湖北全自動分裝機

來源: 發(fā)布時間:2022-11-08

倒平板:滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻到50℃左右后,倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。培養(yǎng)基的溫度不能過高,否則容易在培養(yǎng)皿的內(nèi)蓋上形成太多的冷凝水;溫度太低,培養(yǎng)基又容易凝固成塊,無法制成平板。倒平板時,應(yīng)在靠近酒精燈火焰進行,以免外界的雜菌落入平板內(nèi),左手拿培養(yǎng)皿,右手拿三角瓶的底部,用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下,灼燒瓶口,用大拇指和食指把培養(yǎng)皿蓋打開一條縫,至瓶口剛好伸入,倒入培養(yǎng)基,以鋪滿底為限,不超過培養(yǎng)皿高度的三分之一,迅速蓋好蓋,放在桌面上,輕輕地轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基分布均勻,冷凝后即可。全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):兩個存儲器;存儲器高度可選。湖北全自動分裝機

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培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。湖北全自動分裝機分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。

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配制好的培養(yǎng)基保存:滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度,避免長時間保存在滅菌鍋內(nèi),造成過度滅菌,影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。所配制的培養(yǎng)基的量,應(yīng)該是在較長保存期限內(nèi)正好使用完。含染料的培養(yǎng)基應(yīng)閉光保存;倒好的瓊脂平板如果配制的當(dāng)天未使用完,應(yīng)于冷藏保存,如果保存時間超過2天,應(yīng)將其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養(yǎng)基如果保存時間超過2個星期,應(yīng)將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發(fā)。

培養(yǎng)基防止污染應(yīng)該注意以下事項:確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、病菌及支原體無菌試驗來確認(rèn)并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個月進行驗證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應(yīng)在除菌后進行一次)。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開,并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負(fù)壓,防止病毒對培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染。液體培養(yǎng)基在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。

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培養(yǎng)基的配制:分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4~5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4ml,約試管的1/5高度。包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面:滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。湖北全自動分裝機

液體培養(yǎng)基具有進行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點。湖北全自動分裝機

培養(yǎng)基的種類:培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、病菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。湖北全自動分裝機

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