廣州流式數(shù)字PCR如何選型

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-02-08

       在定量PCR時(shí),我們常常糾結(jié)一個(gè)問(wèn)題,究竟是相對(duì)定量還是***定量呢?如今,你無(wú)需糾結(jié)了,因?yàn)閿?shù)字PCR(digital PCR)來(lái)了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計(jì)起始樣品中的核酸量,但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來(lái)測(cè)定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。MicroDrop?數(shù)字PCR可廣泛應(yīng)用于科研、醫(yī)療、出入境檢驗(yàn)檢疫等領(lǐng)域。廣州流式數(shù)字PCR如何選型

廣州流式數(shù)字PCR如何選型,數(shù)字PCR

       目前數(shù)字PCR技術(shù)在臨床領(lǐng)域已經(jīng)有著非常***且***地應(yīng)用,例如在病原微生物檢測(cè)中的應(yīng)用:HBV檢測(cè)、HIV檢測(cè)、甲型流感病毒檢測(cè)等;在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用:13/18/21號(hào)染色體三倍體檢測(cè)、遺傳性耳聾檢測(cè)、地中海貧血檢測(cè)及優(yōu)生五項(xiàng)的病毒檢測(cè)等;在**靶向***相關(guān)基因檢測(cè)中的應(yīng)用:肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測(cè)、結(jié)直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測(cè)、乳腺*HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)、神經(jīng)膠質(zhì)瘤IDH基因突變檢測(cè)等。以**靶向***相關(guān)基因檢測(cè)為例,在**形成的超早期,會(huì)出現(xiàn)**細(xì)胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細(xì)胞會(huì)釋放其DNA進(jìn)入外周血,因此通過(guò)分析循環(huán)血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達(dá)到**早期篩查的目的。然而此時(shí)DNA含量極低,對(duì)檢測(cè)的靈敏度和精確性要求極高,目前只有數(shù)字PCR技術(shù)可以檢測(cè)出來(lái)。另外進(jìn)行個(gè)體化***時(shí),需要對(duì)基因組樣本進(jìn)行分析,此時(shí)利用數(shù)字PCR技術(shù)也能**提高結(jié)果的可信性,進(jìn)而建立合理***方案。寧波流式數(shù)字PCR如何選型液體活檢:早篩、用藥、監(jiān)測(cè)、復(fù)發(fā)。

廣州流式數(shù)字PCR如何選型,數(shù)字PCR

       數(shù)字PCR(Digital PCR-dPCR)技術(shù)是一種新的核酸檢測(cè)和定量方法,與傳統(tǒng)定量PCR(qPCR)技術(shù)不同,數(shù)字PCR采用***定量的方式,不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本,直接檢測(cè)目標(biāo)序列的拷貝數(shù)。由于這種檢測(cè)方式具有比傳統(tǒng)qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性,dPCR迅速得到***的應(yīng)用,這項(xiàng)技術(shù)在極微量核酸樣本檢測(cè)、復(fù)雜背景下稀有突變檢測(cè)和表達(dá)量微小差異鑒定方面變現(xiàn)出的優(yōu)勢(shì)已被普遍認(rèn)可,而其在基因表達(dá)研究、microRNA研究、基因組拷貝數(shù)鑒定、**標(biāo)志物稀有突變檢測(cè)、致病微生物鑒定、轉(zhuǎn)基因成分鑒定、NGS測(cè)序文庫(kù)精確定量和結(jié)果驗(yàn)證等諸多方面具有的廣闊應(yīng)用前景已經(jīng)受到越來(lái)越多的關(guān)注。

與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢(shì):

       1、能夠完全定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會(huì)存在差異,另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可進(jìn)行完全定量。

       2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本

       3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬(wàn)個(gè)**PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測(cè)很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。

       4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個(gè)**反應(yīng)體系中,明顯降低了背景信號(hào)和yì zhì物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。

準(zhǔn)確的定量結(jié)果和優(yōu)異的重復(fù)性。

廣州流式數(shù)字PCR如何選型,數(shù)字PCR

儀器特點(diǎn):

MicroDrop-100A樣本制備儀

1、單張芯片一次可處理8個(gè)樣本;

2、20微升體系生成100,000微滴;

3、單次微滴生成*需2分鐘;

4、一鍵式自動(dòng)化操作。儀器參數(shù)樣本體積20μl容量1~8個(gè)樣本微滴總數(shù)100,000反應(yīng)時(shí)間2分鐘/芯片儀器尺寸(寬x深x高)300*400*145mm


MD Detector 微滴檢測(cè)儀

1、全封閉體系,自動(dòng)化流程操作;

2、FAM、VIC雙通道熒光檢測(cè);

3、檢測(cè)靈敏度高達(dá)萬(wàn)分之一;

4、通量達(dá)96個(gè)樣品。儀器參數(shù)線性范圍6個(gè)數(shù)量級(jí)通量1~96個(gè)樣本檢測(cè)通道FAM 、HEX (VIC)儀器尺寸(寬x深x高) 700*500*325mm 能檢測(cè)低至0.01%的突變基因。上海數(shù)字PCR代理商

CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證。廣州流式數(shù)字PCR如何選型

MicroDrop-100系統(tǒng)產(chǎn)品特點(diǎn)


一、適應(yīng)性廣,靈活性高

1、理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應(yīng)用

2、樣本多樣性,樣本通量可達(dá)96個(gè)樣本,支持靈活設(shè)定

3、開(kāi)放式平臺(tái),支持用戶自行開(kāi)發(fā)試劑、產(chǎn)品。


二、靈敏度高,準(zhǔn)確性高

1、***定量——無(wú)需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線

2、采用微滴式技術(shù)高達(dá)100,000個(gè)的微滴

3、線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級(jí),靈敏度高達(dá)萬(wàn)分之一


三、可分析復(fù)雜混合物

1、準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率

2、雙通道熒光檢測(cè),支持EvaGreen染料及探針?lè)?/span>

3、支持多重?cái)?shù)字PCR


四、操作簡(jiǎn)單,使用方便

1、全封閉防污染設(shè)計(jì),一鍵式自動(dòng)化操作。

2、可選全中文分析軟件 廣州流式數(shù)字PCR如何選型

浚和(上海)儀器有限公司是一家供應(yīng)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器和設(shè)備的專業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商,致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來(lái),持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測(cè)院等多個(gè)行業(yè)提供先進(jìn)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。

浚和在不斷引進(jìn)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器設(shè)備的同時(shí),結(jié)合行業(yè)和市場(chǎng)需求,加強(qiáng)和客戶之間的溝通,并與國(guó)際上多家**儀器設(shè)備制造商保持著長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系,不定期地與合作商進(jìn)行技術(shù)交流,努力加強(qiáng)自身技術(shù)力量。公司配備了數(shù)名有著多年行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員,依靠雄厚的技術(shù)實(shí)力、科學(xué)合理的配置方案、專業(yè)的安裝調(diào)試和周到的售后服務(wù),得到了廣大用戶的支持與信賴。

公司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品包括:等離子清洗機(jī)、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機(jī)、水分測(cè)定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時(shí),公司還提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù),如設(shè)備的維護(hù)、驗(yàn)證等。

浚和儀器將始終以行業(yè)特點(diǎn)為立足點(diǎn),以客戶需求為導(dǎo)向,不斷地提高自身專業(yè)技術(shù)能力,不停地完善客戶服務(wù)質(zhì)量,在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神,力求與客戶共同進(jìn)步,為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。