血漿外泌體芯片

卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達(dá)譜有明顯差異，表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標(biāo)志物。多項(xiàng)研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數(shù)ai癥的多種病理?xiàng)l件下過(guò)度表達(dá)。尿液外泌體來(lái)源于泌尿系統(tǒng)相關(guān)的各種細(xì)胞，包括腎小球足細(xì)胞、腎小管細(xì)胞和膀胱等，因此尿液外泌體數(shù)目、形態(tài)和生化性質(zhì)的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過(guò)對(duì)前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析，鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標(biāo)志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3，前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG，跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因)，表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測(cè)ai癥患者狀態(tài)的潛力。超速離心是從生物體液或細(xì)胞上清分離外泌體的金標(biāo)準(zhǔn)方法。血漿外泌體芯片

外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。細(xì)胞通過(guò)內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡，小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體（earlyendosome），在多個(gè)蛋白的協(xié)同調(diào)控下，早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個(gè)腔內(nèi)小囊泡的多泡體（multivesicularbodies，MVB），這個(gè)過(guò)程中這些腔內(nèi)小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）會(huì)裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子，泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合。隨后，這些小囊泡會(huì)被釋放到細(xì)胞外，稱為外泌體。外泌體是通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞細(xì)胞膜融合主動(dòng)排除的物質(zhì)，大小均勻，而微泡是由細(xì)胞直接出芽脫落生成，大小不均一。鼻腔灌洗液外泌體提取外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性，為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。

外泌體（Exosome），是細(xì)胞外囊泡（EV）的一種主要類型，是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu)，大多數(shù)細(xì)胞都會(huì)分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中，通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和代謝物等來(lái)發(fā)揮細(xì)胞間通訊功能，參與免疫應(yīng)答、代謝和心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進(jìn)展等多種生理和病理過(guò)程。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體（MVE）的過(guò)程中，內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡（ILV），MVE與細(xì)胞膜融合釋放ILV到細(xì)胞外，即形成外泌體。

細(xì)胞分泌外泌體的過(guò)程一般分為三個(gè)階段:(1)質(zhì)膜內(nèi)陷,形成早期內(nèi)吞小泡;(2)內(nèi)吞小泡向內(nèi)萌發(fā)成熟,形成多囊泡體;(3)多囊泡體與質(zhì)膜融合,并釋放出囊泡內(nèi)容物,形成外泌體。外泌體具有獨(dú)特的理化性質(zhì),其密度為1.13~1.19g/mL,由平均厚度小于5nm的雙層脂膜所包裹,具有典型杯狀形態(tài),呈現(xiàn)為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈,其質(zhì)膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂構(gòu)成,另有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)等生物活性大分子,其中主要為蛋白質(zhì),且大部分蛋白為所有來(lái)源外泌體所共有,只有小部分與其來(lái)源有關(guān),為其分泌細(xì)胞的特有蛋白,能夠反映分泌細(xì)胞的類型和生理病理狀態(tài)。除此之外,外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸,并將其運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞,發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。外泌體是一種由活細(xì)胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。

小鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動(dòng)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，根除或抑制小鼠中流的生長(zhǎng)，這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外，樹(shù)突狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體也能夠通過(guò)激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng)，從而抑制中流。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物，能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)，在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性，使其在藥物遞送方向大有潛力。血漿提取試劑盒步驟

在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可被蛋白酶剪切，碎片作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。血漿外泌體芯片

各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá)，由其決定外泌體被運(yùn)輸往哪一種細(xì)胞，期望開(kāi)發(fā)利用該特征的新型DDS。外泌體在體液中十分穩(wěn)定，同時(shí)外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會(huì)分解。另外在從體液中提取外泌體后，體液可長(zhǎng)期穩(wěn)定保存，因此外泌體有望成為臨床檢測(cè)的新型疾病生物標(biāo)記。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測(cè)出，特別是血液中釋放的病細(xì)胞來(lái)源的外泌體，其與正常細(xì)胞來(lái)源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目，并作為癥狀早期診斷技術(shù)，應(yīng)用于與癥狀進(jìn)展相關(guān)的研究。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病、膀胱疾病的新型診斷標(biāo)記，髓液中的外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標(biāo)記物。血漿外泌體芯片

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