廣州JUE對定量數(shù)字PCR

       要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制，務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?；?PCR 運行可以分為三個階段：

指數(shù)期

       每個循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍（假定 ** 反應(yīng)效率）。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增，因為所有試劑均新鮮可用，反應(yīng)的動力學(xué)推動反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。

線性期（高變異性）

       隨著反應(yīng)繼續(xù)，一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩，并且每個循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。

平臺期（終點：使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測）

       反應(yīng)停止，不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物，并且如果放置時間夠長，PCR 產(chǎn)物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應(yīng)動力學(xué)，所以每支試管或每個反應(yīng)將在不同的時間點進(jìn)入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內(nèi)，傳統(tǒng) PCR 進(jìn)行測量，又稱為終點檢測。 數(shù)字PCR技術(shù)是公認(rèn)的液體活檢領(lǐng)域靈敏度比較好的檢測方法。廣州JUE對定量數(shù)字PCR

與常規(guī)PCR方法相比，數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢：

1、能夠***定量：常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線，但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動力學(xué)影響，可進(jìn)行***定量。

2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本。

3、靈敏度高：數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個**PCR反應(yīng)，這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。

4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個**反應(yīng)體系中，***降低了背景信號和***物對反應(yīng)的干擾，擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。 無錫流式數(shù)字PCR解決方案MiniDrop?研發(fā)團(tuán)隊由微流控、光學(xué)、機(jī)電學(xué)、化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等多學(xué)科交叉領(lǐng)域的**組成。

       MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成，該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù)，采用原創(chuàng)性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達(dá)皮升級，檢測線性范圍達(dá)到5個數(shù)量級，各項指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。

       MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。

MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR 應(yīng)用范圍如下：

a. 動植物檢驗檢疫，動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測；

b. 降低篩查成本、縮短檢測周期，適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風(fēng)險評估；適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測等；適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo)；

c. 可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。

d.基因表達(dá)差異監(jiān)測單細(xì)胞研究：測序、PCR

e.無創(chuàng)產(chǎn)前篩查：低成本、快速、傳染性疾?。篐BV、HIV、COVID-19 定量

無創(chuàng)產(chǎn)前篩查：低成本、快速。

       CNV（Copy Number Variations，拷貝數(shù)變異）研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異，測序方法適用于高于30%的變異率檢測，而qPCR的比較**辨在1.5倍左右，數(shù)字PCR通過直接計數(shù)目標(biāo)基因與參照基因( 拷貝數(shù)為1的基因，例如RNaseP) 的數(shù)目，計算比值，直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達(dá)到極高的拷貝數(shù)分辨精度。

       除此之外，dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達(dá)研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待，而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標(biāo)準(zhǔn)品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應(yīng)用方向上，已經(jīng)有大量實驗數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能。

關(guān)于甲基化含量的鑒定。無錫JUE對定量數(shù)字PCR哪家好

單細(xì)胞研究：測序、PCR。廣州JUE對定量數(shù)字PCR

**個體化診療

通過檢測T790M位點突變情況，可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺ARMS檢測技術(shù)的靈敏度有限，沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技術(shù)展現(xiàn)出了****的檢測精度，此外，dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了，可以監(jiān)控突變含量變化，做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。

2.）基因表達(dá)分析

伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細(xì)胞白血?。–ML）患者延長生存期，但是臨床上發(fā)現(xiàn)，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達(dá)量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行測定，結(jié)果檢測下限可以達(dá)到0.001%，顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢 廣州JUE對定量數(shù)字PCR

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浚和儀器將始終以行業(yè)特點為立足點，以客戶需求為導(dǎo)向，不斷地提高自身專業(yè)技術(shù)能力，不停地完善客戶服務(wù)質(zhì)量，在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神，力求與客戶共同進(jìn)步，為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。