北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型造模方法

造模方法 頸部備皮常規(guī)消毒，取頸正中切口剪開皮膚，分離皮膚下軟組織并暴露頸動(dòng)脈鞘； 游離出頸總動(dòng)脈1.5cm，穿線備用； 向遠(yuǎn)心端找到頸外側(cè)動(dòng)脈，游離涌現(xiàn)結(jié)扎，提起頸總備用線，在近心端，遠(yuǎn)心端用動(dòng)脈夾夾??； 在近心端動(dòng)脈夾處，用5mL注射器針頭刺破血管，稍微提起動(dòng)脈夾，用鑷子夾住線栓，從小口插入動(dòng)脈后，去掉遠(yuǎn)心端動(dòng)脈夾，然后用鑷子夾住線栓，線栓插入到頸內(nèi)距分叉處1.8-2.0cm； 用備用線將頸總和線栓一起結(jié)扎住，*好是結(jié)扎雙道，記錄線栓插入時(shí)間，在將動(dòng)脈夾另一邊近心端頸總結(jié)扎住，去掉動(dòng)脈夾； 注意縫合時(shí)不要將線栓帶出，*后根據(jù)評(píng)分來判斷成模性。 線栓法是國內(nèi)外*常用的制作腦局部缺血再灌注損傷的方法。Koizumi 于 1986 年首先報(bào)道了用線栓法制備大鼠腦缺血再灌注模型，此后 Longa等對(duì)該方法進(jìn)行了改良。線栓法腦缺血模型的研究已經(jīng)取得很多突破和進(jìn)展，但模型制備的穩(wěn)定性受很多因素的影響，如小鼠體質(zhì)量、線栓的選擇等。小鼠缺血再灌注損傷后腦梗死體積百分比的變化可以為研究治*腦卒中藥物時(shí)間窗提供基礎(chǔ)依據(jù)，對(duì)進(jìn)一步深入研究大鼠缺血再灌注損傷模型有重要的意義。艾菱菲生物提供定制化的模型，根據(jù)客戶的特定要求進(jìn)行設(shè)計(jì)和構(gòu)建。北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型造模方法

SD大鼠MCAO模型作為世界上*通用的模型之一，在其制作時(shí)為了達(dá)成較高的成功率也需要不斷的探索和努力，我們?cè)俅慰偨Y(jié)了難點(diǎn)和問題點(diǎn)，希望這篇文章可以為大家制備模型提供參考。 （1）麻醉時(shí)間，麻醉程度適中，過淺影響操作，過深導(dǎo)致死亡。 （2）血管分離，在分離右側(cè)CCA、ECA、ICA時(shí),要注意迷走神經(jīng)的保護(hù), 減少對(duì)迷走神經(jīng)的損傷, 盡量避免對(duì)迷走神經(jīng)的直接牽拉。 （3）術(shù)中狀態(tài)監(jiān)護(hù)，例如發(fā)現(xiàn)呼吸異常，用鑷子將大鼠舌頭牽拉至嘴角一側(cè)，防止舌頭根部堵塞呼吸道出現(xiàn)窒息情況。 （4）手術(shù)視野，可以制備金屬勾，用橡皮筋纏繞連結(jié)金屬鉤固定在固定板上，從而使手術(shù)切口左右上下拉開，擴(kuò)大手術(shù)視野。上海本地腦梗MCAO模型注意縫合時(shí)不要將線栓帶出，*后根據(jù)評(píng)分來判斷成模性。

采用Longa等的5級(jí)4分法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行評(píng)價(jià)，0分：無神經(jīng)功能缺損癥狀；1分：出現(xiàn)左側(cè) Honer征，輕度神經(jīng)功能缺損；2分：提尾對(duì)側(cè)前肢內(nèi)旋，肩內(nèi)收，中度神經(jīng)功能缺損；3分：向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈、向?qū)?cè)傾倒，重度神經(jīng)功能缺損；4分：不能自發(fā)行走，部分意識(shí)喪失。鼠側(cè)傾倒，評(píng)分為3分。 沿腦橋上界面切斷，去除嗅球，稱全腦重，立即放入-20℃冰箱， 20 min 后取出，由前向后做連續(xù)冠狀切片（切片厚度2 mm）。將腦切片置入0.1% TTC溶液中，后放入恒溫振蕩器中，37℃避光染色30 min，將腦切片取出后放入固定液中固定 24 h，取出腦片，相機(jī)拍照，用 Motic Images Plus 顯微圖像分析系統(tǒng)計(jì)算腦梗死面積和梗死體積。

在科研領(lǐng)域，實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)通常承擔(dān)著以下幾種任務(wù)： 1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和執(zhí)行：實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)可以根據(jù)科研人員的需求，設(shè)計(jì)并執(zhí)行各種實(shí)驗(yàn)。他們能夠根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)要求，選擇合適的實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 2. 數(shù)據(jù)分析和解釋：實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)還負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析和解釋。他們能夠利用專業(yè)的數(shù)據(jù)分析工具和方法，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析，提取有用的信息，為科研人員提供有價(jià)值的見解和建議。 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)估和報(bào)告：實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行評(píng)估和報(bào)告。他們會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，評(píng)估實(shí)驗(yàn)的可靠性和有效性，并撰寫詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。這些報(bào)告可以為科研人員提供有價(jià)值的參考和依據(jù)。動(dòng)物疾病模型的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化非常重要，因?yàn)檫@可以確保研究結(jié)果的可重復(fù)性和可比性.

TTC染色如何測(cè)定腦梗MCAO面積-TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色，而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降，不能反應(yīng)，故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白。將模型動(dòng)物大鼠安樂死，解剖取材完整的腦組織，在-20℃速凍20min，便于切片。切片切成6片，每隔2mm切一片。將切片至于2%TTC磷酸緩沖液（PH 7.4）溶液中，用錫箔紙蓋住培養(yǎng)皿，放入37℃溫箱30min，15min后翻動(dòng)腦切片，使其均勻接觸到染液。在實(shí)驗(yàn)中，研究人員會(huì)觀察動(dòng)物的行為表現(xiàn)，例如運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力、平衡能力等，以評(píng)估神經(jīng)功能缺損的程度。本地腦梗MCAO模型

腦卒中具有高發(fā)病率和高死亡率，嚴(yán)重危害人體健康，一直是人們關(guān)心的熱點(diǎn)疾病。北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型造模方法

缺血性腦梗死具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特點(diǎn)。由于小鼠的腦血管解剖特點(diǎn)與人類較為相似，故小鼠廣泛應(yīng)用于缺血性腦梗死的研究當(dāng)中。缺血性腦梗死除了會(huì)影響缺血的區(qū)域之外，還會(huì)影響相關(guān)的神經(jīng)甚至整個(gè)中*神經(jīng)系統(tǒng)。因此小鼠缺血性腦梗模型有助于研究神經(jīng)連接和大腦整體的改變。這有助于推動(dòng)缺血性腦卒中等腦科學(xué)的進(jìn)步。 進(jìn)一步研究小鼠缺血性腦梗死模型，科學(xué)家們可以深入了解腦梗死的發(fā)病機(jī)制、病理生理過程以及神經(jīng)功能損害。通過不斷優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)，研究人員可以更精確地模擬人類缺血性腦梗死的臨床表現(xiàn)，為臨床治*提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型造模方法