植物組織培養(yǎng)基 MSH 培養(yǎng)基

來源: 發(fā)布時間:2023-03-29

以MS培養(yǎng)基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。培養(yǎng)基也有不同的形態(tài),可以是液體、半固體或固體形式。植物組織培養(yǎng)基 MSH 培養(yǎng)基

培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術建立早期,體外培養(yǎng)細胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。普遍使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。脂肪酸溶液在實際應用過程中,常常需要調整培養(yǎng)基的組成和配方,以優(yōu)化細胞或微生物的生長和功能表現(xiàn)。

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還有一些鑒別性培養(yǎng)基,是利用細菌特有的各種酶系統(tǒng),能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質而產酸、產氣、產堿或產生其他可見物質,依此進行細菌的鑒別,例如常用的生化培養(yǎng)基。用于細菌生化特性試驗的培養(yǎng)基特點是在無糖的基礎培養(yǎng)基中加人某種特定的基質,并加人指示劑,細菌在此類培養(yǎng)基中的一系列生化反應結果,均通過指示劑顯示出來。此類培養(yǎng)基為生化反應鑒別培養(yǎng)基。根據用量又可分為常量生化培養(yǎng)基和微量生化培養(yǎng)基。值得注意的是生化試驗培養(yǎng)基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時,應根據實際情況嚴格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。

長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調整。經過無菌處理的培養(yǎng)基能保證無細菌污染。

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培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養(yǎng)物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發(fā)酵生產谷氨酸的過程中,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養(yǎng)基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。 為了避免細胞爆破釋放DNA和蛋白質,培養(yǎng)基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶類。AC肉湯

改良巴爾斯氏培養(yǎng)基基礎(含2.5%NaCl) 桑塔基氏培養(yǎng)基基礎 改良桑塔基氏培養(yǎng)基基礎。植物組織培養(yǎng)基 MSH 培養(yǎng)基

上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,厭氧菌培養(yǎng)基(anaerobic media) 供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別用的培養(yǎng)基,稱為厭氧菌培養(yǎng)基。由于厭氧菌自身缺乏有氧代謝所必需的各種酶,如細胞色素和細胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶、超氧化歧化酶,所以造成自身代謝的缺陷,無法進行有氧代謝,而無氧酵解所產生的能量又不足,因此厭氧菌在正常的大氣環(huán)境下不能生長和生存。為使厭氧菌能正常生長,必須制備營養(yǎng)成分豐富,氧化還原電勢較低,具有特殊生長因子的專門用的培養(yǎng)基。植物組織培養(yǎng)基 MSH 培養(yǎng)基

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