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來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-10-19

Tris緩沖體系廣泛應(yīng)用生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)過程中,例如目前已上市的兩款mRNA**疫苗均選用Tris/Tris-HCl作為其制劑緩沖體系,此外該緩沖體系還***用于抗體蛋白純化等生物制劑生產(chǎn)環(huán)節(jié)。艾偉拓產(chǎn)品團(tuán)隊(duì)在此向您推薦一種操作簡便且復(fù)現(xiàn)性較好的緩沖液配制方法:使用氨丁三醇(Tris)及鹽酸氨丁三醇(Tris-HCl)固體粉末進(jìn)行配制。使用時(shí),可根據(jù)目標(biāo)濃度及pH,計(jì)算并直接稱取兩種固體粉末混合,溶解定容,至于兩種固體粉末的用量如何確認(rèn),您可以參考以下實(shí)驗(yàn)步驟以及艾偉拓實(shí)驗(yàn)室實(shí)測值,通過一個(gè)簡單的預(yù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn):多級別TRIS-HCl工廠直銷。江蘇輔料TRIS現(xiàn)貨

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磷酸鹽緩沖溶液由于磷酸是三元酸,因此磷酸鹽緩沖溶液的緩沖對可以為H3PO4/H2PO4-、H2PO4-/HPO42-或HPO42--PO43-。但生化體系中常用的磷酸鹽緩沖溶液一般主要由H2PO4-/HPO42-的鈉鹽或鉀鹽配制而成。溶液中主要以H2PO4-+H2O←→HPO42-+H3O+平衡移動(dòng)體系來維持溶液pH值的穩(wěn)定,pH值范圍一般為6.2~8.2。在生化體系中,通常在其中加入NaCl或者KCl構(gòu)成磷酸鹽緩沖生理鹽水(簡稱PBS)來使用。因磷酸鹽緩沖溶液的pH值范圍與一些生物活性物質(zhì)存活的酸堿環(huán)境接近,所以在生化體系中應(yīng)用較多,如可用來配置相關(guān)溶液、以及作為組織抗原修復(fù)的修復(fù)液、藥物釋放的溶媒等。另外,PBS作為一種溶劑目前在冷凍保存中也較受歡迎。天津藥用TRIS實(shí)驗(yàn)室采購AVT多級別TRIS-HCl工廠直銷!

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羥乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(HEPES)4-羥乙基哌嗪乙磺酸(簡稱HEPES),分子式為C8H18N2O4S。分子結(jié)構(gòu)中既含有酸性的磺酸基(-SO3H),又含有兩個(gè)堿性叔胺氮,所以呈現(xiàn)兩性,可用來配制兩性離子緩沖液。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中,再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至適當(dāng)值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對其pH值影響不大,因此能夠較長時(shí)間維持穩(wěn)定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現(xiàn)較強(qiáng)的酸性,易給出H+;兩個(gè)叔胺氮各含有一個(gè)孤對電子,呈現(xiàn)堿性,可以接受H+生成季銨鹽。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對。而且,單個(gè)HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內(nèi)鹽,即兩性離子。在水溶液中,HEPES分子、內(nèi)鹽以及磺酸基和叔胺各自產(chǎn)生的離子之間因H+或OH-的轉(zhuǎn)移而能夠相互轉(zhuǎn)化建立平衡關(guān)系,憑借該平衡關(guān)系的移動(dòng)來抵御外來酸堿的影響來調(diào)節(jié)溶液pH值穩(wěn)定,所以具有緩沖作用,其平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系見下圖。

前述不同緩沖溶液雖然有相似之處,同時(shí)也存在差異,主要體現(xiàn)為以下幾點(diǎn):(1)緩沖溶液應(yīng)用的酸堿度環(huán)境有差異:硼酸鹽緩沖溶液和Tris-HCl緩沖溶液較適合在堿性環(huán)境中使用,而磷酸鹽緩沖溶液和HEPES緩沖溶液則多數(shù)情況下適宜運(yùn)用在pH值為6.8~8.2左右的弱酸性、弱堿性或接近中性的環(huán)境中;(2)緩沖溶液組成有差異:硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液及磷酸鹽緩沖溶液一般是由兩種物質(zhì)配置而成,而HEPES緩沖溶液則是由一種物質(zhì)配制;(3)緩沖溶液發(fā)揮緩沖作用的原理有一定差異:硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液及磷酸鹽緩沖溶液靠體系中緩沖對的電離或水解平衡移動(dòng)來發(fā)揮緩沖作用,而HEPES緩沖溶液則是靠體系中平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系來發(fā)揮緩沖作用;(4)緩沖溶液發(fā)揮作用的側(cè)重方面不同:如同是在生物藥相關(guān)方面的應(yīng)用,磷酸鹽緩沖溶液在固體藥物釋放研究中應(yīng)用較多。而硼砂緩沖溶液多用于液體藥物如滴眼液中。Tris-HCl緩沖較多用于蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子的溶液體系中。而HEPES更側(cè)重應(yīng)用于脂質(zhì)體、細(xì)胞水平的相關(guān)生化實(shí)驗(yàn)研究中;AVT多級別TRIS工廠直銷。

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Tris衍生緩沖液除了Tris-HCl之外,Tris還有多種衍生緩沖液:TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的組織或WesternBlotting中的蛋白印跡膜等;TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做WesternBlotting中常用的一種洗膜緩沖液;TE=Tris-HCl+EDTA,對DNA的堿基有保護(hù)性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲存;TAE=Trisbase+乙酸+EDTA,是大片段DNA短時(shí)間電泳時(shí)***使用的緩沖系統(tǒng);TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,適用于長時(shí)間DNA電泳,對較小片段分離效果較好。多級別TRIS工廠直銷。77-86-1TRIS批量

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三羥甲基氨基甲烷—鹽酸緩沖溶液(Tris-HCl)三羥甲基氨基甲烷簡稱Tris,分子式為C4H11NO3,結(jié)構(gòu)式見圖1。分子中的氨基(—NH2)為堿性,因此Tris是一種弱堿,常與鹽酸構(gòu)成緩沖溶液,簡稱Tris-HCl緩沖液。該緩沖液一般由一定質(zhì)量的Tris溶于蒸餾水中,再用HCl調(diào)節(jié)至適合的pH值。在配制時(shí)還需加入NaCl以維持溶液等滲。因Tris-HCl緩沖液的pH值受溶液濃度、溫度影響較大,以及易與空氣中的二氧化碳反應(yīng),所以在使用時(shí)需現(xiàn)用現(xiàn)配制。艾偉拓氨丁三醇江蘇輔料TRIS現(xiàn)貨