唾液外泌體tmt

利用蛋白質(zhì)免疫印跡和酶聯(lián)免疫吸附分析技術(shù)可以對外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)進行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經(jīng)典表征手段之一，操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白質(zhì)CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2，尿液中)和凋亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白(Alix)等，內(nèi)參蛋白質(zhì)可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脫氫酶，陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB，線粒體標(biāo)志蛋白)或鈣聯(lián)結(jié)蛋白Calnexin。在酶聯(lián)免疫吸附析法中，外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質(zhì)，隨后與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時長的問題，相比較而言，酶聯(lián)免疫吸附分析法比蛋白質(zhì)免疫印跡法更加快速，適用于高通量分析。外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較。唾液外泌體tmt

一類外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易?、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白（RPS3）、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子（黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。組織提取試劑盒生產(chǎn)廠家不同類別的外泌體囊泡有三個征：表面具涂層的膜泡、內(nèi)含纖維的膜泡、電子致密囊泡。

細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡（EVs）表示了細胞間通訊的一個重要模式，作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。泌體是細胞內(nèi)源性的小囊泡，由大多數(shù)細胞分泌。在抗原呈遞細胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后，人們對外泌體的興趣增強，并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。在過去幾年中，有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌，并討論了其潛在的生物學(xué)功能。然而，我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。

干細胞外泌體的六大內(nèi)在改善：細胞排毒：有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。細胞修復(fù)：加速細胞修復(fù)、促進微循環(huán)修復(fù)，修復(fù)痘坑痘印。增加彈性：重塑彈力纖維膠原纖維網(wǎng)狀纖維，恢復(fù)肌膚彈性，提亮皮膚。淡化皺紋、細紋：促進生成纖維細胞，增強皮膚產(chǎn)生蛋白能力，淡化皺紋、頸紋等。減緩衰老：調(diào)節(jié)機體組織間物質(zhì)及信息傳遞速度，加強修復(fù)，減緩衰老。營養(yǎng)供給：針對肌膚脆弱敏感日夜修復(fù)，面部、眼周、肌底多效保護，不斷給皮膚補充充足的營養(yǎng)，喚醒肌膚細胞，有助于后續(xù)產(chǎn)品營養(yǎng)更好的吸收。外泌體在體液中十分穩(wěn)定，同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解。

目前為止已鑒別了2500余種miRNAs分子。例如，血液外泌體miR-21的升高已被證實與胰腺ai、結(jié)直腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多種中流相關(guān)，可能與其參與中流xue管生成有關(guān)，研究表明肺ai細胞釋放的外泌體miR-21會通過STAT3依賴機制誘導(dǎo)周圍支氣管細胞血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的產(chǎn)生，從而促進血管生成。在食管ai中，miR-21還可以反映中流的惡性程度，食管ai患者的miR-21水平與良性中流患者相比急劇上升，上升的miR-21水平也與中流的淋巴侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。在膀胱ai患者中，尿液中的miR-21和miR-4454會明顯上調(diào)。外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物。血清提取試劑盒價格

外泌體又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標(biāo)記蛋白。唾液外泌體tmt

通過對28例前列腺ai癥患者和19例正常人尿液外泌體中的miRNA進行深度測序分析，發(fā)現(xiàn)兩種miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者組明顯下調(diào)，表明尿液外泌體中的特異性miRNA可能作為前列腺ai的新型生物標(biāo)志物。Khurana等［100］將研究對象由miRNAs擴大至多種類型RNA，通過對慢性腎病患者尿液外泌體中各類RNA進行系統(tǒng)研究，在慢性腎病患者組中識別出30種明顯差異的lncRNAs，表明尿液外泌體中的lncRNAs具有作為慢性腎病早期診斷標(biāo)志物的潛力。Skotland等的研究則表明尿液外泌體中的脂質(zhì)能夠作為前列腺ai的新型標(biāo)志物，3種脂質(zhì)標(biāo)志物結(jié)合使用能夠有效提高對前列腺ai的診斷靈敏度(93%)和特異性(100%)。唾液外泌體tmt