廣州JUE對定量數(shù)字PCR哪家好

來源: 發(fā)布時間:2023-04-07

數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴增曲線循環(huán)Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統(tǒng)計并計算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應都是發(fā)生于同一體系當中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。 雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法。廣州JUE對定量數(shù)字PCR哪家好

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數(shù)字PCR(DigitalPCR-dPCR)技術是一種新的核酸檢測和定量方法,與傳統(tǒng)定量PCR(qPCR)技術不同,數(shù)字PCR采用***定量的方式,不依賴于標準曲線和參照樣本,直接檢測目標序列的拷貝數(shù)。由于這種檢測方式具有比傳統(tǒng)qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性,dPCR迅速得到***的應用,這項技術在極微量核酸樣本檢測、復雜背景下稀有突變檢測和表達量微小差異鑒定方面變現(xiàn)出的優(yōu)勢已被普遍認可,而其在基因表達研究、microRNA研究、基因組拷貝數(shù)鑒定、**標志物稀有突變檢測、致病微生物鑒定、轉(zhuǎn)基因成分鑒定、NGS測序文庫精確定量和結(jié)果驗證等諸多方面具有的廣闊應用前景已經(jīng)受到越來越多的關注。北京流式數(shù)字PCR現(xiàn)貨您了解數(shù)字PCR儀的優(yōu)勢嗎?

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二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法,在均相溶液中,當擴增引物增加時,由于擴增引物之間的相互作用,從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增,將可降低引物間相互作用,提高擴增效率。同時還可以實現(xiàn)對于少量模板的有效擴增,得到更多的有效測序數(shù)據(jù)。CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗證CRISPR-Cas9技術的發(fā)明,是基因編輯技術的一大突破,但如何驗證實驗是否成功,仍需要高靈敏度的檢測方法,數(shù)字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發(fā)明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測,但精確定量評估時仍采取了數(shù)字PCR進行確認。

MicroDrop-100系統(tǒng)產(chǎn)品特點:一、適應性廣,靈活性高1、理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應用2、樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定3、開放式平臺,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。二、靈敏度高,準確性高1、***定量——無需依賴標準曲線2、采用微滴式技術高達100,000個的微滴3、線性范圍達到6個數(shù)量級,靈敏度高達萬分之一三、可分析復雜混合物1、準確度不完全依賴于擴增效率2、雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法3、支持多重數(shù)字PCR四、操作簡單,使用方便1、全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。2、可選全中文分析軟件20微升體系生成100,000微滴。

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MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術,采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數(shù)量級,各項指標均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領域的壟斷。樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定。深圳永諾數(shù)字PCR簡介

線性范圍達到6個數(shù)量級,靈敏度低至萬分之一。廣州JUE對定量數(shù)字PCR哪家好

與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢:1、能夠***定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準確性。而數(shù)字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可進行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應體系分割成數(shù)萬個 PCR反應,這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個 反應體系中,***降低了背景信號和***物對反應的干擾,擴增基質(zhì)效應大大減小。廣州JUE對定量數(shù)字PCR哪家好

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