長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家推薦

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-04-20

無(wú)血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品介紹:無(wú)血清細(xì)胞凍存液是一款針對(duì)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液。該凍存液采用獨(dú)特的凍存配方,包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物,**降低了細(xì)胞在凍存過(guò)程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無(wú)任何動(dòng)物源組分,可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài),并且可減少各類(lèi)***和支原體污染的風(fēng)險(xiǎn),確保細(xì)胞凍存安全。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比,本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃,無(wú)需程序降溫。程序降溫法使用的凍存液主要配方為培養(yǎng)基、血清、DMSO。長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家推薦

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使用方法:1)細(xì)胞超凈臺(tái)無(wú)菌環(huán)境,1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞,細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)/ml,混懸液體積為200μl。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷,逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl,細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開(kāi)啟程序性降溫,降溫速率為1℃/min,較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對(duì)比,具體結(jié)果如附圖1所示,可見(jiàn)采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率。其他實(shí)施例通過(guò)與比較例1進(jìn)行比較,也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率,同時(shí)還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體,細(xì)菌,朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染。南京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷(xiāo)當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5 ℃~-10℃/min。之前。

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細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng):1.為保持細(xì)胞較大存活率,一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度為-1℃~12℃/分鐘,當(dāng)溫度下降達(dá)-25℃時(shí),下降速度可增至-5~-10℃/分鐘,到-100℃時(shí)則可迅速凍入液氮中。因此要適當(dāng)掌握凍存物下降入液氮中的速度,過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促冰晶形成。3.初次凍存者在下降凍存時(shí),宜先用細(xì)木棒伸入罐中探測(cè)液面位置,然后需用溫度計(jì)與凍存物并行的辦法,以觀測(cè)下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關(guān)系,當(dāng)已掌握以上各參數(shù)和凍存技術(shù)熟練后,光按下降時(shí)間和下降距離便可獲理想凍存效果。

細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng):1、各種細(xì)胞對(duì)凍存速度的要求也不一樣;上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些,骨髓干細(xì)胞-2~-3℃/分鐘合適;胚胎細(xì)胞耐受性較小,不宜太快??傊谝婚_(kāi)始時(shí),下降速度不能超過(guò)-10℃/分鐘。2、用什么防護(hù)劑合適和用量多大,要依細(xì)胞而定,初代培養(yǎng)細(xì)胞用DMSO較好,一般細(xì)胞可用甘油;用量以較小為好。有人認(rèn)為人皮膚上皮細(xì)胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細(xì)胞在液氮中可貯存多年,但為妥善起見(jiàn),凍存一年后,應(yīng)再?gòu)?fù)蘇培養(yǎng)一次,然后再繼續(xù)凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作,以免凍壞。5、注意自身的安全,對(duì)于來(lái)自人源性或病毒傳染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心。操作過(guò)程中,應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,小心有毒性試劑例如DMSO,并避免尖銳物品傷人等。隨著細(xì)胞凍存數(shù)量增加,凍存流程簡(jiǎn)化也成為必然趨勢(shì),因此無(wú)血清非程序降溫凍存液應(yīng)運(yùn)而生。

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永生化的細(xì)胞系往往相當(dāng)健壯,因此,使用實(shí)驗(yàn)室自制的凍存培養(yǎng)基,效果也不錯(cuò)。典型的配方是在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細(xì)胞中的一些水,以防止冰晶形成,刺穿細(xì)胞。據(jù)賽默飛世爾科技的較深科學(xué)家RhondaNewman介紹,DMSO還能防止細(xì)胞在冷凍期間發(fā)生收縮,而后在解凍時(shí)又變得腫脹。血清,這種富含營(yíng)養(yǎng)成分的物質(zhì),直接支持細(xì)胞?!爱?dāng)細(xì)胞處于這種營(yíng)養(yǎng)豐富的環(huán)境時(shí),它們能夠更好地復(fù)蘇。無(wú)血清細(xì)胞凍存液 產(chǎn)品原理:無(wú)血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。深圳正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液?jiǎn)蝺r(jià)

無(wú)血清細(xì)胞凍存液可用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲(chǔ)。長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家推薦

無(wú)血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞凍存步驟:1.常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于試管中。2.確認(rèn)所需凍存的細(xì)胞數(shù)量。3.將所需凍存細(xì)胞收集于離心管中,1000rpm,5min離心,收集細(xì)胞沉淀,并棄掉上清液。4.加入適量的凍存液于離心管中,加入量按照細(xì)胞保存濃度為5X105至1X107/ml密度,輕柔的混勻細(xì)胞,獲取細(xì)胞混合液。5.將獲取的細(xì)胞混合液按照1~1.5ml/管,分裝于凍存管中。6.將凍存管直接放入-80℃保存,可長(zhǎng)期保存。無(wú)血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞系及tumour細(xì)胞系。特別的配方能有效提高細(xì)胞存活率和復(fù)蘇能力。不含血清,無(wú)病毒、霉菌和支原體等微生物污染,確保凍存細(xì)胞安全。非常適用于無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家推薦