浙江高通量篩選分析

然而傳統(tǒng)的針對(duì)單一靶點(diǎn)的研究方法已經(jīng)難以適應(yīng)一些多基因疾病和病毒等相關(guān)藥物的研究。而基于細(xì)胞水平的高內(nèi)涵篩選(high content screening, HCS)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)化合物多靶點(diǎn)多參數(shù)的同時(shí)檢測(cè)，從疾病相關(guān)基因調(diào)控通路和網(wǎng)絡(luò)水平上研究藥物的作用機(jī)制、代謝途徑和潛在毒性等，也使在細(xì)胞水平評(píng)價(jià)活性化合物的成成為可能。從篩選載體上看，HCS和HTS并沒(méi)有的區(qū)別，它的檢測(cè)體積并未因檢測(cè)指標(biāo)增加而增高，操作步驟同樣簡(jiǎn)單可行、可自動(dòng)化。故HCS在新藥研發(fā)中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。組合化學(xué)高通量篩選。浙江高通量篩選分析

蛋白質(zhì)片段互補(bǔ)分析(PCA，也稱(chēng)為雙分子熒光互補(bǔ))和雙雜交篩選允許檢測(cè)細(xì)胞中蛋白質(zhì)相互作用的形成/抑制。PCA將單個(gè)檢測(cè)蛋白（熒光素酶、GFP、GAL）分成兩部分，這些部分與感興趣的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用融合；如果伴侶結(jié)合，檢測(cè)蛋白會(huì)重新形成并檢測(cè)到信號(hào)。高內(nèi)涵成像平臺(tái)（HCS）由于其能夠提供出色的單細(xì)胞分析功能和短的數(shù)據(jù)采集時(shí)間獲得大家的青睞。一般的實(shí)驗(yàn)流程為設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并使用自動(dòng)分液儀將細(xì)胞接種到96、384或1536孔板中；然后加入化合物，由于細(xì)胞在孵育過(guò)程中會(huì)對(duì)化合物做出反應(yīng)，隨后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，并通過(guò)HCS成像系統(tǒng)獲取圖像，通過(guò)軟件分析獲取的圖像以確定化合物的劑量反應(yīng)。山東小分子高通量篩選高通量篩選的常見(jiàn)問(wèn)題。

由于高通量篩選（HTS）具有微量、快速、靈敏和準(zhǔn)確等特點(diǎn)，從二十世紀(jì)九十年代開(kāi)始，海外各大藥企已經(jīng)開(kāi)始積累擴(kuò)大化合物庫(kù)和使用HTS技術(shù)來(lái)支持新藥研發(fā)。隨著用于HTS的操作設(shè)備和檢測(cè)儀器的發(fā)展，自動(dòng)化控制和計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)分析軟件的開(kāi)發(fā)，HTS的效率和結(jié)果的準(zhǔn)確性得到了提高。由于HTS使用了數(shù)量龐大的樣品庫(kù)，實(shí)現(xiàn)了藥物篩選的規(guī)?；岣吡诵滤幬锇l(fā)現(xiàn)的幾率和質(zhì)量。然而傳統(tǒng)的針對(duì)單一靶點(diǎn)的研究方法已經(jīng)難以適應(yīng)一些多基因疾病和病毒等相關(guān)藥物的研究。

作者通過(guò)對(duì)酶抑制劑的高通量篩選的總結(jié)，揭示了當(dāng)下的新藥發(fā)展的病癥主要圍繞、細(xì)菌和病毒，研究靶標(biāo)也以激酶、磷酸化酶、肽酶等為主要的研究點(diǎn)。作為當(dāng)下主流的Assay方法，基于熒光的Assay在新藥發(fā)現(xiàn)中起到非常重要的作用。作者還通過(guò)對(duì)73個(gè)苗頭化合物到先導(dǎo)化合物的優(yōu)化和結(jié)構(gòu)改性案例分析，印證了類(lèi)藥五原則的重要指導(dǎo)意義，也提煉了特殊環(huán)系在新藥發(fā)現(xiàn)中的重要作用。另外，也總結(jié)了影響苗頭化合物檢出率的其他重要因素，包括Z因子、化合物庫(kù)質(zhì)量、假陽(yáng)性化合物的甄別以及選取合適的Assay檢出方法。這對(duì)藥物篩選和后期優(yōu)化，具有非常大的指導(dǎo)意義。高通量篩選技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)。

高通量篩選技術(shù)，是目前藥物篩選領(lǐng)域研究的重要課題，近年來(lái)，對(duì)它的研究應(yīng)用雖然已取得了長(zhǎng)足的發(fā)展，但仍然存在許多難題，如體外模型的篩選結(jié)果與整體藥理作用的關(guān)系；對(duì)高通量篩選模型的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)以及新的藥物作用靶點(diǎn)的研究和發(fā)現(xiàn)等。隨著醫(yī)藥學(xué)的進(jìn)步，高通量篩選技術(shù)在創(chuàng)新藥物的研發(fā)中，一定會(huì)開(kāi)拓出更廣闊的空間。多學(xué)科理論和技術(shù)的結(jié)合 在高通量篩選過(guò)程中，不僅應(yīng)用了普通的藥理學(xué)技術(shù)和理論，而且與藥物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、數(shù)學(xué)、微生物學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等多學(xué)科緊密結(jié)合。這種多學(xué)科的有機(jī)結(jié)合，在藥物篩選領(lǐng)域產(chǎn)生大量新的課題和發(fā)展機(jī)會(huì)，促進(jìn)了藥物篩選理論和技術(shù)的發(fā)展。高通量篩選的實(shí)驗(yàn)方案。浙江高通量篩選分析

高內(nèi)涵高通量篩選系統(tǒng)。浙江高通量篩選分析

在1985年之前，先導(dǎo)物的篩選主要是通過(guò)人工進(jìn)行的，每周處理的樣本數(shù)量不過(guò)幾百個(gè)，組合化學(xué)的出現(xiàn)使得科學(xué)家們獲取化合物的方式發(fā)生了變化，他們可以在短時(shí)間內(nèi)合成大量化合物。更重要的是，隨著分子生物學(xué)和功能基因組的研究發(fā)展，使得新穎靶標(biāo)大量增加，這種情況下，緩慢的人工篩選已經(jīng)沒(méi)有辦法滿足新藥研發(fā)的要求，高通量篩選技術(shù)的出現(xiàn)縮短了先導(dǎo)物開(kāi)發(fā)在藥物發(fā)現(xiàn)中的時(shí)間。如今，一個(gè)普通的藥學(xué)高通量篩選實(shí)驗(yàn)室每天篩選的靶標(biāo)已經(jīng)超過(guò)10萬(wàn)個(gè)。浙江高通量篩選分析

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