廣東數字PCR

與常規(guī)的PCR的方法相比，dPCR有很好的優(yōu)勢。

***定量

常規(guī)PCR和實時熒光PCR定量檢測都需要已知拷貝數的標準DNA制定標準曲線，由于樣品測定在各種條件上不會完全一致，會造成PCR擴增效率的差異，從而影響定量結果的準確性。而ddPCR不受標準曲線和擴增動力學影響，可以進行***定量。

樣品需求量低

在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優(yōu)勢。

高靈敏度

ddPCR本質上是將一個傳統(tǒng)的PCR反應分成了數萬個**的PCR反應，在這些反應中可以精確地檢測到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品，且能避免非同源異質雙鏈的形成。

高耐受性

由于目的序列被分配到多個微滴中，***降低了體系間的影響以及背景序列和***物對反應的干擾，擴增基質效應大大減小。 分辨率——低至0.1倍基因表達差異。廣東數字PCR

MicroDrop-100微滴式數字PCR應用范圍如下：a.動植物檢驗檢疫，動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉基因產品檢測；b.降低篩查成本、縮短檢測周期，適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風險評估；適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測等；適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導；c.可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。d.基因表達差異監(jiān)測單細胞研究：測序、PCRe.無創(chuàng)產前篩查：低成本、快速、傳染性疾?。篐BV、HIV、CO VID-19定量深圳廣東數字PCR哪家好正壓生成油包水的液滴。

數字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術。該技術先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應單元中,使每個反應單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應,擴增結束后對每個反應室的熒光信號進行統(tǒng)計學分析,來定量DNA拷貝數。數字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內參基因和標準曲線,準確度高、重現性好,可以實現***定量分析。由于其獨特的技術優(yōu)勢,已經在臨床診斷、轉基因成分定量、單細胞基因表達分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領域顯示出巨大的優(yōu)勢和應用前景。

**個體化診療

通過檢測T790M位點突變情況，可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺ARMS檢測技術的靈敏度有限，沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技術展現出了****的檢測精度，此外，dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了，可以監(jiān)控突變含量變化，做到及早發(fā)現耐藥。

2.）基因表達分析

伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細胞白血?。–ML）患者延長生存期，但是臨床上發(fā)現，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉錄產物表達量有很大的關系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉錄產物進行測定，結果檢測下限可以達到0.001%，顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢 20微升體系生成100,000微滴。

研究方向

甲基化含量鑒定

作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析，現階段有不同的方法或技術來進行研究：如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統(tǒng)計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量，而微滴式數字PCR系統(tǒng)通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數定量，為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新的技術。

*****的伴隨診斷

常用體液來源(如血液，胸腹水，唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA，有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源，前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾，實現**標記物的有效檢測，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等，應用于**精細醫(yī)學的伴隨診斷。 線性范圍達到6個數量級，靈敏度低至萬分之一。廣州MicroDrop-100數字PCR簡介

線性范圍達到6個數量級，靈敏度高達萬分之一。廣東數字PCR

二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法，在均相溶液中，當擴增引物增加時，由于擴增引物之間的相互作用，從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增，將可降低引物間相互作用，提高擴增效率。同時還可以實現對于少量模板的有效擴增，得到更多的有效測序數據。CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證CRISPR-Cas9技術的發(fā)明，是基因編輯技術的一大突破，但如何驗證實驗是否成功，仍需要高靈敏度的檢測方法，數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發(fā)明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測，但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。廣東數字PCR

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