蕪湖RNA提取試劑廠家

來源: 發(fā)布時間:2022-05-15

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。RNA提取試劑注意事項:其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,滅菌,烘干。蕪湖RNA提取試劑廠家

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新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內(nèi)核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點:離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強,適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟??焖?,簡捷,單個樣品操作一般可在1小時內(nèi)完成。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)合肥正規(guī)RNA提取試劑價格植物花總RNA提取試劑盒:采用進口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,配合特殊的提取緩沖液。

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細胞RNA提取的方法:實驗提取步驟:標準Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細胞培養(yǎng)皿置于冰上,加入Trizol裂解5-10分鐘,用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進口EP管中。加入1/5體積的氯仿,上下混勻液體,4度靜置10-15分鐘。(氯仿為有機溶劑,有效的使有機相和無機相迅速分離。有機相中主要是酚和蛋白結(jié)合,從而使得蛋白和RNA脫離,RNA進入水相)。4度離心15分鐘,一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層,RNA在上清里,從離心機輕輕拿出EP管,以免管內(nèi)物質(zhì)震蕩導(dǎo)致下層沉淀激起。吸取上清的時候一定要動作輕柔,切忌吸取太多,一般吸到400-500ul,避免吸到下層沉淀,將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇,4度靜置10min,然后12000rpm離心10min。

RNA提取注意事項:1、組織樣本要盡可能的新鮮,避免反復(fù)凍融。2、提取時組織要充分研磨,組織量不宜過少,更不宜過多。3、加入裂解液后應(yīng)給予充分的孵育時間,使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時,分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸,不能多吸”,千萬不能提取到中間層,否則會導(dǎo)致嚴重的基因組DNA污染。5、洗滌時洗滌液應(yīng)充分浸潤到管壁的四周,確保洗滌徹底。6、柱式提取法,洗滌完后除了對柱子進行空離后,還應(yīng)當將吸附柱置于超凈臺內(nèi)吹風(fēng)5~10min,使有機溶劑充分揮發(fā)干。7、柱式法較后洗脫時候,當加入DEPC水后還應(yīng)孵育3~5min,或者提前將DEPC水加熱至60℃,可提高洗脫得率。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀,則應(yīng)當給予適當溶解時間,并用泵頭不斷吹吸離心管底部。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:配有CS過濾柱,可有效去除其它雜質(zhì)。

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RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。無論是人、動物、植物還是細菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,故而能夠作RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和分子克隆等。和進口品牌實驗對照顯示,公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達到甚至超過了進口產(chǎn)品的質(zhì)量。RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。杭州正規(guī)RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:試劑盒可用于哺乳動物細胞或者組織樣品的提取。蕪湖RNA提取試劑廠家

Trizol是一種總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質(zhì)。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì),進行密度梯度超速離心,RNA沉淀于管底,而DNA與蛋白質(zhì)在上清液中。使用這種方法,不但能得到高質(zhì)量的RNA,而且能同時分離出細胞染色體DNA。蕪湖RNA提取試劑廠家