河南外泌體PKH26

目前為止已鑒別了2500余種miRNAs分子。例如，血液外泌體miR-21的升高已被證實與胰腺ai、結(jié)直腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多種中流相關(guān)，可能與其參與中流xue管生成有關(guān)，研究表明肺ai細(xì)胞釋放的外泌體miR-21會通過STAT3依賴機制誘導(dǎo)周圍支氣管細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的產(chǎn)生，從而促進血管生成。在食管ai中，miR-21還可以反映中流的惡性程度，食管ai患者的miR-21水平與良性中流患者相比急劇上升，上升的miR-21水平也與中流的淋巴侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。在膀胱ai患者中，尿液中的miR-21和miR-4454會明顯上調(diào)?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體，但不能提取完整外泌體。河南外泌體PKH26

前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達(dá)水平明顯上升，表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流，發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚，故給早期診斷帶來困難。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達(dá)的miRNA，小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異，膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高，而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高，為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標(biāo)志物。雙歧桿菌外泌體以前無法用超速離心法提取的微囊泡，也通過運用PS親和法實現(xiàn)高純度提取。

為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS（MagCapture?ExosomeIsolationKitPS）提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì)，眾所周知磷脂酰絲氨酸（PS）在活細(xì)胞通過翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，暴露在外泌體膜外側(cè)3）。另外，T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4（Tim4通過巨噬細(xì)胞進行細(xì)胞凋亡的吞噬受體）蛋白通過細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4）?；谏鲜鲋R，我們利用Tim4固化磁珠，在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體，再添加螯合劑洗脫外泌體，這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開發(fā)，并取得了成功。5）這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。

基于免疫細(xì)胞來源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機體對中流的免疫反應(yīng)，外泌體在中流免疫zhiliao方面的潛力受到廣fan關(guān)注。其中樹枝狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體包含大量的MHC-多肽復(fù)合物和免疫刺激相關(guān)的分子，能夠激huo相關(guān)的T細(xì)胞，介導(dǎo)體內(nèi)抗中流應(yīng)答，在多個臨床試驗中表現(xiàn)出良好的抗中流療效。Morse等考察了樹枝狀細(xì)胞外泌體對非小細(xì)胞肺ai患者的療效。結(jié)果表明，患者對樹枝狀細(xì)胞外泌體耐受性良好，1/3患者表現(xiàn)出了對樹枝狀細(xì)胞外泌體的T細(xì)胞響應(yīng)，2/4患者自然殺傷細(xì)胞活性得以激huo。在從體液中提取外泌體后，體液可長期穩(wěn)定保存。

一類外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易?、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白（RPS3）、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子（黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類紅細(xì)胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、細(xì)胞骨架蛋白以及泛素等。通過壓制或去除這些外泌體，有希望壓制疾病發(fā)生。細(xì)胞外泌體優(yōu)勢

實際上，用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體。河南外泌體PKH26

通過改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中沉淀出來。常見的方法是使用聚乙二醇或凝集素來沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力,從而迫使其脫離溶液,進而在低速離心條件下發(fā)生沉降。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結(jié)合蛋白,可通過與外泌體質(zhì)膜糖蛋白上的糖鏈結(jié)合來改變外泌體的溶解性。此外,還可使用魚精蛋白、醋酸鈉、有機溶劑沉淀等方法進行沉淀分離。河南外泌體PKH26