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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-10

細(xì)胞增殖是評價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU細(xì)胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復(fù)制期間的EdU,借助熒光檢測工具即可準(zhǔn)確地檢測出新增殖的細(xì)胞,快速統(tǒng)計(jì)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù),分析細(xì)胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測,尤其適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒給社會(huì)帶來了什么好處?上海哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買

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細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處有哪些?

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EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。

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EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換。上海EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。安徽品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

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建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。上海哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買

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