江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒直接測定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測的準(zhǔn)確方法之一開發(fā)的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU（ 5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷），在細(xì)胞增殖時EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，利用EdU與染料之間的點擊化學(xué)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比(圖1)，更簡單，更快速，更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和，我們提供的一系列Andy Fluor? 染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇，也可以用于培養(yǎng)細(xì)胞分析及組織切片分析EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的原理是什么？上海東寰告訴您。江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

上海東寰活細(xì)胞能將四咪唑鹽（如MTT、XTT、WST-1）還原成有色的甲瓚或甲瓚鹽（Formazan），可通過分光光度計或酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測。CellCountingKit–8（96992）和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比?；贑CK-8（WST-8）的試劑盒能高度準(zhǔn)確地檢測細(xì)胞增殖，比MTT法及XTT法的靈敏度高5倍，能檢測更低的細(xì)胞數(shù)目。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞。江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價上海東寰告訴您使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的便捷性。

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。

細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長和分化研究的關(guān)鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評估化學(xué)藥物的毒性和對細(xì)胞生長的控制作用。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段，各個子代細(xì)胞會從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析，即可測定出自標(biāo)記結(jié)合起，單個細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測，此類分析可以報告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目，或者測定出單個細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性，熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后，將會共價結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上，從而使染料能夠長時間停留在細(xì)胞中。上海東寰告訴您什么是EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒？

EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào)：“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同，EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成，且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行。”細(xì)胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA，簡單，快速，準(zhǔn)確。這種檢測方法非?？焖?，且只需簡單的幾個步驟，因此也適用于高通量篩選試驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞的活力。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的重要性。哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

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這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點擊實驗方案，準(zhǔn)確且兼容各種抗體實驗方案，整個實驗可在30分鐘內(nèi)完成，在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面，堪比多重分析方法。此外，該方法適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或組織切片，可用流式細(xì)胞術(shù)分析檢測EdU Flow Cytometry Kit 594（BCK-FC594-100）；可進(jìn)行HCS分析或進(jìn)行細(xì)胞裂解液微孔板檢測EdU HTS Kit 594（BCK-HTS594-20）；也可適用于培養(yǎng)中的細(xì)胞，或通過注射方法進(jìn)行實驗的小動物樣本，進(jìn)行體內(nèi)成像分析In Vivo EdU Click Kit 594(BCK594-IV-IM-M)、流式細(xì)胞檢測或HCS高通量檢測。(共有488、555、594、647四種熒光染料可選）。江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

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