MSR培養(yǎng)基

在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽，它可提供營養(yǎng)，但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強的緩沖劑，能使細胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強。HEPES溶液：是一種弱酸，中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸，主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動。在開放式培養(yǎng)條件下，觀察細胞時培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境，CO2 氣體迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此時可以維持 pH7.0 左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。神經(jīng)細胞原代培養(yǎng)的過程中能用到。常見的細菌類培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、大腸桿菌培養(yǎng)基、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基等等。MSR培養(yǎng)基

細菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基：葡萄糖10g，磷酸氫二鉀0.5g，碳酸鈣3g，硫酸鎂0.2g，酵母粉0.4瓊脂20g，水1000ml，1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。放線菌培養(yǎng)基：（1）淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基（高氏一號培養(yǎng)基）可溶性淀粉2.0g，硝酸鉀0.1g，磷酸氫二鉀0.05g，氯化鈉0.05g，硫酸鎂0.05g，硫酸亞鐵0.001g，瓊脂2g，水100ml。先把淀粉放在燒杯里，用5ml水調成糊狀后，倒入95ml水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號，加熱到煮沸時加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補足失水。調整pH值到7.2-7.4，分裝后滅菌，備用。乳酸鈉溶液某些培養(yǎng)基會在特定環(huán)境下產(chǎn)生特定的表型變化，例如MacConkey培養(yǎng)基生成紅色菌落表示腸道桿菌的存在。

鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應底物和指示劑，以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑，如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基，含有葡萄糖及乳糖，以酚紅作為指示劑，觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力，加人檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫；又如伊紅-美藍瓊脂，含有乳糖(反應底物)、伊紅-美藍(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌。一般鑒別培養(yǎng)基的特點是在配方中都含有指示劑，并可用于區(qū)別不同種類的微生物，有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細菌，如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。

培養(yǎng)基的分類有幾種呢？按照培養(yǎng)基用途區(qū)分：1.基礎培養(yǎng)基，一類含有一般微生物生長繁殖所需基本營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的基礎培養(yǎng)基。2.加富培養(yǎng)基，一類在基礎培養(yǎng)基中加入血、血清、動植物組織提取液制成的培養(yǎng)基。用于培養(yǎng)要求比較苛刻的某些微生物。3.選擇培養(yǎng)基，一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能，普遍用于菌種篩選等領域。在有些情況下，培養(yǎng)基還需要進行一些化學處理。

選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基：葡萄糖5%，尿素0.1%，硫化銨0.1%，磷酸二氫鉀0.25%，磷酸氫二鈉0.05%，七水合硫酸鎂0.1%，七水合硫酸鐵0.01%，酵母膏0.05%，孟加拉紅0.003%，pH4.5。富集好氧自生固氮菌：甘露醇1%，磷酸二氫鉀0.02%，七水合硫酸鎂0.02%，氯化鈉0.02%，二水合硫酸鈣0.01%，碳酸鈣0.5%培養(yǎng)基類型和配方可以根據(jù)需要進行定制，以滿足特定的實驗需求。MSR培養(yǎng)基

雜質會影響培養(yǎng)基的成分，因此制備培養(yǎng)基時需要進行滅菌。MSR培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基血清種類：目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細胞的原因：來源充足、制備技術成熟、經(jīng)過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內的新生牛；小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質比較高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。MSR培養(yǎng)基

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