黑龍江外泌體circRNA測序

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-09-03

為了解決外泌體實(shí)驗(yàn)遇到的上述的各種問題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì),眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細(xì)胞通過翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),暴露在外泌體膜外側(cè)3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4)?;谏鲜鲋R,我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開發(fā),并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動了大型研究項(xiàng)目。黑龍江外泌體circRNA測序

黑龍江外泌體circRNA測序,外泌體提取試劑盒

事實(shí)上,動物實(shí)驗(yàn)表明:在小鼠急性心肌梗塞術(shù)后,注射來源于間充質(zhì)干細(xì)胞、心臟祖細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞或心肌源性細(xì)胞的外泌體均可改善心臟功能,減輕心臟纖維化,刺激血管生成。例如,心源性細(xì)胞外泌體能通過特異性的巨噬細(xì)胞極化為急性心肌梗死提供心臟保護(hù)作用。心臟再灌注后,CDCexo的輸注降低了大鼠和豬心肌梗死模型的梗死面積,而且CDCexo會減少梗死組織內(nèi)CD68+巨噬細(xì)胞數(shù)量,并改變巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)。自體CD34+干細(xì)胞的移植可以改善缺血組織再灌注后的功能,并降低嚴(yán)重肢體缺血患者的截肢率。其作用機(jī)制在于:CD34+干細(xì)胞分泌的外泌體促進(jìn)小鼠下肢缺血模型血管生成。雖然臨床前研究的證據(jù)表明干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心肌修復(fù)的潛在無細(xì)胞治理劑,但是,目前將外泌體完全用作心臟修復(fù)治理劑之前還是有很多重點(diǎn)問題需要解決。不同來源外泌體的區(qū)別外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型。

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小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,根除或抑制小鼠中流的生長,這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,樹突狀細(xì)胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng),從而抑制中流。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞,從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì),在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。

外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤血管的形成和轉(zhuǎn)移。外泌體(Exosome)能將自身的細(xì)胞因子IL-8和VEGF釋放到細(xì)胞外,作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜表面受體,導(dǎo)致瘤血管快速形成并較終通過發(fā)生EMT過程促進(jìn)瘤的遷移。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)中含有血管生長素、血管內(nèi)皮生長因子等,這些細(xì)胞因子以不同的作用方式促進(jìn)瘤血管的形成,如VEGF通過喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成,誘導(dǎo)纖維蛋白溶解酶原活化物的表達(dá),使得基底膜降解,從而促進(jìn)瘤細(xì)胞的遷移。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來源來區(qū)分。

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外泌體研究可以指導(dǎo)診治肝損傷、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。藥物誘導(dǎo)肝損傷(DILI)大鼠模型中,尿外泌體中的蛋白含量減少,包括CD26、CD81和其他潛在的標(biāo)志物蛋白。而另一項(xiàng)研究則發(fā)現(xiàn)DILI大鼠血清中分離到的外泌體含有更高水平的蛋白,如HSP70、HSP90等。MSCs來源的外泌體可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞增殖相關(guān)基因表達(dá),減弱CCL4誘導(dǎo)的肝損傷。而酒精刺激會促進(jìn)外泌體的分泌,miRNAs水平也會升高,并促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌,喚醒單核細(xì)胞的分化。盡管已取得上述成果,我們對外泌體的研究尚不夠深入,外泌體在肝臟生理和病理中的重要作用及其臨床應(yīng)用仍有待繼續(xù)探索。外泌體可以作為藥物治理的遞送系統(tǒng)。黑龍江外泌體PKH26

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志,而且可作為天然的藥物傳遞載體。黑龍江外泌體circRNA測序

雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢,但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:選擇何種細(xì)胞作為外泌體的供體:如DCs來源的外泌體可用于免疫治理,因其富含組織相容復(fù)合物(MHC)及T細(xì)胞共刺激分子,能在體內(nèi)喚醒T淋巴細(xì)胞,進(jìn)而抑制瘤細(xì)胞增殖;骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用;γδT細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK)、瘤細(xì)胞等均有研究報(bào)道可作為載藥級別外泌體的細(xì)胞來源。黑龍江外泌體circRNA測序

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