蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防價(jià)格

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-07-24

方法

靈敏度

優(yōu)勢(shì)

劣勢(shì)

培養(yǎng)法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金標(biāo)準(zhǔn)

ü 費(fèi)勞力

ü 耗時(shí)長(zhǎng)

ü 需要特定的培養(yǎng)基

ü 特定支原體種類(lèi)需要特定的培養(yǎng)基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能難以判讀結(jié)果

ü 無(wú)法鑒別支原體種屬

ü 可能假陽(yáng)性可能性

間接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易檢測(cè)

ü 費(fèi)時(shí)

ü 需要細(xì)胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客觀,易判讀結(jié)果

ü 可以鑒別支原體種屬

ü 受抗體限制

ü 價(jià)格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可檢測(cè)支原體種屬

ü 價(jià)格略高

ü 可檢測(cè)的支原體種屬有限

放射自顯影

☆☆

ü 迅速

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無(wú)法鑒別支原體種屬

ü 費(fèi)勞力

生物發(fā)光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無(wú)法鑒別支原體種屬

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 可能假陽(yáng)性可能性

ü 檢測(cè)特異性依賴(lài)引物特異性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 結(jié)果可靠

ü 高通量

ü 可能假陽(yáng)性可能性

ü 檢測(cè)特異性依賴(lài)引物特異性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 無(wú)需DNA提取

ü *需10min左右的實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間

ü 具有特異性

ü 高通量

ü 可能假陽(yáng)性可能性

ü 檢測(cè)特異性依賴(lài)引物特異性 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的后果?蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防價(jià)格

蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防價(jià)格,支原體

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果可能由以下原因引起:
1. 擴(kuò)增產(chǎn)物污染:PCR擴(kuò)增產(chǎn)生的大量DNA拷貝若未妥善處理,極微量的污染就可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。
2. 引物設(shè)計(jì)不當(dāng):引物設(shè)計(jì)不夠特異性,可能會(huì)與非目標(biāo)序列發(fā)生反應(yīng),導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增。
3. 試劑質(zhì)量問(wèn)題:使用的dNTPs、引物、DNA聚合酶等試劑質(zhì)量不佳,可能引起非特異性擴(kuò)增或假陽(yáng)性結(jié)果。
4. 操作技術(shù)問(wèn)題:實(shí)驗(yàn)操作不規(guī)范,如混合樣本、標(biāo)簽錯(cuò)誤或樣本標(biāo)識(shí)不清等,可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。
5. PCR反應(yīng)條件設(shè)置不當(dāng):不恰當(dāng)?shù)腜CR反應(yīng)條件,如溫度和時(shí)間選擇不當(dāng),可能導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增。
6. DNA污染:PCR環(huán)境中的DNA污染會(huì)干擾結(jié)果,導(dǎo)致假陽(yáng)性
細(xì)胞培養(yǎng)支原體檢測(cè)試劑價(jià)格支原體及污染方式有哪些?

蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防價(jià)格,支原體

qPCR法,即定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(QuantitativePolymeraseChainReaction)法,在支原體檢測(cè)中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:

1. 快速定性檢測(cè):qPCR法可以快速檢測(cè)生產(chǎn)原料、細(xì)胞庫(kù)、病毒種子、病毒或細(xì)胞收獲液、治*用細(xì)胞中潛在的支原體污染。
2. 臨床樣本檢測(cè):qPCR法可用于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室樣本及臨床樣本中的支原體,具有快速、特異性強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。
3. 監(jiān)管要求:基于TaqMan的qPCR測(cè)定專(zhuān)門(mén)針對(duì)檢測(cè)細(xì)胞治*和復(fù)雜生物生產(chǎn)樣本中的支原體而開(kāi)發(fā),其性能滿(mǎn)足或超出監(jiān)管要求,如10CFU/mL。
4. 藥物質(zhì)量控制:qPCR法提供早期檢測(cè)支原體污染的方法,適用于藥物質(zhì)量控制,具有快速、高度特異性、靈敏性,并符合國(guó)際準(zhǔn)則。

LAMP法,即環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法(Loop-mediated isothermal amplification),在支原體檢測(cè)中的應(yīng)用具有以下特點(diǎn)和應(yīng)用場(chǎng)景:
1. 日常監(jiān)測(cè):由于LAMP法的快速和簡(jiǎn)便性,它適用于生物實(shí)驗(yàn)室的日常監(jiān)測(cè),可以及時(shí)檢測(cè)出支原體的存在,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
2. 疾病診斷:LAMP法已被成功應(yīng)用于SARS、禽流感、HIV等疾病的檢測(cè)中,并在2009年甲型H1N1流感事件中發(fā)揮了重要作用。
3. 臨床應(yīng)用:LAMP法在臨床樣本的檢測(cè)中顯示出了快速、高靈敏度和穩(wěn)定性,可以用于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室樣本及臨床樣本中的支原體。
4. 多病原體檢測(cè):LAMP法可以同時(shí)檢測(cè)多種病原體,包括肺炎支原體在內(nèi)的多種下呼吸道感*的病原體,為臨床診療提供詢(xún)證依據(jù)。
5. 與其他技術(shù)結(jié)合:LAMP法可以與CRISPR-Cas12a等其他技術(shù)結(jié)合,建立新的檢測(cè)方法,提高檢測(cè)的效率和準(zhǔn)確性。
支原體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的方法?

蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防價(jià)格,支原體

支原體是一類(lèi)細(xì)菌,由于缺乏細(xì)胞壁,具有靈活的膜結(jié)構(gòu)。這使得支原體的形態(tài)多變,很難在高倍顯微鏡下識(shí)別。并且能夠抵抗壓力、溫度、滲透壓和脫水,對(duì)許多針對(duì)細(xì)胞壁合成的常見(jiàn)抗*素具有抗性。它們的體積非常小,直徑通常在0.15~0.3μm,因此能夠輕易地穿過(guò)過(guò)濾系統(tǒng)。支原體能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中可以高濃度生長(zhǎng),而不引起明顯的混濁或其他可見(jiàn)的污染跡象。
支原體通過(guò)特殊的前端細(xì)胞器與宿主細(xì)胞結(jié)合。支原體前端細(xì)胞器富含粘附素,可以附著在真核細(xì)胞上并穿透宿主細(xì)胞。支原體缺乏剛性細(xì)胞壁,可能有助于其與宿主細(xì)胞膜融合,并交換其膜和細(xì)胞質(zhì)成分。支原體的對(duì)細(xì)胞的毒性包括支原體侵襲性、分泌的致病酶和一些膜成分等都能夠有效地侵犯宿主。
支原體的檢測(cè)方法有哪些?細(xì)胞培養(yǎng)支原體檢測(cè)試劑價(jià)格

細(xì)胞被支原體污染了會(huì)有什么影響?蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防價(jià)格

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響,具體包括:
1. 細(xì)胞生長(zhǎng)受影響:支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)速度減慢,甚至停滯。
2. 細(xì)胞形態(tài)改變:支原體感*的細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)形態(tài)的改變,如細(xì)胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。
3. 細(xì)胞功能改變:支原體污染會(huì)影響細(xì)胞的代謝、增殖、分化等生理功能。
4. 細(xì)胞產(chǎn)物改變:支原體感*可能影響細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)的表達(dá)和分泌。
5. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確:支原體污染會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不可靠。
6. 實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差:支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)批次間差異大,影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。
7. 影響后續(xù)實(shí)驗(yàn):支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),如轉(zhuǎn)染、基因編輯等,可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)效果。
8. 影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量:支原體污染會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原體污染需要花費(fèi)額外的時(shí)間和成本進(jìn)行檢測(cè)、處理和重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防價(jià)格

標(biāo)簽: 免疫沉淀 支原體