植物組織培養(yǎng)基 MS 培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-25

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清,以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活。而除了血清之外,部分細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來(lái)維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異,需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。牛肉精蛋白胨培養(yǎng)基是常用的富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,適用于快速生長(zhǎng)的微生物。植物組織培養(yǎng)基 MS 培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)

培養(yǎng)基

還有一些鑒別性培養(yǎng)基,是利用細(xì)菌特有的各種酶系統(tǒng),能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質(zhì)而產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)堿或產(chǎn)生其他可見(jiàn)物質(zhì),依此進(jìn)行細(xì)菌的鑒別,例如常用的生化培養(yǎng)基。用于細(xì)菌生化特性試驗(yàn)的培養(yǎng)基特點(diǎn)是在無(wú)糖的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加人某種特定的基質(zhì),并加人指示劑,細(xì)菌在此類培養(yǎng)基中的一系列生化反應(yīng)結(jié)果,均通過(guò)指示劑顯示出來(lái)。此類培養(yǎng)基為生化反應(yīng)鑒別培養(yǎng)基。根據(jù)用量又可分為常量生化培養(yǎng)基和微量生化培養(yǎng)基。值得注意的是生化試驗(yàn)培養(yǎng)基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時(shí),應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況嚴(yán)格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。橄欖油培養(yǎng)基基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基是在常規(guī)培養(yǎng)基中添加多種蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子等等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)代替動(dòng)物血清。

植物組織培養(yǎng)基 MS 培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖),培養(yǎng)基

培養(yǎng)基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號(hào)之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時(shí)務(wù)必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號(hào),對(duì)不同來(lái)源的原料應(yīng)先做小樣試驗(yàn)。此種培養(yǎng)基成本較低,細(xì)菌繁殖較好,一般細(xì)菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。

bFGF是一個(gè)肝素結(jié)合的多膚類絲裂源,普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細(xì)胞增殖分化調(diào)節(jié)劑,可刺激多種細(xì)胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn)它對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細(xì)胞膜上FGF受體結(jié)合發(fā)揮作用,刺激與增殖有關(guān)的基因表達(dá)。Thomson 等認(rèn)為,像其他體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞一樣,hES 細(xì)胞要求 bFGF 的存在以促進(jìn)增殖。同理EGF(上皮生長(zhǎng)因子) , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì),由53個(gè)氨基組成的活細(xì)胞,藉由刺激表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體之酪氨酸磷酸化,達(dá)到修補(bǔ)增生肌膚表層細(xì)胞,據(jù)說(shuō)對(duì)受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,其較大特點(diǎn)是能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化。所以加入它們都是促進(jìn)細(xì)胞增殖的。有些細(xì)胞需要在低溫下培養(yǎng),這時(shí)需要特殊的培養(yǎng)基。

植物組織培養(yǎng)基 MS 培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖),培養(yǎng)基

在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營(yíng)養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強(qiáng)的緩沖劑,能使細(xì)胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強(qiáng)。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動(dòng)。在開(kāi)放式培養(yǎng)條件下,觀察細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時(shí)可以維持 pH7.0 左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)的過(guò)程中能用到。需要控制pH值、溫度、氣氛等因素,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性。兔血清

培養(yǎng)基種類繁多,根據(jù)需求選擇適合的培養(yǎng)基對(duì)于成功的微生物培養(yǎng)至關(guān)重要。植物組織培養(yǎng)基 MS 培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)

HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在 Eagle′s(2.2g/L) 中比在 Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡,以維持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空氣水平的CO2中,溶液會(huì)變堿,Hanks′液在 CO2 培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagle′s液,如果只是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織,用Hanks′液就可以了。由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)將產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差,無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來(lái)說(shuō),細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些。在配制培養(yǎng)用液時(shí),需要注意一點(diǎn):新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過(guò) 0.10um 或 0.22um 濾膜過(guò)濾時(shí),溶液的pH 還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。植物組織培養(yǎng)基 MS 培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)

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