新藥篩選)研究。人類疾病的發(fā)展十分復雜,以人本身作為實驗對象來深入探討疾病發(fā)生機制,推動醫(yī)藥學的發(fā)展來之緩慢,臨床積累的經(jīng)驗不僅在時間和空間上都存在局限性,而且許多實驗在道義上和方法上也受到限制。而借助于動物模型的間接研究,可以有意識地改變那些在自然條件下不可能或不易排除的因素,以便更準確地觀察模型的實驗結果并與人類疾病進行比較研究,有助于更方便、更有效地認識人類疾病的發(fā)展規(guī)律可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性。浦東新區(qū)疾病動物模型建模

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r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進行pcr鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉基因已經(jīng)整合到生殖細胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進行基因型的鑒定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復步驟g一次。江蘇正規(guī)疾病動物模型建模可根據(jù)要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。

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實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據(jù)體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時,取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深II°燙傷。2、檢測標準:a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細胞明顯腫脹、變性,層次結構尚清楚,細胞核結構不清;致傷10s大鼠表皮細胞部分脫落,結構不清,明顯變性、壞死,部分細胞已溶解

cns,pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。實驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。

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1、動物模型名稱:二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:6~8周齡5、實驗動物體重:80~100g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:二甲基苯并蒽(DMBA)誘導。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測標準:模型組大鼠第5對乳房直徑在各測定時間點與正常對照組比較有***性差異;大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化,乳腺導管上皮細胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生,并逐漸加重,在第9周時可見同一大鼠的多個乳腺出現(xiàn)不同程度的導管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現(xiàn)>3mm的乳腺*,至第24周時70%的大鼠發(fā)生乳腺*,并可見一只大鼠同時發(fā)生多個乳腺*,而同一大鼠的其他乳腺亦呈現(xiàn)出不同程度的上皮細胞增生和不典型增生,提示處于*發(fā)生的不同進展階段。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗證。江蘇正規(guī)疾病動物模型建模

生物醫(yī)學研究的進展常常依賴于使用動物模型作為實驗假說和臨床假說二者的試驗基礎。浦東新區(qū)疾病動物模型建模

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