閔行區(qū)咨詢疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱：膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：200~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法：用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，腹部皮膚消毒，無(wú)菌操作沿腹部正中線剪開(kāi)腹腔，分離出膽管，在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分：0分：無(wú)明顯病變；1分：呈局灶性分布，受累面積在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面積在30%-70%之間者；3分：呈彌漫性分布，受累面積在70%以上者。統(tǒng)計(jì)分析：每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個(gè)視野（共1.5mm2）進(jìn)行觀察，測(cè)定并計(jì)算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。小鼠是人類疾病理想的動(dòng)物模型不僅因?yàn)樾∈笤谏砩吓c人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。閔行區(qū)咨詢疾病動(dòng)物模型建模

    可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等，若無(wú)特別說(shuō)明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等，可通過(guò)正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)方法等，若無(wú)特別說(shuō)明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)方法等。實(shí)施例1：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成2mg/kg順鉑注射液，按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例2：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實(shí)施例4：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中。松江區(qū)哪一家疾病動(dòng)物模型建模模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用，容易復(fù)制，實(shí)驗(yàn)中便于操作和采集各種標(biāo)本。

    pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特異性組織或細(xì)胞中。其中pirb-cwt小鼠表達(dá)cre，但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表達(dá)cre并分別含有一個(gè)或者兩個(gè)loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過(guò)加入另一對(duì)引物，用pcr來(lái)驗(yàn)證：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的樣本不夠純，或者pcr的延伸時(shí)間不夠長(zhǎng)，可能擴(kuò)增不出來(lái)1180bp的產(chǎn)物。cre陽(yáng)性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學(xué)院pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。

    另外pirb在髓細(xì)胞和b細(xì)胞的表達(dá)隨細(xì)胞分化和***增加。在免疫系統(tǒng)，pirb作為主要組織相容性復(fù)合物1(classimajorhistocompatibilitycomplex，mhc1)的受體，***參與免疫調(diào)節(jié)，包括中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞整合素通路、細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞***、b淋巴細(xì)胞***和體液—細(xì)胞免疫應(yīng)答等。pirb的前兩個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)mhci和pirb的結(jié)合。在***系統(tǒng)(centralnervoussystem，cns)，pirb在許多腦區(qū)包括皮層、海馬、小腦和嗅球都有表達(dá)，但在成年脊髓不表達(dá)。在細(xì)胞層面，pirb不僅表達(dá)于神經(jīng)元，也表達(dá)于星形膠質(zhì)細(xì)胞。在許多病理?xiàng)l件下，如腦外傷、中風(fēng)和cns***，pirb的mrna和蛋白表達(dá)水平***增加。在cns，pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受體，參與神經(jīng)元突起芽發(fā)和生長(zhǎng)錐塌陷，抑制神經(jīng)元軸突再生和突觸可塑性。pirb的細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d3-d6)介導(dǎo)了pirb與nogoa的結(jié)合。近年來(lái)關(guān)于阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease，ad)研究還發(fā)現(xiàn)，pirb是aβ42寡聚體的高親和力受體，親和力達(dá)到納摩爾水平。pirb的前兩個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)了aβ42寡聚體和pirb的相互作用，導(dǎo)致絲切蛋白(cofilin)信號(hào)通路****組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)。如何定義好的小鼠疾病模型？

1、動(dòng)物模型名稱：腹主動(dòng)脈縮窄致心衰大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法：采用主動(dòng)脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后，仰臥位固定、去腹毛、消毒，沿腹正中線切開(kāi)皮膚及肌層，分離出腹主動(dòng)脈，在腎動(dòng)脈上方將腹主動(dòng)脈與鈍頭8號(hào)探針一起結(jié)扎后，小心抽出針頭。手術(shù)造模后大鼠正常飼養(yǎng)3個(gè)月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計(jì)算心體比(VW/BW),并進(jìn)行心功能檢測(cè),包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對(duì)心肌組織進(jìn)行病理學(xué)檢測(cè).2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠VW/BW明顯增加，LVSP明顯降低，LVEDP明顯升高，±dp/dtmax則***減小，與正常對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明心肌出現(xiàn)典型心衰樣病理改變。動(dòng)物疾病模型廣泛應(yīng)用于新藥靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)及篩選。浦東新區(qū)視覺(jué)疾病動(dòng)物模型建模

構(gòu)建人源移植瘤模型需要合適的免疫缺陷小鼠想知道如何選擇？閔行區(qū)咨詢疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱：酒精誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：150g-160g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法：用酒精誘導(dǎo)法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物（酒精：吡唑：玉米油＝10mL：25mg：2mL）造模，每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油＝1：3，連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：肝組織可見(jiàn)肝硬化病理改變（S1級(jí)~S4級(jí)）。閔行區(qū)咨詢疾病動(dòng)物模型建模

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