上海永諾數(shù)字PCR原理

MicroDrop-100數(shù)字PCR有什么優(yōu)勢(shì)？

       1.MicroDrop-100數(shù)字PCR所產(chǎn)生的微滴數(shù)是目前市面微滴式數(shù)字PCR里相對(duì)較高的產(chǎn)品，可將樣品分割為10萬份，更符合泊松分布數(shù)學(xué)模型，可以忽略更多的誤差因素；此外，高微滴數(shù)在多重?cái)?shù)字PCR上的優(yōu)勢(shì)也會(huì)更大。

       2.數(shù)字PCR可選全中文界面，對(duì)國(guó)內(nèi)用戶十分友好，可以說，拿到即可上手。

       3.數(shù)字PCR是一個(gè)開放性的平臺(tái)，在試劑方面除了產(chǎn)品列表上的檢測(cè)試劑盒，還有通用的反應(yīng)預(yù)混液，客戶自行設(shè)計(jì)引物探針即可進(jìn)行新項(xiàng)目的檢測(cè)。此外，永諾非常歡迎進(jìn)行定制、合作開發(fā)檢測(cè)試劑盒。

檢測(cè)數(shù)量一次可達(dá)96個(gè)樣品。上海永諾數(shù)字PCR原理

       MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成，該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù)，采用原創(chuàng)性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴，單次運(yùn)行生成400萬微滴，微滴體積達(dá)皮升級(jí)，檢測(cè)線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí)，各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外的主流產(chǎn)品。

       MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬份，打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 MicroDrop-100數(shù)字PCR采用主流可靠的解決方案，由微滴生成儀、微滴檢測(cè)儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成。

       數(shù)字PCR通過將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份，分配到不同的反應(yīng)單元（微滴），包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(也就是說我們所說的 DNA 模板) ，這是與PCR或qPCR反應(yīng)比較大的區(qū)別，PCR或qPCR只在一個(gè)反應(yīng)體系中進(jìn)行，而數(shù)字PCR在每個(gè)反應(yīng)單元（微滴）中都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)束后統(tǒng)計(jì)熒光信號(hào)并分析。是不是聽起來特別高(yi)大(lian)上(meng)？舉個(gè)栗子，PCR或qPCR檢測(cè)突變像是在大海里撈一個(gè)會(huì)發(fā)光的針，周圍都是海水，很難看到針的光在哪，而dPCR就像把海水盛到好多個(gè)碗里面，瞧一眼很容易就知道哪個(gè)碗在發(fā)光了，而且，系統(tǒng)還會(huì)數(shù)出來到底有多少個(gè)碗里是發(fā)光的，多少個(gè)碗里是沒發(fā)光的，這樣一比，不就很容易的知道有多少數(shù)量的突變，就能做到***定量了。

       數(shù)字PCR（Digtal PCR）是一種核酸定量精密檢測(cè)的新興技術(shù)手段，于20世紀(jì)由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中，使每個(gè)反應(yīng)單元中有一個(gè)或沒有核酸。利用PCR擴(kuò)增的同時(shí)，加入可檢測(cè)熒光。待擴(kuò)增結(jié)束時(shí)，使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采集每個(gè)反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù)，從而定量檢測(cè)樣本中的核酸濃度。

       基于分液方式的不同，數(shù)字PCR主要分為3種：微流體數(shù)字PCR(Microfluidic digital PCR，mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(Droplet digital PCR，ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(Chip digital PCR，cdPCR)。

CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證。

       在定量PCR時(shí)，我們常常糾結(jié)一個(gè)問題，究竟是相對(duì)定量還是***定量呢？如今，你無需糾結(jié)了，因?yàn)閿?shù)字PCR（digital PCR）來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似，都是估計(jì)起始樣品中的核酸量，但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來測(cè)定核酸量，而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù)，是對(duì)起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域：拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究（如等位基因不平衡表達(dá)）、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。支持多重?cái)?shù)字PCR，可選全中文分析軟件。上海永諾數(shù)字PCR原理

理論上可覆蓋qPCR（熒光定量PCR)的所有應(yīng)用。上海永諾數(shù)字PCR原理

       數(shù)字PCR也叫Digital PCR（dPCR），是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說，數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值，不受擴(kuò)增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù)，能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。

       數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中，使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增，然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言，傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中，這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。

上海永諾數(shù)字PCR原理

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